一种胶原蛋白肽的制备方法技术

本发明专利技术涉及胶原蛋白技术领域，具体公开了一种胶原蛋白肽的制备方法，该方法包括：使用胶东海参和牡蛎制作海鲜蛋白粉；处理海鲜蛋白粉并制成胶原蛋白肽；制作螯合有铁离子和锌离子的胶原蛋白肽。本发明专利技术使用恒温高压罐，能够增加螯合反应速率，提高铁离子、锌离子与胶原蛋白肽的结合度，采用分步结合与间断式重复法添加反应物，在维持螯合反应酸碱度的环境下，能够提高胶原蛋白肽的使用率，减少胶原蛋白肽的浪费，增加胶原蛋白肽

【技术实现步骤摘要】
一种胶原蛋白肽的制备方法


[0001]本专利技术涉及胶原蛋白
，特别涉及一种胶原蛋白肽的制备方法。

技术介绍

[0002]胶原蛋白肽具有多种生物活性，是胶原蛋白由水解酶分解后得到的小分子肽，能够为人体提供生长所需的物质，胶原蛋白肽具有特殊的氨基酸序列和结构，使其能够与人体所需的微量元素进行螯合反应，这种螯合反应能够赋予胶原蛋白肽新的性质和功能，全面补充人体所需物质。
[0003]铁和锌是人体经常缺少的微量元素，能够与胶原蛋白肽进行螯合并随着胶原蛋白肽在人体中的代谢轨迹，快速补充到全身，现有技术在胶原蛋白肽同时与铁和锌螯合时具有螯合率低，螯合产物不稳定，胶原蛋白肽与铁离子和锌离子结合位点易断开等问题，最终导致螯合过程中储存时间短，胶原蛋白用量大，成本增加。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种胶原蛋白肽的制备方法，能够增加螯合反应速率，提高铁离子、锌离子与胶原蛋白肽的结合度，提高胶原蛋白肽的使用率，减少胶原蛋白肽的浪费，增加胶原蛋白肽
‑
铁
‑
锌螯合物产出量，且能够提高胶原蛋白肽的抗氧化性和清除机体自由基的能力。
[0005]为了达成以上目的，本专利技术采取的技术方案为：一种胶原蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：步骤一，使用胶东海参和牡蛎制作海鲜蛋白粉；步骤二，处理海鲜蛋白粉并制成胶原蛋白肽；步骤三，制作螯合有铁离子和锌离子的胶原蛋白肽。
[0006]作为本专利技术的进一步方案，在步骤一中，对清洗干净且去除内脏和皮的胶东海参和牡蛎进行液氮浸泡处理3
‑
4h，随后使用40℃水浴30
‑
60min，再放入液氮5
‑
6h，最后打碎研磨成粉，胶东海参和牡蛎中海参的质量占比为10%
‑
90%之间。
[0007]作为本专利技术的进一步方案，在步骤二中，海鲜蛋白粉制备成胶原蛋白肽的脱脂过程中，使用高压震荡的方式辅助进行脱脂，所用压力值为200
‑
300Mpa，震荡频率为800
‑
1000Hz。
[0008]作为本专利技术的进一步方案，在步骤二中，除去海鲜蛋白粉中的钙，使用螯合反应，所用试剂为乙二胺四乙酸。
[0009]作为本专利技术的进一步方案，在海鲜蛋白粉除钙体系中，加入乙二胺四乙酸后，使用20
‑
25Hz的超声波结合37℃水浴进行海鲜蛋白粉的脱钙。
[0010]作为本专利技术的进一步方案，在步骤二中，在处理海鲜蛋白粉的过程中，使用磷酸氢盐和碳酸氢盐缓冲液去除海鲜蛋白粉中的杂蛋白，使用0.3
‑
0.6mol/L的冰乙酸对提取胶原白的体系环境进行酸化后，加入7
‑
9%的胃蛋白酶消化12h。
[0011]作为本专利技术的进一步方案，在步骤二中，在获取胶原蛋白溶液后，再经过盐析、透析和干燥，获取纯化后的胶原蛋白，再次使用冰乙酸对提取的胶原蛋白溶解，使用碳酸钠调节碱性蛋白酶的PH值在7
‑
9，进行胶原蛋白酶解，其中酶解温度控制在45
‑
50℃，使用95
‑
100℃的水浴灭活碱性蛋白酶，使用离心机取上清，放置室内，降温至25℃，使用分子截留超滤渗析膜筛选小于3Kda的胶原蛋白肽，放置冰箱降至0℃，再进行液氮雾气干燥。
[0012]作为本专利技术的进一步方案，在步骤三中，胶原蛋白肽螯合铁离子的螯合物为硫酸亚铁和氯化亚铁，胶原蛋白肽螯合锌离子的螯合物为硫酸锌和乳酸锌，在螯合反应体系中，酸碱度为4
‑
6，温度为20
‑
30℃，反应时间为50
‑
70min，胶原蛋白肽和金属离子添加比例为3
‑
5：1，具体的螯合步骤为：步骤S1，使用超蒸水溶解胶原蛋白肽，加入维生素C，用于增强反应体系中的抗氧化能力，加入冰乙酸调节酸碱度至4
‑
6，加入硫酸亚铁和氯化亚铁，在恒温高压罐中反应，压强为150
‑
200kpa，其中，恒温高压罐中填充的气体为氮气；步骤S2，在反应至40min时，在螯合反应体系中加入柠檬酸，再加入胶原蛋白肽、硫酸锌和乳酸锌；步骤S3，将冰乙酸和柠檬酸按照1：3的比例混合后，加入螯合体系，并在反应10min后，加入硫酸亚铁和硫酸锌的混合物；步骤S4，使用透析膜，透析除去游离铁离子和锌离子，并使用无水乙醇溶解，使用75%乙醇清洗，液氮雾气干燥，获取胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物粉末。
