一种高效复合微生物菌剂的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高效复合微生物菌剂的制备方法，具体涉及微生物菌剂技术领域，包括具体步骤如下：S1、微生物筛选，S2、培养和增殖，S3、混合组合，S4、增稠粘接混合，S5、菌剂调理，S6、质量测试，S7、合格筛选，S8、菌剂隔绝储存。本发明专利技术采用根瘤菌液、异养菌液、蓝藻菌液、硝化细菌液、反硝化细菌液、假单胞菌液放入混合机内，待其混合后加入活化酶液，微生物菌剂预制液倒入反应釜内，活性炭粉末液剂、生物膜剂，待活性炭粉末液剂和生物膜剂沉淀后加入多糖、蛋白质、微生物聚羟基丁酸酯、微生物胶原蛋白粘合剂进行混合制备，使复合微生物菌剂粘接在污水中形成多层次分散漂浮，处理吸附污染物效率更高。更高。更高。

【技术实现步骤摘要】
一种高效复合微生物菌剂的制备方法


[0001]本专利技术涉及微生物菌剂
，更具体地说，本专利技术涉及一种高效复合微生物菌剂的制备方法。

技术介绍

[0002]复合微生物菌剂是一种含有多种不同微生物菌种的制剂，它通过将多种具有有益特性的微生物菌种混合在一起，以协同作用的方式发挥生物修复、生物控制或其他应用效果。
[0003]现有公开文献中，专利公开号CN113817631A的专利公开了一种高效去除氨和硫化氢的复合微生物菌剂，针对硫化氢等其他臭气是否具有优良的去除效果，另外该专利技术专利中发现的两种菌的适宜温度为28℃
‑
30℃，均不适应低温或高温环境，应用范围受限；则通过上述的复合微生物菌剂，通过选择的复合乳酸菌和复合酵母菌的混合菌剂，或复合乳酸菌、复合酵母菌和复合芽孢菌的混合菌剂，经过各菌的协同作用，能够高效去除氨气和硫化氢，达到除臭的目的，可从污染源头到环境控制，实现对污水处理厂、密闭的污泥堆肥厂、粪污处理厂及产生氨气和硫化氢的环境中的除臭；但是该方法存在如下缺陷；
[0004]上述复合微生物菌剂在制备使用时，直接接触污水，污水接触时难以形成密集多方位分散网线，因此难以分散在污水的各个层面位置处，单单依靠搅拌又会造成大量的复合微生物菌损坏，复合微生物菌剂处理污水效率较低，为此需要提供一种高效复合微生物菌剂的制备方法。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术的上述缺陷，本专利技术提供一种高效复合微生物菌剂的制备方法。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种高效复合微生物菌剂的制备方法，包括具体步骤如下：
[0007]S1、微生物筛选，选取根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份、活化酶液20—30份、活性炭粉末液剂50—80份、生物膜剂5—10份、多糖5—10份、蛋白质5—10份、微生物聚羟基丁酸酯5—20份、微生物胶原蛋白粘合剂5—10份；
[0008]S2、培养和增殖，将培养基瓶体放入到灭菌设备中，灭菌10—20min，选取的根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份放置在培养基容器内，在培养基内部加入营养液，再使用酸碱调节剂盐酸或氢氧化钠对培养基进行pH值调节，使其达到微生物生长所需的最适pH范围，将经调整pH值的培养基倒入装有培养基的容器中，培养10—20min，温度设为30
‑
35℃，将风机输送含氧35％的空气进入到容器内，且空气需要经消杀液过滤消杀，增殖2—5h；
[0009]S3、混合组合，根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝
化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份放入混合机内，混合机控制转速为20
‑
60r/min，混合时间为10—20min，温度控制为25
