诱导马尾松未成熟种子胚性胚柄细胞团再生植株的方法技术

技术编号：3927388 阅读：471 留言：0更新日期：2012-04-11 18:40

一种诱导马尾松未成熟种子ＥＳＭ再生植株的方法，利用马尾松未成熟种子ＥＳＭ所具有的持续裂生能力特征，通过固体和液体培养的交替培养，经过维持、增殖、体胚成熟前期、成熟培养四个阶段，使ＥＳＭ形成发育完整、结构正常的体胚，经萌发培养获得马尾松植株。采用本发明专利技术所提供的方法，可以获得大量遗传基础一致的马尾松体胚的再生植株，为马尾松珍稀遗传资源的保存、优良基因型苗木的大量生产，提供了一种周期短、发生效率高的新技术。

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【技术实现步骤摘要】

本专利技术属林业中的种苗繁殖生物
，具体涉及一种诱导马尾松优树未成熟种子胚性胚柄细胞团(Embryonal Suspensor Mass，简称ESM)再生植株的方法。
技术介绍
马尾松(Pinus massoniana)是我国南方的主要用材树种之一，分布范围广、蓄积量大。由于它的适应性强、生长快、用途广泛、造林更新容易、成本低，在绿化荒山、改善生态环境方面起了很大的作用。与商品材杉木和北方红松相比，马尾松在弯曲强度、弯曲弹性模量、顺纹压力、端面硬度4个指标上都超过杉木、红松；而且其木材纤维素含量较高，木材广泛用于建筑、板材、家具、胶合板、造纸和木纤维工业。马尾松木材很耐水湿，素有“水浸千年松”之说，适于水底地下工程，大量用于矿柱和桩木；松脂的主要成份是松香和松节油，是重要的天然化工原料，马尾松还是我国主要的产脂树种，产脂期长，产量高，单株立木胸径 18cm以上，每年可割脂5 6kg ；马尾松木材含纤维素62%，脱脂后是造纸和人造纤维工业的重要原料；利用松根、弯曲木可培养名贵的中药材茯苓，等等。因此，加强对马尾松现有林分的保护，研究、保护马尾松的遗传资源和发展马尾松人工林资源具有的重要意义。在马尾松森林资源的培育中，采用遗传改良材料种植是营林成功的关键措施之一。马尾松良种繁育目前主要采用种子园育种、优树无性系扦插繁殖等传统方法，繁殖速度较慢，难以满足生产应用的需求。被子植物体胚的发生和植株再生的思想，源于1902年Haberlandt提出的植物细胞具有全能性的概念，即植物体的每一个细胞都具有发育成为一个新个体的潜在能力。在人...

【技术保护点】
一种诱导马尾松未成熟种子胚性胚柄细胞团再生植株的方法，其特征是在每年的６月中旬采集马尾松优树球果，置于４℃冷藏保存预处理一周以上后，在无菌条件下剥取球果中的未成熟胚，按以下培养条件和先后时间顺序培养：ａ．ＥＳＭ的起始诱导在无菌条件下将未成熟种子胚接种至下述诱导培养基中，在２３℃的温度下暗培养４０天，诱导获得大量ＥＳＭ，培养基配方如下：ＫＮＯ↓［３］３４０ｍｇ／ＬＣａ（ＮＯ↓［３］）↓［２］.４Ｈ↓［２］Ｏ５６ｍｇ／ＬＮＨ↓［４］ＮＯ↓［３］４００ｍｇ／ＬＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４／Ｌ琼脂７．０ｇ／Ｌ将维持培养２０天后的ＥＭＳ移入以下液体培养基中，在２３℃、暗培养，摇床转速为８０～１００ｒ．ｐ．ｍ的条件下增殖培养７天：ＫＮＯ↓［３］３４０ｍｇ／ＬＣａ（ＮＯ↓［３］）↓［２］.４Ｈ↓［２］Ｏ５５６ｍｇ／ＬＮＨ↓［４］ＮＯ↓［３］４００ｍｇ／ＬＫＨ↓［２］ＰＯ↓［４］１７０ｍｇ／ＬＣａＣｌ↓［２］.２Ｈ↓［２］Ｏ８５ｍｇ／ＬＭｇＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ３７０ｍｇ／ＬＮａ↓［２］－ＥＤＴＡ.Ｈ↓［２］Ｏ３７．３ｍｇ／ＬＦｅＳＯ↓［４］.７Ｈ↓［２］Ｏ２７．８ｍｇ／ＬＨ↓［３］ＢＯ↓［３］６．２...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：施季森，高燕，席梦利，边黎明，陈金慧，郑仁华，黄寿先，
申请(专利权)人：南京林业大学，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]

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