本发明专利技术公开一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置,设有加液管、接液管及至于两者之间的载片,载片有多个直径8
【技术实现步骤摘要】
一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置
[0001]本专利技术涉及一种循环血肿瘤细胞捕获装置,尤其是一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置。
技术介绍
[0002]循环血肿瘤细胞(circulating tumor cell,CTC)是原发肿瘤在浸润性生长过程中进入血液循环的癌细胞。CTC播种到远端组织和适应新的微环境后,定植形成单发或多发转移灶(瘤)并有可能以CTC的形式再次入血,造成多脏器转移。因此,早期发现及捕获血液中的CTC,进而对其进行培养,对于判断患者预后、复发风险监测、疗效评价和个体化治疗都有着十分重要的指导作用。
[0003]目前,已有多种捕获CTC的方法。以往最常采用的是根据血液中各种细胞的密度不同,借助细胞分离液进行组分分离的密度梯度离心法。然而,在纯化中还会丢弃一部分CTC,使原本稀少的CTC数量更少,故该方法存在着灵敏度差的问题。另一种是过滤法,是使用8μm孔径的聚碳酸酯(polycarbonate)膜通过离心过滤血液,较小的淋巴细胞和中性粒细胞可以通过,而较大的肿瘤细胞以及单核细胞则被阻滞在膜上。虽然该方法操作简单,但是在离心过滤过程中,会有大量细胞聚集在滤膜表面而造成滤孔堵塞,故需反复冲洗或更换滤器,工作效率较低,实验成本高;另外,在完成过滤后,还需将存留在膜上的细胞洗脱回收,存在着细胞次生损伤的危险。近年来问世的免疫磁珠法和CTC芯片法操作复杂,检测成本和实验条件要求高,故很难广泛推广应用。
技术实现思路
[0004]本专利技术是为了解决现有技术所存在的上述技术问题,提供一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置。
[0005]本专利技术的技术解决方案是:一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置:设有可拆卸连接的加液管及接液管,所述加液管位于上面、接液管位于下面且两者之间设置有载片,载片上排列有多个直径8
‑
15μm的通孔,所述接液管底部有排液口,所述接液管侧壁上端固定有通气管,通气管的另一端与气囊相接,即接液管内部通过通气管与气囊相通。
[0006]所述加液管与接液管之间设有连接管,加液管底部及接液管顶部均与连接管可拆卸连接,所述载片安装于连接管内。
[0007]所述通气管内置有N95滤膜。
[0008]所述通气管的轴线向下倾斜。
[0009]本专利技术设有加液管、接液管及至于两者之间的载片,载片有多个直径8
‑
15μm的通孔,通过操作所设置的气囊,可产生正负压抽吸外周血样,即可从外周血样中有效捕获CTC和单核细胞,又可防止大量细胞聚集在载片表面而造成通孔堵塞。同时,可直接将载有CTC和单核细胞的载片置于显微镜下观察捕获细胞情况,然后再将载片放到相应的孔板中进行培养,实现无创CTC捕获与2D或3D培养的无缝连接,避免细胞次生损伤且提高了工作效率。
本专利技术利于循环血肿瘤细胞捕获及培养,可有效提高CTC的捕获率和细胞活力,从而保证CTC培养和扩增的成功率。
附图说明
[0010]图1是本专利技术实施例1的结构示意图。
[0011]图2是本专利技术实施例2的结构示意图。
具体实施方式实施例1
[0012]本专利技术的一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置如图1所示,设有可拆卸连接的加液管1及接液管2,即可通过螺纹、插接等可拆卸方式连接,所述加液管1位于上面、接液管2位于下面且两者之间设置有载片3,载片3的材质为PET,厚度50
‑
500μm,直径应小于48孔板或96孔板的孔径,可通过加液管1与接液管2之间的结合力及密封胶垫11使载片3置于加液管1及接液管2之间,应保证加液管1、接液管2及载片3之间密封。载片3上排列有多个直径8
‑
15μm的通孔4,加液管1上端为敞口,便于加液,接液管2底部有排液口5,在排液口5设置排液管,排液管上安装排液阀门6,所述接液管2侧壁上端固定有通气管7,通气管7的另一端与气囊8相接,即接液管2内部通过通气管7与气囊8相通。
[0013]捕获CTC时,关闭排液阀门6,按1:5
‑
10的体积比例将血液与细胞培养液充分混合,以降低血液的粘滞性,制成血液样本;根据加液管1的容量逐批将血液样本加入加液管1内,反复按压及松开气囊8以形成正负气压。按压气囊8形成正压:对载片3上方的细胞和血液产生冲力,防止过滤过程中出现通孔4堵塞,保持通孔4通畅;松开气囊产生负压:使血液和小于通孔直径的细胞在吸力的作用下顺利通过通孔,大于通孔直径的细胞留于载片3上。当过滤至接液管2内的液体达到一定高度时,需要打开排液阀门6,使液体排出。捕获CTC完成后,将载有CTC的载片3取下,放到相应的孔板中进行培养。
实施例2
[0014]本专利技术的一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置如图2所示,设有可拆卸连接的加液管1及接液管2,所述加液管1位于上面、接液管2位于下面,加液管1与接液管2之间设有连接管9,加液管1底部及接液管2顶部均通过螺纹、插接等可拆卸方式与连接管9连接,即加液管1及接液管2通过连接管9实现可拆卸连接,应保证加液管1、接液管2及连接管9之间密封。载片3安装于连接管9内,安装形式可为固定或活动两种,载片3的材质为PET,厚度50
‑
500μm,载片3上排列有多个直径8
‑
15μm的通孔4。当载片3固定安装于连接管9内时,最好安装在连接管9的底部且连接管9的直径小于48孔板或96孔板的孔径,高度低于适配孔的上缘,即应保证连接管9可放入培养孔内。加液管1上端为敞口,便于加液(血液样本),接液管2底部有排液口5,在排液口5设置排液管,排液管上安装排液阀门6,所述接液管2侧壁上端固定有通气管7,通气管7的另一端与气囊8相接,即接液管2内部通过通气管7与气囊8相通,通气管6的轴线向下倾斜,使按压气囊8产生的气流正好冲向载片3,最好在通气管6内设置N95滤膜10,可柔化气压。
[0015]捕获CTC的操作方式同实施例1。分离后,将安装有载片3的连接管9取下或将载片3取出,放到相应的孔板中进行培养。
本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种利于循环血肿瘤细胞捕获及培养的装置,其特征在于:设有可拆卸连接的加液管(1)及接液管(2),所述加液管(1)位于上面、接液管(2)位于下面且两者之间设置有载片(3),载片(3)上排列有多个直径8
‑
15μm的通孔(4),所述接液管(2)底部有排液口(5)及排液阀门(6),所述接液管(2)侧壁上端固定有通气管(7),通气管(7)的另一端与气囊(8)相接,即接液管(2)内部通过通气管(7)与气囊(8)相通。2.根据...
【专利技术属性】
技术研发人员:李宏,李胜,
申请(专利权)人:广州精科生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。