用于细胞治疗的组成型活性细胞因子受体制造技术

本公开内容的实施方案包括用于细胞治疗的组成型活性细胞因子受体，用于增强免疫细胞扩增的方法和组合物，所述免疫细胞用于免疫治疗。在具体实施方案中，免疫细胞(例如T细胞)表达组成型活性细胞因子受体，其中跨膜和胞内结构域能够提供分别从任何输入到与它们可操作地连接的相应胞外结构域的活化信号。在具体实施方案中，来自IL

【技术实现步骤摘要】
ID NO：25)中。在特定方面，突变将至少一个半胱氨酸引入跨膜结构域和/或突变将脯氨酸引入跨膜结构域。在一些情况下，跨膜结构域的长度为21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32或33个氨基酸。
[0012]在跨膜结构域的特定实施方案中，结构域是自二聚化的，并且在特定情况下，跨膜结构域是本公开内容的一个或多个细胞因子受体胞内结构域的内源跨膜结构域或其自活化衍生物。与相应的野生型跨膜结构域相比，自活化衍生物可以包含一个或多个突变，并且该一个或多个突变使得该受体能够同源二聚化。在特定情况下，突变使受体能够通过跨膜和胞内结构域组分同源二聚化。在具体的实施方案中，例如，所述一个或多个突变使得跨膜和结构域能够在结构上定向(例如扭转)，使得janus激酶能够磷酸化和活化胞内结构域/多肽。在具体的实施方案中，所述一个或多个突变使得跨膜和胞内结构域能够以螺旋方式在结构上共同扭转。
[0013]在某些实施方案中，工程化细胞因子受体多肽包含至少一个胞内结构域、至少一个跨膜结构域和至少一个胞外结构域，并且任选地包含一个或多个胞外结构域。在一些实施方案中，胞内结构域是野生型，即在细胞因子信号传导方面具有功能活性。在一个具体实施方案中，工程化细胞因子受体多肽包含正常(野生型)胞外结构域；在该实施方案中，在存在或不存在同源细胞因子的情况下，多肽同源二聚化并传递信号。在另一个具体的实施方案中，工程化细胞因子受体多肽包含胞外结构域，其不是这种受体的野生型胞外结构域。在更具体的实施方案中，胞外结构域结合通常对受体所在的细胞有害的配体(例如，通常会下调细胞或引起细胞无能或引起细胞凋亡的配体)。例如，这种非野生型胞外结构域能够为或能够作为例如检查点蛋白的诱饵受体，例如，胞外结构域包含检查点蛋白PD
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1的受体。在一些情况下，非野生型胞外结构域是抗体(当与胞外结构域结合时，其靶向包含工程化细胞因子受体多肽的细胞用于进行破坏)的靶标。在另一个具体实施方案中，工程化细胞因子受体多肽缺乏胞外结构域。在某些实施方案中，细胞因子是白细胞介素，例如IL
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7、IL
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21、IL
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23或IL
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12。
[0014]在本公开内容的具体方面，组成型活性细胞因子受体诱导组成型IL
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7受体活性。在某些实施方案中，IL
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7Rα的跨膜结构域中的一个或多个突变或改变使得该受体能够以同源二聚化状态诱导信号传导。在一个具体实施方案中，白细胞介素是IL
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7。在一个具体实施方案中，工程化细胞因子受体多肽是工程化IL
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7受体多肽。
[0015]在其他实施方案中，本文提供了编码此类工程化细胞因子受体多肽的多核苷酸，包含此类多核苷酸的细胞，表达此类多肽的细胞，例如另外表达嵌合抗原受体的细胞，以及此类细胞用于治疗疾病例如癌症(例如，血癌或实体瘤)的用途。
[0016]在一个实施方案中，存在编码工程化细胞因子受体多肽的多核苷酸，并且所述多肽包含以下可操作地连接的组分：a)一个或多个细胞因子受体胞内结构域；b)跨膜结构域，其包含促进工程化受体同源二聚化的一个或多个突变；和c)任选地或非任选地，一个或多个细胞外结构域，其不是组分a)中相应的一个或多个细胞因子受体胞内结构域的内源细胞外结构域，其中细胞外结构域不是源自细胞因子受体。在某些实施方案中，存在包含这种多核苷酸的一种或多种细胞。
[0017]在某些实施方案中，一个或多个细胞因子受体胞内结构域引发细胞中通过STAT5途径或细胞中通过STAT3途径的信号传导。在特定情况下，细胞因子受体胞内结构域来自
IL
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7受体α、IL
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21受体α、CD122、IL
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23受体α、IL
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12受体α或其组合。
