抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用制造技术

本公开提供了抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用，其中，抑制PLOD2的物质为能够使得细胞中PLOD2蛋白的表达量、含量和比活性中的至少一者发生下降的物质。本公开提供了对肝癌生长和转移均能产生抑制作用的新的药物，从而为肝癌的治疗提供了新的方案。从而为肝癌的治疗提供了新的方案。从而为肝癌的治疗提供了新的方案。

【技术实现步骤摘要】
抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用


[0001]本公开涉及生物医药领域，具体地，涉及抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用。

技术介绍

[0002]肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma，HCC)约占原发性肝癌的75％，由于术后肿瘤复发和转移率高，HCC患者总体预后较差。目前肝癌的治疗药物主要包括索拉菲尼(Sorafenib)、乐伐替尼(Lenvatinib)、瑞戈非尼(Regorafenib)、PD
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L1抗体等。然而，针对HCC仍亟需研发更多有效的治疗药物，尤其是对肝癌生长和转移均能产生抑制作用的药物。

技术实现思路

[0003]本公开的目的在于提供对肝癌生长和转移均能产生抑制作用的新的药物。
[0004]本公开的专利技术人发现，在肝癌细胞中对PLOD2进行抑制能够显著降低肝癌细胞增殖和/或迁移和/或侵袭和/或转移的能力，由此得到了本专利技术。
[0005]为了实现上述目的，本公开提供了抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用，其中，抑制PLOD2的物质为能够使得细胞中PLOD2蛋白的表达量、含量和比活性中的至少一者发生下降的物质。
[0006]优选地，所述抑制PLOD2的物质为靶向PLOD2的siRNA、插入有编码靶向PLOD2的shRNA的片段的表达质粒和插入有编码靶向PLOD2的gRNA的片段的基因编辑载体中的至少一种。
[0007]优选地，编码靶向PLOD2的shRNA的片段的序列如SEQ ID NO.2
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4中任意一者所示。
[0008]优选地，所述抑制PLOD2的物质为米诺地尔(Minoxidil)。
[0009]优选地，所述治疗肝癌的药物为抑制肝癌细胞增殖和/或迁移和/或侵袭和/或转移的药物。
[0010]优选地，所述肝癌为肝细胞癌。
[0011]优选地，所述肝癌为具有高表达PLOD2蛋白的肿瘤标志物特征的肝癌。
[0012]优选地，所述PLOD2蛋白为前胶原
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赖氨酸,2
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氧代戊二酸5
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双加氧酶2。
[0013]优选地，所述PLOD2蛋白为如下(a)或(b)：(a)氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白；(b)氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有前胶原
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赖氨酸,2
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氧代戊二酸5
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双加氧酶2活性的蛋白。
[0014]通过上述技术方案，本公开提供了对肝癌生长和转移均能产生抑制作用的新的药物，从而为肝癌的治疗提供了新的方案。
[0015]本公开的其他特征和优点将在随后的具体实施方式部分予以详细说明。
附图说明
[0016]附图是用来提供对本公开的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与下面的具
体实施方式一起用于解释本公开，但并不构成对本公开的限制。在附图中：
[0017]图1为构建重组质粒筛选PLOD2敲低效果最好的HCC细胞系进行后续实验。
[0018]图2为细胞增殖实验检测敲低PLOD2表达对HCC细胞增殖能力的影响。(A)敲低PLOD2抑制MHCC97H细胞增殖(n＝4)；(B)敲低PLOD2抑制Huh7细胞增殖(n＝4)。(***表示P<0.001；****表示P<0.0001)。
[0019]图3为细胞划痕实验检测敲低PLOD2表达对HCC细胞迁移能力的影响。(A)MHCC97H
