一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法技术

本申请涉及化合物检测技术领域，具体公开了一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法。本申请提供的仙人掌中三萜类化合物的检测方法包括对照品溶液配制、供试品溶液制备、紫外分光光度法检测；供试品溶液制备：将待测样品溶解并加热回流20

【技术实现步骤摘要】
一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法


[0001]本申请涉及化合物检测
，具体涉及一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法。

技术介绍

[0002]三萜类化合物是一类重要的活性天然产物，广泛存在于菌类、蕨类、单叶子和双叶子植物中，具有镇静、安眠、抗焦虑、镇痛和抗炎等作用。因此，三萜类化合物一直是医药的热点研究对象。
[0003]目前，从植物中提取三萜化合物的方法主要包括：有机溶剂提取法、超临界流体萃取法和超声提取法。有机溶剂提取法是最早的提取方法，该方法在提取时需要消耗大量的有机溶剂，并且提取的选择性较差，获得的提取液中的杂质与残留的有机溶剂较多。超临界流体萃取法是采用超临界流体，例如采用CO2作为溶剂进行萃取，该方法虽然提取效率高、对环境无污染，但是所需设备昂贵，且设备清洗困难，因此难以大规模推广使用；超声提取法的提取速度快，提取效率较高，但若提取时间过长，则会对样品结构造成影响。
[0004]目前，对三萜化合物的的检测大多是以熊果酸或齐墩果酸为对照品，采用香草醛
‑
高氯酸显色法进行显色，然后采用紫外分光光度法测定三萜化合物含量。但上述检测方法中使用了高氯酸，高氯酸属于易制爆危险化学品，将高氯酸溶于水后，其与水反应会放出大量的氢离子，进而极易发生爆炸，危险性系数很高；并且高氯酸价格昂贵，采购受到严重管制，因此上述香草醛
‑
高氯酸显色法的检测方法难以实现大规模推广使用。

技术实现思路

[0005]为了克服现有技术中存在的缺陷，本申请提供了一种准确度高、安全性好、能够规模化使用的仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法。
[0006]本申请提供的仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法，采用如下的技术方案：一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法，所述检测方法包括对照品溶液配制、供试品溶液制备、紫外分光光度法检测；供试品溶液制备：将仙人掌待测样品溶解并加热回流20
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40min，然后无需降温直接置于微波设备中，在500
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900W微波功率下辐照提取10
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30s，获得提取液；对所述提取液离心、分离，取上清液，再向上清液中加入5
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7质量％香草醛冰醋酸溶液及强氧化性试剂，经加热、冷却、定容，获得供试品溶液；所述强氧化性试剂为浓硫酸、次氯酸及其盐。
[0007]本申请提供的三萜类化合物含量的检测方法的供试品制备步骤中，采用了加热回流
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微波协同提取三萜类化合物的方法，上述提取方法能够有效提取仙人掌待测样品中的三萜类化合物，然后通过紫外分光光度计检测即可完成仙人掌中三萜类化合物的含量检测。本申请的加热回流
‑
微波协同方法与相关技术中的提取方法相比，提取效率高、溶剂使用较少、选择性好、设备简单，因此能够实现大规模推广使用。另外，在供试品溶液制备步骤
中，使用浓硫酸、次氯酸或次氯酸盐(如次氯酸钾)作为强氧化性试剂，有效避免了相关技术中采用高氯酸作为强氧化试剂的易爆炸风险，并且浓硫酸、氯酸钾或次氯酸的来源相对容易、价格便宜。因此，本申请提供的三萜类化合物含量的检测方法能够大规模推广使用。
[0008]本申请中，首先通过加热回流将仙人掌中的大部分的三萜类化合物与杂质分离开，然后通过500
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900W下的处理10
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30s，使得仙人掌中残留的三萜类化合物进一步溶出。微波功率与处理时间对三萜类化合物的结构及溶出率会产生影响，故本申请将微波处理条件控制在上述范围内，既能够将仙人掌的三萜类化合物最大程度地提取出来，又能保证三萜类化合物的结构不受影响。因此，本申请提供的供试品溶液制备步骤为仙人掌中三萜化合物含量的准确度检测奠定了基础。
[0009]在一些实施方案中，所述加热回流时间可以为15
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30min或30
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45min。
[0010]在一个具体的实施方案中，所述加热回流时间还可以为15min、30min或45min。
[0011]在一些实施方案中，所述微波功率可以为500
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600W、500
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700W、500
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850W、600
‑
700W、600
‑
850W、600
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900W、700
‑
850W、700
‑
900W或850
‑
900W。
[0012]在一个具体的实施方案中，所述微波功率还可以为500W、600W、700W、850W或900s。
[0013]在一些实施方案中，所述辐照提取时间可以为10
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15s、10
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20s、15
‑
20s、15
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30s或20
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30s。
[0014]在一个具体的实施方案中，所述辐照提取时间可以为10s、15s、20s或30s。
[0015]优选的，所述微波功率为600
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850W，辐照提取时间为10
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20s。
[0016]本申请进一步将微波功率与辐照提取时间控制在上述范围内，待测样品的三萜类化合物的提取效率更高，三萜类化合物的结构更加完整，获得的待测样品中三萜化合物含量的检测结果更准确。
[0017]优选的，所述仙人掌待测样品溶解采用的溶剂为80
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95质量％乙醇。
[0018]优选的，所述强氧化性试剂为浓度≥85质量％试剂。
[0019]本申请中，在强氧化性试剂的存在下，三萜类化合物会发生氧化脱氢形成双键，该双键化合物会与反应体系中的香草醛发生缩合显色，通过紫外分光光度计检测显色产物的含量，即可获得三萜类化合物的含量。试验探究发现，强氧化性试剂的浓度会影响缩合反应的成功率，进而影响检测结果的准确性，故本申请将强氧化性试剂的浓度控制在85质量％以上，能够保证三萜类化合物充分氧化，使获得的检测结果的准确性更高。
[0020]在一个具体的实施方案中，所述强氧化性试剂还可以为75质量％浓硫酸、85质量％浓硫酸、98质量％浓硫酸或90质量％次氯酸。
[0021]优选的，所述上清液中加入5
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7质量％香草醛冰醋酸溶液及强氧化性试剂后，加热的温度为65
‑
75℃，加热的时间为10
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45min。
[0022]本申请将缩合显色反应的温度与时间控制在上述范围内，能够保证缩合显色反应顺利进行。
[0023]在一个具体的实施方案中，所述香草醛冰醋酸溶液与上清液的体积比为2：1；所述强氧化性试剂与上清液的体积比为8：1。
[0024]优选地，所述定容采用的溶剂为乙酸乙酯、正庚烷、正己烷或乙醚。
[0025]优选地，所述紫外分光光度法检测步骤中，检测波长为530
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555nm本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种仙人掌中三萜类化合物含量的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括对照品溶液配制、供试品溶液制备、紫外分光光度法检测；供试品溶液制备：将仙人掌待测样品溶解并加热回流20
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40min，然后无需降温，直接在500
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900W微波功率下辐照提取10
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30s，获得提取液；对所述提取液离心、分离，取上清液，再向上清液中加入5
‑
7质量%香草醛冰醋酸溶液及强氧化性试剂，经加热、冷却、定容，获得供试品溶液；所述强氧化性试剂为浓硫酸、次氯酸及其盐。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述微波功率为600
‑
850W，辐照提取时间为10
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20s。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述仙人掌待测样品溶解采用的溶剂为8...

【专利技术属性】
技术研发人员：王津，郁洋，
申请(专利权)人：上海美宝生命科技有限公司，
类型：发明
国别省市：