[0013]本专利技术步骤三中，为了获取优异的螯合反应参数，对螯合反应体系中的不同酸碱度、温度和反应时间进行多因素分析，综合对比不同水平因素影响下胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量，其中，恒定胶原蛋白肽和金属离子添加比例为4:1，分析不同酸碱、温度和反应时间的影响系数，首先对比线性曲线，对数曲线以及指数曲线在基于不同酸碱、温度和反应时间数据上的拟合度，确立对数曲线和指数曲线的拟合度高于线性曲线，随后以对数曲线和指数曲线相结合的形式，进行不同水平因素影响下胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量的综合相关性分析，所用的分析公式为：Y=(alnT
‑
blnp)/(e
‑
ct
)；其中，Y为胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量，a为不同温度对胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量影响的相关系数，b为不同酸碱度对胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量影响的相关系数,c为不同反应时间对胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量影响的相关系数，T为螯合反应中的不同温度值，p为螯合反应中的不同酸碱度值，t为螯合反应中的不同反应时间值。
[0014]确立螯合反应参数后，进行螯合物添加比例的优异值分析，所用螯合物为胶东海参和牡蛎制备的胶原蛋白肽以及铁锌金属离子，在分析过程中，使用单因素分析法分析铁锌金属离子对胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量影响，使用单因素线性曲线和对数线性曲线进行结合分析，再通过螯合物添加比例的数据与真实胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物产量的结果进行验证，确立最终分析的结果中曲线拟合度大于0.85时，确立螯合物添加比例的优异值，所用确立螯合物添加比例的公式为：Y=(r
0+
r1x2‑
r2lnx)/(x
1/3
+lnx)；其中，Y为胶原蛋白肽螯合铁
‑
锌螯合物的产量，r0为单因素线性曲线和对数线性
曲线结合分析中的常数，r1为单因素线性曲线的相关系数，r2为对数曲线的相关系数，x为螯合物添加比例。
[0015]本专利技术的有益技术效果为：1.使用液氮反复对牡蛎和胶东海参进行冻融，能够让牡蛎和胶东海参变脆，打磨出的粉粒更为细致，便于胶原蛋白肽的提取，高压震颤辅助去脂，在去除脂质上有着更为优异的性能，应用超声波除钙，能够本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，使用胶东海参和牡蛎制作海鲜蛋白粉；步骤二，处理海鲜蛋白粉并制成胶原蛋白肽；步骤三，制作螯合有铁离子和锌离子的胶原蛋白肽，胶原蛋白肽螯合铁离子的螯合物为硫酸亚铁和氯化亚铁，胶原蛋白肽螯合锌离子的螯合物为硫酸锌和乳酸锌，在螯合反应体系中，酸碱度为4
‑
6，温度为20
‑
30℃，反应时间为50
‑
70min，胶原蛋白肽和金属离子添加比例为3
‑
5：1，具体的螯合步骤为：步骤S1，使用超蒸水溶解胶原蛋白肽，加入维生素C，用于增强反应体系中的抗氧化能力，加入冰乙酸调节酸碱度至4
‑
6，加入硫酸亚铁和氯化亚铁，在恒温高压罐中反应，压强为150
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200kpa，其中，恒温高压罐中填充的气体为氮气；步骤S2，在反应至40min时，在螯合反应体系中加入柠檬酸，再加入胶原蛋白肽、硫酸锌和乳酸锌；步骤S3，将冰乙酸和柠檬酸按照1：3的比例混合后，加入螯合体系，并在反应10min后，加入硫酸亚铁和硫酸锌的混合物；步骤S4，使用透析膜，透析除去游离铁离子和锌离子，并使用无水乙醇溶解，使用75%乙醇清洗，液氮雾气干燥，获取胶原蛋白肽螯合铁
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锌螯合物粉末。2.根据权利要求1所述的一种胶原蛋白肽的制备方法，其特征在于，在步骤一中，对清洗干净且去除内脏和皮的胶东海参和牡蛎进行液氮浸泡处理3
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4h，随后使用40℃水浴30
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60min，再放入液氮5
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6h，最后打碎研磨成粉，胶东海参和牡蛎中海参的质...

【专利技术属性】
技术研发人员：姜乃义，毕思霞，
申请(专利权)人：烟台源力德海洋生物有限公司，
类型：发明
国别省市：