‑
35℃，待其混合后加入活化酶液20—30份，将转速降低为10
‑
15r/min，制备形成微生物菌剂预制液；
[0010]S4、增稠粘接混合，微生物菌剂预制液倒入反应釜内，再加入活性炭粉末液剂50—80份、生物膜剂5—10份，冲入氦气进入到反应釜内，氦气保持时间为5—10min，待活性炭粉末液剂和生物膜剂沉淀20—30min后加入多糖5—10份、蛋白质5—10份、微生物聚羟基丁酸酯5—20份、微生物胶原蛋白粘合剂5—10份搅拌5—20min，将反应釜降温至15
‑
25℃，保温3—5min，待其上升至室温，制备形成粘接微生物菌剂；
[0011]S5、菌剂调理，将石碱、皂化剂、聚丙烯酰胺、羟丙基甲基纤维素、丙三醇、甘油放置在粘接微生物菌剂内，利用无水乙醇灌入到粘接微生物菌剂内，灌入5—10min后沉淀20—30min，取出制备为复合微生物菌剂；
[0012]S6、质量测试，通过培养方法或分子生物学技术，来确定复合微生物菌剂中微生物的总数量，这可以评估复合微生物菌剂中微生物的活性和存活状态，主要通过菌落计数法，对有益菌含量进行测试，检测并计量菌剂中特定种类的有益微生物的数量，并且采用菌落计数法方法测试后，通过污染物测试，检测复合微生物菌剂中是否存在有害菌、致病菌、重金属或农药污染物，主要通过化学检测，测试后在对复合微生物菌剂的活性进行测试，能够通过观察其对特定底物的降解或者产酶活性指标来进行检测，复合微生物菌剂产物分析检测时，检测并分析菌剂在发酵过程中产生的有益代谢产物，主要为有机酸、激素，常用的方法为色谱法，检测复合微生物菌剂的各项数据；
[0013]S7、合格筛选，将复合微生物菌剂质量检测数据输送到数据库内进行识别，采取的复合微生物菌剂检测数值与数据库记录的合格数据在5—10S内精确比对，如果检测的数据在合格数值的一定范围内两个数值完全相等，则认为复合微生物菌剂检测数据合格，如复合微生物菌剂检测数据超出范围，则发出报警并且对该检测数据生成报告，提示给制备人员，按照复合微生物菌剂检测数据自行添加数值到指定范围内，确保复合微生物菌剂各个检测质量为合格状态；
[0014]S8、菌剂隔绝储存，温度控制复合微生物菌剂通常需要在低温5
‑
10℃下保存，避免冻结和融化的频繁循环，需要避光存放，可以使用暗色玻璃瓶、铝箔袋等遮光容器来包装菌剂，阻挡光线的进入，选取干燥环境，复合微生物菌剂可以使用干燥剂或密封袋来吸湿，再将复合微生物菌剂在无菌条件下进行储存，选择合适的容器，并在工作台、操作手套和工具等与菌剂接触的部分使用消毒水雾化喷洒消毒，储存人员需要每间隔10—20h定期检查复合微生物菌剂的保存条件和有效期限，确保菌株的存活率和活性，发现复合微生物菌剂已经失活或过期，及时更新储存数据并采取无害化处理过期复合微生物菌剂。
[0015]优选地，所述S1中根瘤菌液制备方法为根瘤菌种转接到YMA培养基斜面上，25℃培养1天，获得菌苔，将菌苔浸泡在0.2g/L的酵母浸膏、8g/L的甘露醇、0.74g/L的无水磷酸氢二钾、0.12g/L的七水硫酸镁、0.18g/L的二水氯化钙、10g/L的琼脂内混合，混合时pH在6.7～6.9之间，溶氧为40％～50％制备形成，所述S1中异养菌液采集方法为氨氮和亚硝酸盐氮降至0.85mg/L以下后，向桶中加入NH4Cl标准溶液2—10ml，调节样品中的NH4+含量至6mg/L，每2～5天测定其氨氮指标，待其降至最低，重复添加NH4Cl标准溶液5—10次，温度控制为25℃，直到异养菌液形成，所述S1中活化酶液采集方法为向活化后的酵母乳中加入食盐
10—20g，升温至50
‑
60℃后进行恒温自溶，对自溶后的酵母乳进行酶解，得到酶解酵母乳，使用的酵母分离机对酶解酵母乳进行过滤分离后取出酶解液上清液，即可制备活化酶液。
