FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用制造技术

本发明专利技术公开了FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用，属于基因工程技术领域。本发明专利技术通过构建敲低FLNB表达的腺病毒载体，感染MC3T3

【技术实现步骤摘要】
FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用


[0001]本专利技术涉及基因工程
，特别是涉及FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用。

技术介绍

[0002]骨质疏松症(osteoporosis，OP)是一种全身性骨退行性疾病，骨量的逐渐丧失和骨力学性能的显著退化是其最明显的两大特征，最终导致骨脆性增加和骨折的发生。中国疾控中心与中华医学会骨质疏松和骨矿盐疾病分会的合作调查显示，50岁以上人群骨质疏松症患病率为19.2％，65岁以上人群的患病率达到32.0％。此外，据相关研究报道，2015年中国主要用于骨质疏松性骨折的医疗费用为720亿元，预计到2035年将达到1320亿元，这将会给患者家庭和社会造成沉重的经济负担。随着人口老龄化日趋严重，骨质疏松症已成为我国面临的重要公共健康问题。目前，治疗OP的药物存在治疗效果欠佳、副作用明显、无法改善成骨细胞增殖分化、难以逆转OP进程等诸多问题。因此，深入了解骨质疏松的发病机制，寻找新的治疗靶点，针对OP进行靶向治疗以及挽救因OP所致的骨质流失，具有重大的临床意义和经济社会效益。
[0003]近期研究发现，FLNB(Filamin B)基因与骨质疏松密切相关。FLNB属于Filamins二聚体肌动蛋白结合蛋白家族，是一种重要的细胞骨架蛋白，参与细胞增殖、分化和迁移等关键生物学过程。一项针对中国南方女性的研究表明，FLNB和CRTAP可能是调节3p14
‑
25范围内骨密度的易感基因，这揭示了FLNB在骨代谢过程中的潜在调控作用。已有研究报道显示，FLNB突变可导致多种病理改变，如降低骨密度、影响软骨细胞增殖和分化、减退软骨和成纤维细胞的运动性，以及影响血管生成等。此外，还发现FLNB与骨密度呈现区域性关联，FLNB突变可导致骨密度降低。然而，目前对FLNB在骨代谢中调控成骨细胞的具体作用机制尚不清楚，也未见相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，通过调控FLNB基因发现，下调FLNB基因会抑制成骨细胞增殖和迁移，促进细胞凋亡；而过表达FLNB基因会促进成骨细胞增殖和迁移，降低细胞凋亡。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用，敲低所述FLNB基因抑制所述成骨细胞的增殖，过表达所述FLNB基因促进所述成骨细胞的增殖。
[0007]本专利技术还提供FLNB基因在制备调控成骨细胞迁移的产品的应用，敲低所述FLNB基因抑制所述成骨细胞的迁移，过表达所述FLNB基因促进所述成骨细胞的迁移。
[0008]本专利技术还提供FLNB基因在制备调控成骨细胞凋亡的产品的应用，敲低所述FLNB基因促进所述成骨细胞的凋亡，过表达所述FLNB基因降低所述成骨细胞的凋亡。
[0009]优选的是，所述成骨细胞包括来源于骨质疏松症的成骨细胞/成骨前体细胞。
[0010]优选的是，所述产品包括药物。
[0011]本专利技术还提供特异性敲低或者过表达FLNB基因的核苷酸分子在制备检测成骨细胞增殖能力的产品中的应用，特异性敲低所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：1
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3所示；特异性过表达所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：4
‑
6所示。
[0012]本专利技术还提供特异性敲低或者过表达FLNB基因的核苷酸分子在制备检测成骨细胞迁移能力的产品中的应用，特异性敲低所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：1
‑
3所示；特异性过表达所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：4
‑
6所示。
[0013]本专利技术还提供特异性敲低或者过表达FLNB基因的核苷酸分子在制备检测成骨细胞凋亡情况的产品中的应用，特异性敲低所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：1
‑
3所示；特异性过表达所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：4
‑
6所示。
[0014]优选的是，所述成骨细胞包括来源于骨质疏松症的成骨细胞。
[0015]优选的是，所述产品包括试剂盒。
[0016]本专利技术公开了以下技术效果：
[0017]本专利技术以成骨前体细胞(MC3T3
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E1)为研究对象，建立敲低FLNB的MC3T3
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E1稳转细胞系，经实验验证发现下调FLNB后抑制了细胞的增殖和迁移，促进细胞凋亡；而过表达FLNB后促进了细胞的增殖和迁移，降低了细胞的凋亡。这对检测FLNB对MC3T3
‑
E1细胞的增殖及凋亡的影响，深入了解FLNB在MC3T3
‑
E1细胞中的作用机制具有重要意义，并且有望为骨质疏松的治疗提供新的治疗靶点，以此挽救因骨质疏松所致的骨质流失，为骨质疏松症的治疗提供新的方向。
附图说明
[0018]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0019]图1为检测FLNB慢病毒转染效率；A为转染慢病毒的绿色荧光表达，分组依次为空载体组(sh
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NC)、敲低FLNB
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1(sh
‑
FLNB
‑
1)、敲低FLNB
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2(sh
‑
FLNB2)、敲低FLNB
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3(sh
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FLNB3)；B为敲低FLNB的Western Blot结果；C为B图的定量分析结果；D为敲低FLNB的RT
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PCR结果；F1：敲低FLNB
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1、F2：敲低FLNB
‑
2、F3：敲低FLNB
‑
3；与NC组比较，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001；
[0020]图2为敲低FLNB对MC3T3
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E1细胞增殖的影响；与sh
‑
NC组相比，*P<0.05；**P<0.01；***P<0.001；****P<0.0001；
[0021]图3为敲低FLNB对MC3T3
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E1细胞迁移的影响；A
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C分别为对照组、sh
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NC组、sh
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FLNB组0h的划痕；D
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F分别为对照组、sh
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NC组、sh
‑
FLNB组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.FLNB基因在制备调控成骨细胞增殖的产品中的应用，其特征在于，敲低所述FLNB基因抑制所述成骨细胞的增殖，过表达所述FLNB基因促进所述成骨细胞的增殖。2.FLNB基因在制备调控成骨细胞迁移的产品的应用，其特征在于，敲低所述FLNB基因抑制所述成骨细胞的迁移，过表达所述FLNB基因促进所述成骨细胞的迁移。3.FLNB基因在制备调控成骨细胞凋亡的产品的应用，其特征在于，敲低所述FLNB基因促进所述成骨细胞的凋亡，过表达所述FLNB基因降低所述成骨细胞的凋亡。4.如权利要求1
‑
3任一项所述的应用，其特征在于，所述成骨细胞包括来源于骨质疏松症的成骨细胞。5.如权利要求1
‑
3任一项所述的应用，其特征在于，所述产品包括药物。6.特异性敲低或者过表达FLNB基因的核苷酸分子在制备检测成骨细胞增殖能力的产品中的应用，其特征在于，特异性敲低所述FLNB基因的核苷酸分子如SEQ ID NO：1
‑
3所示；特异性过表达所述FLNB基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：马海蓉，王茜，黄金勇，俞丽，
申请(专利权)人：新疆医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：