用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组及应用制造技术

本发明专利技术属于生物种质资源鉴定技术领域，公开了一种用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组及应用，用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组包括引物组一和引物组二；引物组一为猪

【技术实现步骤摘要】
用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组及应用


[0001]本专利技术属于生物种质资源鉴定
，尤其涉及一种用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组及应用
。

技术介绍

[0002]目前，生物种质资源是以物种为单元的遗传多样性资源，是人类社会可持续发展的的重要物质基础，是国家重大性战略基础资源，关系到国家安全与主权，是“生物经济”时代基因工程与产业化的不可替代的宝贵原材料，是科技创新的基础物质，正在成为世界各国争夺的重点
。
畜禽遗传资源是生物种质资源的重要组成部分，是长期进化形成的宝贵资源，也是同人类关系最为密切
、
最为直接的部分
。
[0003]由于我国历史悠久，民族众多，幅员辽阔，地理和气候的差异很大，我国成为世界上畜禽遗传资源最丰富的国家之一，且具有丰富多彩的多样性，其中有许多世界独一无二的珍贵资源
。
据目前的调查，共有畜禽品种
(
类群
)576
个，其中地方品种
(
类群
)
约占四分之三
。
这些地方品种经过长期选择，形成了独特的种质特性
。
时至今日，它们在畜牧业的发展中仍然发挥着重要作用
。
我国政府愿意同各国在畜禽遗传资源领域开展合作研究及交流，为全球畜禽遗传资源的保护
、
利用和畜牧业的持续发展而共同努力
。
[0004]从历史上看，早在两千多年以前罗马帝国就曾引进过我国猪种r/>。19
世纪以来，随着国家的衰落和混乱，发达国家就一直对我国畜禽种质资源进行掠夺
。
如
19
世纪初，番禺猪流入英
、
美，后又流入德
、
法
、
日等国，美国利用我国猪种育成波中猪，英国培育成巴克夏等优秀现代高产猪种；
20
世纪
50
年代，英国利用我国北京鸭育成著名的樱桃谷鸭，创造了巨大的经济价值；美国
、
法国利用梅山猪培育出高繁殖性能的现代瘦肉型猪种；其他诸如丝毛乌骨鸡
、
狮头鹅
、
枫泾猪
、
金华猪
、
关中驴
、
南阳牛
、
鲁西牛
、
内蒙绒山羊等
30
余个品种流入亚洲
、
欧洲
、
美洲及大洋洲的一些国家和地区
。
[0005]随着生物技术的发展，我国优质的种质资源的优良特性，已经一些国家和组织觊觎的对象，试图通过各种手段
(
精液
、
胚胎
、
血样和
DNA
样品等
)
，获得我国优质的畜禽种质资源
。
忽视种质资源管理，将在一定程度上危及我国畜禽种质资源的主权和安全
。
目前种质资源世界上通常只承认其主权，不承认其知识产权，而利用种质资源培育出的优良品种
、
从种质资源分离出的基因则受知识产权保护
。
所以必须尽快建立畜禽种质资源基因鉴定评价体系，保证我国畜禽种质资源不在国际交流中流失，确保我国畜禽种质资源的自主地位
。
[0006]随着我国经济的发展，中国经济进入快速发展阶段人民生活水平的提高，对肉
、
蛋
、
奶等动物性蛋白的需求日益扩大，国内畜牧业快速发展，对良种需求也随之扩大，我国每年都从国外引进大量优良种畜
、
种禽
、
精液和胚胎等，用于改良国内品种和发展畜禽养殖业
。
尤其是现代动物繁殖技术的广泛应用，现代动物繁殖技术包括人工授精
(AI)
和胚胎移植
(ET)
，已成为动物繁殖和遗传育种的主要手段，在畜牧生产中发挥着极其重要的作用
。
随着近年来人工授精和胚胎移植技术在我国的广泛应用，奶牛应用冷冻精液的普及率已在
90
％以上
。
进口优质动物遗传物质的数量也在大幅增加
。
我国引进的家畜精液主要是牛精
液
、
羊精液
、
猪精液，进口胚胎的种类包括牛胚胎
、
绵羊和山羊胚胎
。
[0007]但是随之而来也产生一些问题，目前我国进境动物遗传物质的检疫和监督管理主要侧重于疫病安全性管理等方面，主要目的是阻止疫病传入，但是对于动物遗传物质作为种质资源的质量
(
含遗传性状和遗传性疾病
)
要求很少，同时检测手段相对匮乏
。
这样将造成引进动物遗传物质的质量和遗传性状无法保证，不利于引进优良品种和国内的品种改良
。
[0008]另外，在海关口岸检验检疫工作中，经常发生随旅客和货物夹带胚胎
、
精液
、
血液及
DNA