本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：包括具体步骤如下：S1、微生物筛选，选取根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份、活化酶液20—30份、活性炭粉末液剂50—80份、生物膜剂5—10份、多糖5—10份、蛋白质5—10份、微生物聚羟基丁酸酯5—20份、微生物胶原蛋白粘合剂5—10份；S2、培养和增殖，将培养基瓶体放入到灭菌设备中，灭菌10—20min，选取的根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份放置在培养基容器内，在培养基内部加入营养液，增殖2—5h；S3、混合组合，根瘤菌液100—150份、异养菌液100—150份、蓝藻菌液50—80份、硝化细菌液50—70份、反硝化细菌液30—50份、假单胞菌液20—40份放入混合机内，制备形成微生物菌剂预制液；S4、增稠粘接混合，微生物菌剂预制液倒入反应釜内，再加入活性炭粉末液剂50—80份、生物膜剂5—10份，冲入氦气进入到反应釜内，将反应釜降温至15
‑
25℃，保温3—5min，待其上升至室温，制备形成粘接微生物菌剂；S5、菌剂调理，将石碱、皂化剂、聚丙烯酰胺、羟丙基甲基纤维素、丙三醇、甘油放置在粘接微生物菌剂内，利用无水乙醇灌入到粘接微生物菌剂内，灌入5—10min后沉淀20—30min，取出制备为复合微生物菌剂；S6、质量测试，通过培养方法或分子生物学技术，来确定复合微生物菌剂中微生物的总数量，检测复合微生物菌剂的各项数据；S7、合格筛选，将复合微生物菌剂质量检测数据输送到数据库内进行识别，采取的复合微生物菌剂检测数值与数据库记录的合格数据在5—10S内精确比对，确保复合微生物菌剂各个检测质量为合格状态；S8、菌剂隔绝储存，温度控制复合微生物菌剂通常需要在低温5
‑
10℃下保存，储存人员需要每间隔10—20h定期检查复合微生物菌剂的保存条件和有效期限，确保菌株的存活率和活性，发现复合微生物菌剂已经失活或过期，及时更新储存数据并采取无害化处理过期复合微生物菌剂。2.根据权利要求1所述的一种高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述S1中根瘤菌液制备方法为根瘤菌种转接到YMA培养基斜面上，25℃培养1天，获得菌苔，将菌苔浸泡在0.2g/L的酵母浸膏、8g/L的甘露醇、0.74g/L的无水磷酸氢二钾、0.12g/L的七水硫酸镁、0.18g/L的二水氯化钙、10g/L的琼脂内混合，混合时pH在6.7～6.9之间，溶氧为40％～50％制备形成。3.根据权利要求1所述的一种高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述S1中异养菌液采集方法为氨氮和亚硝酸盐氮降至0.85mg/L以下后，向桶中加入NH4Cl标准溶液2—10ml，调节样品中的NH4+含量至6mg/L，每2～5天测定其氨氮指标，待其降至最低，重复添加NH4Cl标准溶液5—10次，温度控制为25℃，直到异养菌液形成。4.根据权利要求1所述的一种高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述S1中活化酶液采集方法为向活化后的酵母乳中加入食盐10—20g，升温至50
‑
60℃后进行恒温自溶，对自溶后的酵母乳进行酶解，得到酶解酵母乳，使用的酵母分离机对酶解酵母乳进行过
滤分离后取出酶解液上清液，即可制备活化酶液。5.根据权利要求1所述的一种高效复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于：所述S2中灭菌方法包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：李龙伟，李敬伟，李登辉，
申请(专利权)人：河南漯效王生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：