抗制造技术

本发明专利技术公开了一类抗

【技术实现步骤摘要】
抗CD146跨膜受体的纳米单域抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一类抗
CD146
跨膜受体的纳米单域抗体
。

技术介绍

[0002]CD146
是在人黑色素瘤细胞膜上发现的一种
113kDa
的糖蛋白，又称为黑色素瘤细胞黏附分子
(MCAM)。CD146
作为一种跨膜受体具有较大的胞外配体结合区和较短的胞内区，
CD146
在许多肿瘤和内皮细胞中高度表达，近些年的研究发现
CD146
在肿瘤血管生成
、
促进转移迁移进程和化放疗耐药中发挥着重要的作用
。CD146
作为细胞粘附分子，表达的上调增强了
CD146
与其配体之间的相互作用，改变细胞
‑
细胞和细胞
‑
基质粘附之间的平衡，同时促转移细胞因子的分泌增加导致细胞通过血管或淋巴循环扩散，并外渗至远处器官导致肿瘤的转移
。
此外
CD146
作为共同受体可以增强促血管生成信号传导从而促进肿瘤细胞生长
、
增殖
、
分化和存活
。
因此，靶向
CD146
是治疗肿瘤转移的一种潜在策略
。
[0003]目前已有部分
CD146
抗体被用于肿瘤靶向治疗
。
例如
M2J
‑
1、TsCD146、AA98
等可以特异性识别
CD146
，并能抑制黑色素瘤
、
胰腺癌和乳腺癌等肿瘤的新生血管生成和肿瘤转移进程
。
但是，以上
CD146
抗体均属于单克隆抗体，存在着共性问题，即分子量大
、
容易引起免疫原性反应
、
不易通过血脑屏障
、
生产成本高等，这些缺点制约了单克隆抗体的临床推广
。
因此，寻求或设计一种能够克服上述问题的新型
CD146
抗体，已成为当前乳腺癌靶向治疗研究中至关重要的方向之一
。
[0004]近年来，发现了一类新型抗体
——
纳米抗体，也称为单域抗体或
VHH
抗体
。
这种抗体分子非常小，存在于骆驼
、
羊驼和鲨鱼等生物体中，具有高度的特异性和穿透性
。
利用其分子特性，纳米抗体已被广泛应用于提高穿透性和作为特异性的影像示踪剂
。
相比单克隆抗体，纳米抗体在医学上有着更广泛的应用前景
。

技术实现思路

[0005]鉴于
CD146
的潜在临床治疗价值和单克隆抗体的缺陷，本专利技术开展了
CD146
纳米抗体的合成研究，提供一类抗
CD146
跨膜受体的纳米单域抗体，以期能够制备出具有更高效性和特异性的治疗和检测工具
。
[0006]为了解决上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0007]本专利技术提供了一类抗
CD146
跨膜受体的纳米单域抗体，所述纳米抗体包括互补决定区
CDR
，所述互补决定区
CDR
包括氨基酸序列如下述
(1)
‑
(3)
中的一种：
[0008](1)SEQ ID NO
：8所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
10
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
12
所示的
CDR3
；
[0009](2)SEQ ID NO
：
15
所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
17
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
19
所示的
CDR3
；
[0010](3)SEQ ID NO
：
22
所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
24
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
26
所示的
CDR3。
[0011]进一步的，所述纳米抗体还包括框架区
FR
，所述框架区
FR
包括氨基酸序列如下述
(1)
‑
(4)
中的一种：
[0012](1)SEQ ID NO
：7所示的
FR1、SEQ ID NO
：9所示的
FR2、SEQ ID NO
：
11
所示的
FR3、SEQ ID NO
：
13
所示的
FR4
；
[0013](2)SEQ ID NO
：
14
所示的
FR1、SEQ ID NO
：
16
所示的
FR2、SEQ ID NO
：
18
所示的
FR3、SEQ ID NO
：
20
所示的
FR4
；
[0014](3)SEQ ID NO
：
21
所示的
FR1、SEQ ID NO
：
23
所示的
FR2、SEQ ID NO
：
25
所示的
FR3、SEQ ID NO
：
27
所示的
FR4。
[0015]进一步的，所述纳米抗体的氨基酸序列如下述
(1)
‑
(3)
中的一种：
[0016](1)SEQ ID NO
：1所示；
[0017](2)SEQ ID NO
：2所示；
[0018](3)SEQ ID NO
：3所示
。
[0019]将其分别编号为
161
，
432
‑1，
469
‑
2。
[0020]本专利技术还提供了上述编码基因，如下述
(1)
‑
(3)
中的一种：
[0021](1)SEQ ID NO
：4所示；
[0022](2)SEQ ID NO
：5所示；
[0023](3)SEQ ID NO
：6所示
。
[0024]本专利技术还提供了上述编码基因的表达盒
。
[0025]本专利技术还提供了上述编码基因的重组载体
。
[0026]本专利技术还提供了上述编码基因的宿主本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一类抗
CD146
跨膜受体的纳米单域抗体，其特征在于，所述纳米抗体包括互补决定区
CDR
，所述互补决定区
CDR
包括氨基酸序列如下述
(1)
‑
(3)
中的一种：
(1)SEQ ID NO
：8所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
10
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
12
所示的
CDR3
；
(2)SEQ ID NO
：
15
所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
17
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
19
所示的
CDR3
；
(3)SEQ ID NO
：
22
所示的
CDR1、SEQ ID NO
：
24
所示的
CDR2、SEQ ID NO
：
26
所示的
CDR3。2.
如权利要求1所述抗
CD146
跨膜受体的纳米单域抗体，其特征在于，所述纳米抗体还包括框架区
FR
，所述框架区
FR
包括氨基酸序列如下述
(1)
‑
(4)
中的一种：
(1)SEQ ID NO
：7所示的
FR1、SEQ ID NO
：9所示的
FR2、SEQ ID NO
：
11
所示的
FR3、SEQ ID NO
：
13
所示的
FR4
；
(2)SEQ ID NO
：
14
所示的
FR1、SEQ ID NO
：
16
所示的
FR2、SEQ ID NO
：
18
所示的
FR3、SEQ ID NO
：
20
所示的
FR4
；
(3)SEQ ID NO
...

【专利技术属性】
技术研发人员：林豪雨，梁元科，曾德，孙何兴，黄锴源，周晓玲，
申请(专利权)人：汕头大学医学院第一附属医院，
类型：发明
国别省市：