等种质资源的情况，由于缺乏可行的鉴定与评价技术手段，为现场执法带来一定困难，可能造成我国优质种质资源的流失，为我国将来畜牧业和生物多样性的发展带来不可估量的损失
。
[0009]根据以上三种情况，为阻止我国畜禽种质资源的流失，维护我国引进优良家畜品种的质量，为口岸执法工作提供有效的技术手段，亟需建立一种进出境畜
、
禽种质资源鉴定与检验方法
。
[0010]过去的几十年科学家们对畜禽种质资源所采用的形态标记
、
细胞标记和生化标记，均是以基因表达结果为基础的，是对基因的间接反映，而近年来利用的分子标记
(MolecularMarkers)
是
DNA
水平遗传变异的反映，是对基因的直接反映
。
分子标记直接在
DNA
分子上检测生物间的差异
。DNA
分子标记是能反映生物个体或群种间基因组中某种差异特征的
DNA
片段，分子标记技术就是以检测生物个体在基因或基因型上所产生的变异来反映生物个体之间的差异
。
[0011]我国家畜品种资源丰富，据统计，我国现有各种畜禽品种
596
个，已列入
《
中国家畜家禽种志
》
的就达
280
个
。
起源的多元化以及自然生态环境的复杂多样性，造就了我国极为丰富的家畜遗传资源，如举世闻名的太湖猪
、“三黄鸡”、
北京鸭
、
东北民猪等
。
鉴于家畜种质资源保护的重要性，国内外学者对家畜种质资源保护理论与鉴定方法进行了积极的探索
。
我国进出境动植物检验检疫法规正不断完善，但对不同种属胚胎
、
精本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组，其特征在于，所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组包括引物组一和引物组二；其中，所述引物组一为猪
qPCR
引物组，所述猪
qPCR
引物组的核苷酸序列为
SEQ ID NO
：1～
SEQ ID NO
：
24
；所述引物组二为牛
qPCR
引物组，所述牛
qPCR
引物组的核苷酸序列为
SEQ ID NO
：
25
～
SEQ ID NO
：
55。2.
如权利要求1所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组，其特征在于，所述引物组一用于鉴定猪种属及其亚种属中的差异表达基因；所述引物组二用于鉴定牛种属及其亚种属中的差异表达基因
。3.
一种实施如权利要求1～2任意一项所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组的用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组筛选方法，其特征在于，所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组筛选方法包括以下步骤：步骤一，通过
NCBI
查找不同种属的等基因组全序列，通过生物信息学软件分析不同种属间差异表达的基因；步骤二，随机选取差异表达的基因序列，根据基因序列使用
Primer Premier 5.0
软件设计引物，并在
NCBI
中用
BLAST
进行同源性分析；步骤三，在无菌超净台中取样，用被检样品提取总
DNA
并作为模板，用筛选基因设计出的引物进行
PCR
扩增，进行定性
、
定量
PCR
扩增并检验
。4.
如权利要求3所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组筛选方法，其特征在于，所述不同种属包括牛
、
猪
。5.
如权利要求3所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组筛选方法，其特征在于，所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组的筛选方法还包括：对于同种家畜的不同品种
、
种系的区分，采用基因芯片技术筛选不同品种
、
种系间差异表达的基因，根据芯片结果选取差异表达的基因，利用荧光定量
PCR
方法对芯片的结果进行验证，观察定性和荧光定量
PCR
实验的结果同芯片结果是否一致；根据基因芯片筛选和荧光定量
PCR
验证一致的基因，并根据基因设计引物，以被检样品
DNA
为模板进行
PCR
扩增，鉴定是不同品种
、
种系
。6.
如权利要求3所述用于进出境牛和猪种属和种系鉴定的引物组筛选方法，其特征在于，...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏菁，张子群，王琦，曾繁华，姜冰，高远，宋铭忻，吴鑫本，徐浩洋，孙卓，
申请(专利权)人：哈尔滨海关技术中心，
类型：发明
国别省市：