[0018]在一个实施方案中，细胞外结构域是球形的。细胞外结构域可以是缺乏信号传递活性的诱饵受体。细胞外结构域可以是细胞毒性抗体的靶标。在特定情况下，细胞外结构域是至少70个氨基酸和/或不超过2000个氨基酸。细胞外结构域的长度可以是70
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2000个氨基酸、100
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1000个氨基酸、500
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2000个氨基酸、50
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500个氨基酸、100
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750个氨基酸、200
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2000个氨基酸或500
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2000个氨基酸。在一些情况下，细胞外结构域是CD34的细胞外结构域。在某些实施方案中，细胞外结构域来自CD30、HER2、EGFR、CD19、CD34、TGF
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β受体、IL
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4受体、IL
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13受体α1和α2、IL
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8受体、IL
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10受体、PD
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1、LAG3、TIGIT、CTLA4、FAS、CD19、CD27、CD28、CD52、CD134、CD137、HER2、EGFR、NGFR或其组合。
[0019]在特定实施方案中，表达组成型活性细胞因子受体的细胞是免疫细胞。细胞可以是T细胞、NK细胞、NKT细胞、αβ细胞、γδT细胞、粘膜相关不变T细胞(MAIT T细胞)、先天淋巴细胞、干细胞或祖细胞。在具体的实施方案中，细胞包含赋予细胞抗原特异性的非天然分子。细胞还可包含至少一种另外的工程化受体，例如另一种组成型活性细胞因子受体、嵌合抗原受体、重组T细胞受体、双特异性T细胞衔接器(BiTE或T细胞ENG)、双亲和力重新靶向(DART)蛋白质或其组合。
[0020]在与表达组成型活性细胞因子受体的细胞有关的一些实施方案中，细胞含有表达受体多肽的多核苷酸。多核苷酸可进一步定义为表达载体，例如病毒载体或非病毒载体。病毒载体可以是逆转录病毒载体、慢病毒载体、腺病毒载体或腺相关病毒载体。例如，非病毒载体可以是质粒。
[0021]在实施方案中，存在多个本公开内容的细胞，其表达组成型活性细胞因子受体，其中所述细胞包含T细胞、NK细胞、NKT细胞、αβT细胞、γδT细胞、粘膜相关不变T细胞(MAIT T细胞)、先天淋巴细胞、干细胞、祖细胞或免疫效应细胞中的一种或多种的混合物。
[0022]在一个实施方案中，存在扩增细胞群的方法，其包括在本公开内容所涵盖的细胞中表达多核苷酸的步骤。细胞可以是体外或体内的，例如在哺乳动物包括人中。在具体的实施方案中，向人提供有效量的细胞外结构域的一种或多种抑制剂，其在结合细胞外结构域后靶向细胞用于进行破坏。抑制剂可以是任何种类的一种或多种抗体。在某些实施方案中，人需要治疗并且向人提供治疗有效量的细胞。在具体方面，人患有癌症、传染病、自身免疫疾病、免疫缺陷，或者是实体器官移植或干细胞移植前或后的。
[0023]在某些实施方案中，组成型活性细胞因子受体利用用作库(sink)或配体捕获的胞外结构域，例如通过结合对表达组成本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.多核苷酸，其编码工程化细胞因子受体多肽，其中所述工程化细胞因子受体是组成型活性细胞因子受体，并且其中所述多肽包含以下组分：a)一个或多个细胞因子受体胞内结构域，其引发通过STAT5途径或STAT3途径的信号传导；b)IL
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7细胞因子受体α跨膜结构域，其包含促进所述受体多肽的同源二聚化的一个或多个突变；和c)一个或多个细胞外结构域，其不是组分a)中相应的一个或多个细胞因子受体胞内结构域的内源细胞外结构域，其中所述细胞外结构域不是源自细胞因子受体。2.细胞，其包含根据权利要求1所述的多核苷酸。3.根据权利要求2所述的细胞，其中所述跨膜结构域是自寡聚化的。4.根据权利要求2或3所述的细胞，其中所述跨膜结构域是组分a)的一个或多个细胞因子受体胞内结构域的内源跨膜结构域。5.根据权利要求4所述的细胞，其中所述一个或多个突变：(i)使得所述受体能够通过跨膜和胞内结构域组分同源二聚化；(ii)使得所述跨膜和胞内结构域能够在结构上扭转，使得与所述胞内结构域相关...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：贝勒医学院，
类型：发明
国别省市：