复合交联生物瓣膜材料的制备方法及复合交联生物瓣膜材料技术

本发明专利技术公开了一种复合交联生物瓣膜材料的制备方法及生物瓣膜材料，所述方法依次包括如下步骤：步骤S1、将生物瓣膜材料置于戊二醛溶液中进行初步交联；步骤S2、将步骤S1中初步交联后的生物瓣膜材料转移至EDC和NHS的缓冲溶液中进行复合交联。本发明专利技术的复合交联生物瓣膜材料的制备方法利用EDC、NHS进行复合交联，能够有效减少生物瓣膜中糖胺聚糖的流失，增加糖胺聚糖的稳定性，减少沉积钙化进而抑制生物瓣膜钙化的产生。瓣膜钙化的产生。

【技术实现步骤摘要】
复合交联生物瓣膜材料的制备方法及复合交联生物瓣膜材料


[0001]本专利技术属于医疗器械
，具体涉及一种复合交联生物瓣膜材料的制备方法及复合交联生物瓣膜材料。

技术介绍

[0002]心脏瓣膜疾病是一种常见的瓣膜衰退疾病，该疾病的首选方案是瓣膜置换术。生物心脏瓣膜是指一类用于替换人体病变心脏瓣膜的生物医学材料。基于生物瓣膜材料的特点和优势，当前生物瓣已成为介入式瓣膜的首选方案。而生物瓣膜易钙化，使用寿命最长使用期限仍只有12到15年左右，在年轻患者的体内使用寿命更短。因此，对延长生物心脏瓣膜寿命和安全性的研究一直是业内热点。
[0003]生物瓣膜钙化是因为钙盐在瓣膜上不断沉积结晶，从而使瓣膜变硬最后导致狭窄。目前，现有的介入生物瓣膜一般采用戊二醛交联的生物瓣膜材料，生物瓣叶组织主要包括胶原纤维，糖胺聚糖等成分，戊二醛通过可逆的席夫碱与胶原蛋白交联，因而在体内随着席夫碱基团的水解，出现胶原蛋白三螺旋结构的降解，瓣叶的力学性能会发生变化。另一方面，戊二醛只交联胶原蛋白，对糖胺聚糖等成分没有交联的作用。植入体内后，糖胺聚糖的的丢失和胶原、弹性蛋白的变性和降解会进一步导致了生物心脏瓣膜的沉积钙化从而导致较差的生物力学性能。此外，戊二醛交联生物心脏瓣膜的另一个问题是残留的醛基也可能对宿主细胞有毒，导致钙化并诱导炎症。这些都可能会降低生物瓣膜的耐久性和使用寿命。
[0004]戊二醛交联生物瓣膜在体内的钙化问题已成为造成临床上瓣膜失效非常重要的因素。传统戊二醛交联心包只能交联胶原纤维，不能交联弹力纤维并且戊二醛残醛基团会作为晶体成核的结合位点，是瓣膜钙化的主要因素之一。
[0005]因此，如何能够更好的优化组织交联优势，增加抗钙化效果，对介入生物心脏瓣膜的临床使用以及提高患者的生活质量均具有重要的意义。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对现有技术戊二醛交联处理的生物瓣膜易钙化的技术问题，目的在于提供一种能够解决现有介入生物瓣膜的钙化问题，提高瓣膜材料的抗钙化效果以及延长瓣膜使用寿命的复合交联生物瓣膜材料的制备方法。
[0007]本专利技术的目的之一在于提供一种复合交联生物瓣膜材料的制备方法，所述方法依次包括如下步骤：
[0008]步骤S1、将生物瓣膜材料置于戊二醛溶液中进行初步交联；
[0009]步骤S2、将步骤S1中初步交联后的生物瓣膜材料转移至EDC(1
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺)和NHS(N
‑
羟基丁二酰亚胺)的缓冲溶液中进行复合交联。
[0010]较佳地是，所述方法还包括：
[0011]步骤S3、将步骤S2中复合交联后的生物瓣膜材料转移至乙醇和吐温
‑
80(聚山梨酯
‑
80)的混合溶液中进行浸泡处理。
[0012]较佳地是，所述方法还包括：
[0013]步骤S4、将步骤S3中浸泡处理后的生物瓣膜材料转移至无菌PBS缓冲液中保存，所述无菌PBS(聚丁二酸丁二醇酯)缓冲液的pH为7.2
‑
7.4，例如PBS的浓度为0.1mol/L。
[0014]较佳地是，在步骤S1之前，和/或在步骤S1与步骤S2之间，和/或在步骤S2与步骤S3之间，和/或在步骤S3与步骤S4之间还包括：
[0015]步骤Sp、用无菌生理盐水对生物瓣膜材料进行漂洗；
[0016]其中，所述漂洗的次数为2～5次优选3次，每次3～10分钟优选5分钟。
[0017]较佳地是，在步骤S1中，在20
‑
50℃优选37℃温度下进行所述初步交联，所述初步交联的时间为1
‑
7天；所述戊二醛溶液的质量浓度为0.5
‑
5％，所述戊二醛溶液的pH为5.0
‑
7.0。