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shPLOD2稳定细胞系划痕图片示意图；(B)MHCC97H
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shPLOD2稳定细胞系迁移率分析(n＝4)；(C)MHCC97H
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shPLOD2稳定细胞系Western blot检测；(D)Huh7
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shPLOD2稳定细胞系划痕图片示意图；(E)Huh7
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shPLOD2稳定细胞系迁移率分析(n＝4)；(F)Huh7
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shPLOD2稳定细胞系Western blot检测。(*表示P<0.05；**表示P<0.01；***表示P<0.001)。
[0020]图4为Transwell细胞侵袭实验检测敲低PLOD2表达对HCC细胞侵袭能力的影响。(A)敲低PLOD2抑制Huh7细胞侵袭细胞穿膜示意图；(B)敲低PLOD2后Huh7细胞穿膜数量统计(n＝5)，****表示P<0.0001；(C)Huh7
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shPLOD2稳定细胞系及对照细胞Western blot检测。
[0021]图5为不同浓度Minoxidil对HCC细胞PLOD2蛋白表达影响。
[0022]图6为Minoxidil对HCC细胞增殖能力的影响。(A)MHCC97H细胞增殖曲线(n＝5)；(B)Huh7细胞增殖曲线(n＝5)；(C)MHCC97H细胞克隆形成实验示意图；(D)MHCC97H细胞克隆数统计学分析(****表示P<0.0001)。
[0023]图7为Minoxidil对HCC细胞凋亡的影响。(A)流式细胞分析检测MHCC97H细胞的凋亡率；(B)MHCC97H细胞凋亡率统计学分析(n＝3),Minoxidil处理组与PBS组相比无显著差异；(C)流式细胞分析检测Huh7细胞的凋亡率；(D)Huh7细胞凋亡率统计学分析(n＝3),Minoxidil处理组与PBS组相比无显著差异。
[0024]图8为Minoxidil对HCC细胞迁移能力的影响。(A)MHCC97H细胞划痕图片示意图；(B)MHCC97H细胞迁移率分析(n＝4)；(C)Huh7细胞划痕图片示意图；(D)Huh7细胞迁移率分析(n＝5)。(**表示P<0.01；***表示P<0.001)。
[0025]图9为Minoxidil对HCC细胞侵袭能力的影响。(A)Huh7细胞穿膜代表图片；(B)Huh7细胞穿膜数量统计学分析(n＝4)，**表示P<0.01；(C)MHCC97H细胞穿膜代表图片；(D)MHCC97H细胞穿膜细胞数量统计学分析(n＝5)，***表示P<0.001。
具体实施方式
[0026]以下对本公开的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本公开，并不用于限制本公开。
[0027]本公开提供了抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用，其中，抑制PLOD2的物质为能够使得细胞中PLOD2蛋白的表达量、含量和比活性中的至少一者发生下降的物质。
[0028]优选地，所述抑制PLOD2的物质为靶向PLOD2的siRNA、插入有编码靶向PLOD2的shRNA的片段的表达质粒和本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抑制PLOD2的物质在制备治疗肝癌的药物中的应用，其中，抑制PLOD2的物质为能够使得细胞中PLOD2蛋白的表达量、含量和比活性中的至少一者发生下降的物质。2.根据权利要求1所述的应用，其中，所述抑制PLOD2的物质为靶向PLOD2的siRNA、插入有编码靶向PLOD2的shRNA的片段的表达质粒和插入有编码靶向PLOD2的gRNA的片段的基因编辑载体中的至少一种。3.根据权利要求2所述的应用，其中，编码靶向PLOD2的shRNA的片段的序列如SEQ ID NO.2
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4中任意一者所示。4.根据权利要求1所述的应用，其中，所述抑制PLOD2的物质为米诺地尔。5.根据权利要求1所述的应用，其中，所述治疗肝癌的药物为抑制肝癌细胞增殖和/或迁移和/或侵袭和/或转移的药物。6.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙薇，贺福初，应万涛，周瑶，郝宁，贾雪，
申请(专利权)人：中国人民解放军军事科学院军事医学研究院，
类型：发明
国别省市：