一种PCR冻干试剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种PCR冻干试剂及其制备方法。所述PCR冻干试剂，包括PCR试剂和冻干保护剂，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白组成。将PCR试剂和冻干保护剂混合均匀，得到混合液；再将上述混合液进行冷冻干燥处理，即可制得本发明专利技术的PCR冻干试剂。发明专利技术提供的PCR冻干试剂及其制备方法在提高PCR试剂的稳定性、方便易用性、适应极端环境方面具有显著的有益效果。这使得PCR试剂能够更可靠地应用于各种实际场景，如医学诊断、食品安全监测和环境监测等领域，为相关领域的研究和应用提供了重要的技术支持。的技术支持。

【技术实现步骤摘要】
一种PCR冻干试剂及其制备方法


[0001]本专利技术涉及一种PCR冻干试剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction，简称PCR)是一种在生物学研究、医学诊断、食品安全、环境监测以及法医学等领域中广泛应用的核酸检测技术。它的主要功能是通过酶的催化作用，特异性地扩增目标DNA或RNA序列，从而能够在复杂的样本中检测出微量的目标序列。实时荧光PCR因其具有高灵敏度、高特异性以及定量精确等特点，已经成为分子生物学领域中最常用的核酸定量技术之一。这主要归功于它的原理和方法：通过设计特异性的引物和荧光标记的探针，它可以高度特异性地扩增并检测目标序列；通过荧光标记和实时检测，它可以在PCR反应过程中实时监测扩增过程，从而实现定量分析。
[0003]在医学诊断领域，实时荧光PCR在疾病诊断和治疗监控中起着至关重要的作用。例如，它可用于检测病毒载量，如HIV、HBV等，以评估疾病的活跃程度和治疗的效果；也可用于检测病原微生物，如结核杆菌、流感病毒等，以实现早期诊断和防控；还可用于肿瘤标志物的检测，以进行早期癌症筛查、治疗反应评估以及复发监测。在食品安全领域，实时荧光PCR被广泛应用于食源性病原体的检测、转基因成分的检测以及食品来源的鉴定等方面。通过高灵敏度和高特异性的核酸检测，它能够有效地提升食品质量监控的准确性和效率。此外，在环境监测和法医学等领域，实时荧光PCR也起着越来越重要的作用。例如，它可用于环境样本中微生物群落的分析，以评估环境污染和治理的效果；也可用于法医学中的人类或动物DNA的鉴定，以助力犯罪侦破和法律执行。
[0004]然而，液态PCR试剂由于需在特定的温度条件下保存和运输，对冷链物流有较高的要求，一方面增加了保管和运输的复杂性，另一方面也增加了试剂的损耗风险。这些问题使得PCR试剂在部分地区和环境中的应用受到了限制。
[0005]为解决上述问题，冻干技术被引入到PCR试剂的保存和运输中，其原理是将试剂中的水分子通过物理方式移除，使试剂成为固态，能够在室温下进行长期保存和运输。然而，冻干过程可能导致试剂中活性物质的构象发生改变，从而降低试剂的活性。因此，需要在冻干过程中添加特殊的保护剂，以防止活性物质在冻干过程中受到损失。
[0006]现有的PCR试剂冻干保护剂通常由海藻糖、羟丙基
‑
β
‑
环糊精等物质组成，这些物质能够通过稳定活性物质的结构，降低活性物质在冻干过程中的损失。然而，现有的冻干保护剂并不能完全防止PCR试剂在冻干和复溶过程中的活性损失。此外，现有的冻干保护剂在极端环境下(例如，极低温度或多次冻解过程)的保护效果不佳，使得PCR试剂在这些条件下的稳定性和可用性受到限制。
[0007]为克服上述问题，需要研发一种新型的冻干保护剂，其不仅能够在常规条件下保护PCR试剂的活性，还能够在极端环境下提供良好的保护效果。这需要对现有冻干保护剂的组成进行改良，以增强其在各种条件下的保护效果。然而，如何选择和配比新的冻干保护
剂，以及如何评价其在不同条件下的保护效果，都是需要解决的技术问题。在现有技术中，尚未出现一种能够全面保护PCR试剂，尤其是在极端环境下的保护剂。这主要是因为，既有的冻干保护剂往往在一定程度上依赖于环境条件。例如，它们可能会在低温条件下产生晶体，从而损害PCR试剂的稳定性和性能。此外，现有的保护剂也可能对PCR试剂本身产生影响，例如通过改变试剂的溶解性质或稳定性，进而影响其功能。
[0008]因此，需要研发一种新型的冻干保护剂，其能够在各种环境条件下(包括极端环境)保护PCR试剂的活性，同时不对试剂本身产生不良影响。更具体地说，新型保护剂需要能够在冻干过程中保护试剂的活性，防止其在极端环境下受到损害；同时，它还需要能够在试剂复溶时迅速溶解，不影响试剂的使用。此外，新型保护剂的制备过程也需要简便高效，以便于其在PCR试剂的生产和应用中得到广泛应用。
[0009]现有的技术尚未能满足上述需求。例如，海藻糖虽然在一定程度上可以保护PCR试剂，但在极端环境下，其保护效果有限。另一方面，现有的保护剂往往对试剂本身产生一定的影响，例如可能会导致试剂在复溶时产生结块，从而影响其性能。
[0010]鉴于此，开发一种新型的冻干保护剂，以提高PCR试剂在各种环境条件下的稳定性和可用性，是当前PCR试剂冻干技术中的重要技术课题。