[0018]较佳地是，在步骤S2中，所述缓冲溶液为PBS(聚丁二酸丁二醇酯)缓冲溶液，所述PBS缓冲溶液的pH为4.0
‑
6.5。
[0019]较佳地是，在步骤S2中，所述EDC(1
‑
(3
‑
二甲基氨基丙基)
‑3‑
乙基碳二亚胺)的溶液浓度为10
‑
60mmol/L，所述NHS(N
‑
羟基丁二酰亚胺)的溶液浓度为40
‑
80mmol/L，所述复合交联的时间为1
‑
7天。
[0020]较佳地是，在步骤S3中，所述混合溶液包括质量浓度为60
‑
80％的乙醇、浓度为0.1
‑
0.3mmol/L的吐温
‑
80(聚山梨酯
‑
80)以及pH为6.0
‑
9.0的HEPES(4
‑
羟乙基哌嗪乙磺酸)缓冲液，所述浸泡处理的时间为6～72小时，优选24～72小时。
[0021]较佳地是，在步骤S1中，所述生物瓣膜材料选自心包、瓣膜、脑硬膜、肠粘膜、真皮、韧带、肌腱、巩膜、血管和带瓣管道中的一种或几种。
[0022]本专利技术的另一目的在于提供一种复合交联生物瓣膜材料，由本专利技术的复合交联生物瓣膜材料的制备方法制备得到。
[0023]本专利技术的积极进步效果在于：
[0024]本专利技术的复合交联生物瓣膜材料的制备方法利用EDC和NHS进行复合交联，能够有效减少生物瓣膜中糖胺聚糖的流失，增加糖胺聚糖的稳定性，减少沉积钙化进而抑制生物瓣膜钙化的产生。
[0025]本专利技术的复合交联生物瓣膜材料的制备方法利用乙醇和吐温
‑
80的混合溶液洗脱生物瓣膜材料中的磷脂，增加生物瓣膜材料表面光滑的程度，进而有效减除生物瓣膜材料表面钙盐的附着。
具体实施方式
[0026]以下通过特定的具体实例说明本专利技术的实施方式，本领域技术人员可由本说明书所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点与功效。本专利技术还可以通过另外不同的具体实施方式加以实施或应用，本说明书中的各项细节也可以基于不同观点与应用，在没有背离本专利技术的精神下进行各种修饰或改变。
[0027]实施例1
‑
7复合交联制备生物瓣膜材料
[0028]步骤Sp1、选择新鲜的生物瓣膜材料，将新鲜的生物瓣膜材料经过生理盐水漂洗N1次，每次t
sp1
分钟，去除表面的脂肪纤维等杂质。
[0029]步骤S1、将生物瓣膜材料置于戊二醛溶液中进行初步交联。在T1℃的温度下，将步
骤Sp1中漂洗完的生物瓣膜材料浸没在戊二醛溶液中进行初步交联，交联时间为t
初步交联
天，其中，戊二醛溶液的pH值为pH
戊二醛溶液
，戊二醛溶液的质量浓度为C
戊二醛溶液
％。初步交联结束后，取出戊二醛溶液中的生物瓣膜材料。
[0030]步骤Sp2、将步骤S1中完成初步交联后的生物瓣膜材料用无菌本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合交联生物瓣膜材料的制备方法，其特征在于，所述方法依次包括如下步骤：步骤S1、将生物瓣膜材料置于戊二醛溶液中进行初步交联；步骤S2、将步骤S1中初步交联后的生物瓣膜材料转移至EDC和NHS的缓冲溶液中进行复合交联。2.如权利要求1所述的复合交联生物瓣膜材料的制备方法，其特征在于，所述方法还包括：步骤S3、将步骤S2中复合交联后的生物瓣膜材料转移至乙醇和吐温
‑
80的混合溶液中进行浸泡处理。3.如权利要求2所述的复合交联生物瓣膜材料的制备方法，其特征在于，所述方法还包括：步骤S4、将步骤S3中浸泡处理后的生物瓣膜材料转移至无菌PBS缓冲液中保存，所述无菌PBS缓冲液的pH为7.2
‑
7.4。4.如权利要求1所述的复合交联生物瓣膜材料的制备方法，其特征在于，在步骤S1之前，和/或在步骤S1与步骤S2之间，和/或在步骤S2与步骤S3之间，和/或在步骤S3与步骤S4之间还包括：步骤Sp、用无菌生理盐水对生物瓣膜材料进行漂洗；其中，所述漂洗的次数为2
‑
5次优选3次，每次3
‑
10分钟优选5分钟。5.如权利要求1所述的复合交联生物瓣膜材料的制备方法，其特征在于在步骤S1中，在20
‑
50℃优选37℃温度下进行所述初步交联，所述初步交联的时间为1
‑
7天；所述戊二醛溶液的质量浓度为0.5
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【专利技术属性】
技术研发人员：梁玉晨，周向阳，周小铃，袁逸雯，
申请(专利权)人：启晨上海医疗器械有限公司，
类型：发明
国别省市：