脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体具有以下优势：(1)易于保存，性质稳定；(2)体积小，穿透力，易吸收；(3)不引起体内的免疫排斥反应；(4)无基因突变等致瘤性。研究结果表明，本发明专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体能够恢复或明显降低脑梗死面积，提高神经功能，恢复运动功能，显著减轻脑组织水肿。因此，本发明专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体能够有效预防和治疗缺血性脑卒中，为临床上选择治疗缺血性脑卒中的药物提供了一种创新的选择。物提供了一种创新的选择。物提供了一种创新的选择。

【技术实现步骤摘要】
脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，尤其涉及一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。

技术介绍

[0002]脑卒中，也被称为脑中风，具有高发病率、死亡率、复发率和致残率的特点，因此给全球社会带来了沉重的经济负担。脑卒中主要分为两种，即缺血性脑卒中和出血性脑卒中，在所有卒中病例中缺血性卒中的比例大于85％。为了减少缺血性卒中的原发损伤，限制梗死面积，需要及时进行再灌注治疗(溶栓或取栓)。然而，缺血再灌注本身会在脑缺血再灌注损伤过程中引起损伤和功能障碍。因此寻找治疗缺血性脑卒中的药物迫在眉睫。
[0003]间充质干细胞主要是通过其旁分泌作用而发挥其治疗能力，旁分泌作用也被认为是在维持细胞内环境平衡及疾病转归过程中细胞间通讯的重要环节。而这其中，外泌体在细胞的旁分泌作用中发挥了极大的作用。外泌体是一种由细胞分泌的直径约为30～150nm的囊泡，属于细胞外囊泡的一种，包含了丰富的RNA、蛋白质、脂质等。外泌体参与了许多复杂的生理过程，诸如其可在细胞间通讯中起到至关重要的作用，还参与细胞衰老、分化以及免疫应答等过程。而关于脐带间充质干细胞来源的外泌体治疗缺血性脑卒中尚未见报道。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。
[0007]本专利技术还提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑梗死中药物中的应用。
[0008]本专利技术还提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑水肿药物中的应用。
[0009]优选的，所述脐带间充质干细胞来源的外泌体改善了神经功能。
[0010]优选的，所述药物还包括药学上可接受的辅料。
[0011]本专利技术还提供了一种预防和/或治疗缺血性脑卒中的药物，所述药物包括有效成分和药学上可接受的辅料，所述有效成分为脐带间充质干细胞来源的外泌体。
[0012]优选的，所述脐带间充质干细胞来源的外泌体的有效含量占药物的质量百分数为20％～80％。
[0013]相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0014]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性
脑卒中药物中的应用，本专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体具有以下优势：(1)易于保存，性质稳定；(2)体积小，穿透力，易吸收；(3)不引起体内的免疫排斥反应；(4)无基因突变等致瘤性。研究结果表明，本专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体能够显著减轻脑组织水肿，还能恢复或明显降低脑梗死面积，改善神经功能，恢复运动功能。因此，本专利技术的间充质干细胞的外泌体能够有效预防和/或治疗缺血性脑卒中，为临床上选择治疗缺血性脑卒中的药物提供了一种创新的选择。
附图说明
[0015]图1中A为透射电镜测定的脐带间充质干细胞的外泌体的形态；B为脐带间充质干细胞的外泌体粒径结果图；C为脐带间充质干细胞的外泌体膜表面上的CD63、Alix和TSG101的表达结果；
[0016]图2中A为不同组别大鼠的脑组织经TTC实验后的对比结果图；B为不同组别大鼠的脑梗死面积对比结果；
[0017]图3为不同组别大鼠的神经行为学评分对比结果；
[0018]图4为不同组别大鼠的左侧和右侧大脑的含水量量化后的数据结果；
[0019]图5为不同组别大鼠脑组织的HE染色结果对比图。
具体实施方式
[0020]本专利技术提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。
[0021]本专利技术还提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑梗死中药物中的应用。
[0022]本专利技术还提供了一种脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑水肿药物中的应用。
[0023]在本专利技术中，所述脐带间充质干细胞优选地取自人源，与其他组织来源的间充质干细胞相比较，人脐带间充质干细胞具有以下优势：(1)无伦理学争议、分离简便、来源丰富，脐带为临床上的医疗废弃物，胎儿生产后丢弃的脐带组织均可用于人脐带间充质干细胞的分离，不会对捐赠者产生伤害；(2)增殖速度快，扩展能力强；(3)无致瘤性；(4)低组织抗原性，高组织相容性。所述脐带间充质干细胞来源的外泌体改善了神经功能，所述神经功能包括神经行为能力。
[0024]在本专利技术中，所述药物还优选的包括药学上可接受的辅料。
[0025]本专利技术还提供了一种预防和/或治疗缺血性脑卒中的药物，所述药物包括有效成分和药学上可接受的辅料，所述有效成分为脐带间充质干细胞来源的外泌体。
[0026]本专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体可以通过常规方法制成任何常规的制剂形式，具体地说本专利技术的脐带间充质干细胞来源的外泌体制成的药物剂型可为颗粒型、片剂、胶囊或注射剂，所述脐带间充质干细胞来源的外泌体的有效含量占药物的质量百分数为20％～80％。本专利技术所述的“有效含量”指治疗剂治疗、缓解或预防目标疾病或状况的量，或是表现出可检测的治疗或预防效果的量。
[0027]在以下的实施例中，脐带间充质干细胞无血清培养基购自北京友康。
[0028]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0029]实施例1
[0030]人脐带间充质干细胞来源的外泌体(Human Umbilical cord MesenchymalStem Cells
‑
Derived Exosome，HUC
‑
MSC
‑
Exos，又称MSC
‑
EVs)的制备方法，步骤如下：
[0031]S1、脐带间充质干细胞的分离
[0032](1)将新鲜脐带组织放在100mm培养皿中，倒入加有双抗的生理盐水，没过脐带即可。使用手术剪剪去两头结扎部分后，用止血钳向下挤出淤血，挤出淤血后更换生理盐水、重复操作3～4次，尽量将淤血清理干净。
[0033](2)用手术剪将清洗过的脐带剪成2～3cm小段放入新鲜的加有双抗的生理盐水中，如仍有淤血残留，使用上一步骤相同的方法将淤血清理干净，直到脐带中的淤血全部清理干净为止。
[0034](3)在100mm的培养皿中倒入1mL的无血清培养基(北京友康，脐带间充质干细胞无血清培养基)，以便为脐带提供一个湿润的环境。取一段脐带，寻找到两根脐动脉和一根脐静脉所在之处。用手术剪剪开脐带，用钩齿镊将静脉血管的粘膜清除及血管剔除干净，然后清除动脉血管及其粘膜。
[0035](4)剔除血管后用钩本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗缺血性脑卒中药物中的应用。2.脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑梗死中药物中的应用。3.脐带间充质干细胞来源的外泌体在制备预防和/或治疗脑水肿药物中的应用。4.根据权利要求1～3任意一项所述的应用，其特征在于，所述脐带间充质干细胞来源的外泌体改善了神经功能。5.根据权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：钟理，郑梦娇，甄洪诚，
申请(专利权)人：河北中琨生物工程有限责任公司，
类型：发明
国别省市：