技术实现思路

[0011]针对现有技术中存在的不足，本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种PCR冻干试剂及其制备方法。
[0012]本专利技术的详细技术方案如下：
[0013]一种PCR冻干试剂，包括PCR试剂和所述冻干保护剂，所述冻干保护剂为沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白中的至少一种。
[0014]优选地，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白组成。
[0015]优选地，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白按质量比(6
‑
8):(2
‑
4)组成。
[0016]优选地，所述PCR冻干试剂中所述冻干保护剂的浓度为1
‑
18％(w/v)，更好为2
‑
15％(w/v)，更好为3
‑
13％(w/v)，最好为5
‑
11％(w/v)。
[0017]本专利技术的PCR试剂可以采用本领域通用的/市售的PCR试剂。
[0018]本专利技术还提供了上述PCR冻干试剂的制备方法，包括下述步骤：
[0019]将PCR试剂和冻干保护剂混合均匀，得到混合液；
[0020]将上述混合液进行冷冻干燥处理，得到所述PCR冻干试剂。
[0021]本专利技术还提供了一种冻干保护剂，由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白组成。
[0022]本专利技术还提供了上述冻干保护剂在PCR试剂冻干中的应用。
[0023]本专利技术的PCR冻干试剂，通过采用更强效的冻干保护剂，确保了PCR试剂在极端环境下的稳定性和活性。它们提供了方便易用的PCR试剂，适应各种实际应用场景，同时降低了运输和存储成本。这些有益效果使得PCR冻干试剂成为一种可靠且高效的选择，为医学诊断、食品安全监测、环境监测等领域的研究和应用提供了重要的技术支持。
具体实施方式
[0024]一种PCR冻干试剂，包括PCR试剂和所述冻干保护剂，所述冻干保护剂为沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白中的至少一种。
[0025]优选地，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白组成。
[0026]优选地，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白按质量比(6
‑
8):(2
‑
4)组成。
[0027]优选地，所述PCR冻干试剂中所述冻干保护剂的浓度为1
‑
18％(w/v)，更好为2
‑
15％(w/v)，更好为3
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种PCR冻干试剂，包括PCR试剂和冻干保护剂，其特征在于，所述冻干保护剂为沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白中的至少一种。2.如权利要求1所述的PCR冻干试剂，其特征在于，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白组成。3.如权利要求2所述的PCR冻干试剂，其特征在于，所述冻干保护剂由沙鲁胺和Flounder抗冻蛋白按质量比(6
‑
8):(2
‑
4)组成。4.如权利要求1
‑
3任一项所述的PCR冻干试剂，其特征在于，所述PCR冻干试剂中所述冻干保护剂的浓度为1
‑
18％(w/v)。5.如权利要求4所述的PCR冻干试剂，其特征在于，所述PCR冻干试剂中所述冻干保护剂的浓度...

【专利技术属性】
技术研发人员：叶长钦，张扬鹏，
申请(专利权)人：广东明志医学检验实验室有限公司，
类型：发明
国别省市：