酶激活的血清延长半衰期治疗性缀合物制造技术

本文中公开了具有延长的循环血清半衰期的治疗性缀合物。所述治疗性缀合物包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的药物部分。还提供了使用所述治疗性缀合物的方法。部分。还提供了使用所述治疗性缀合物的方法。部分。还提供了使用所述治疗性缀合物的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】酶激活的血清延长半衰期治疗性缀合物
[0001]相关申请
[0002]本申请根据35 U.S.C.
§
119(e)要求以下的权益：2020年10月30日提交的美国63/108,046和2021年6月7日提交的美国63/197,935，其通过引用整体并入本文中。

技术介绍

[0003]多种治疗药物由于免疫相关毒性和其他剂量限制因素而缺乏实际效力，例如诱导固有免疫应答的药物；然而，这些药物对于全身性使用通常毒性太大。这是因为全身性固有免疫激活极大地限制了可施用的剂量。因此，最大耐受剂量在许多对象中未达到治疗水平。

技术实现思路

[0004]公开了治疗剂或显像剂的血清半衰期延长的药物缀合物，所述药物缀合物的接头包含可被酶(例如，存在于癌组织中的细胞外)选择性切割以在切割位点释放药物部分的底物。在通过酶切割底物时，治疗性缀合物以其活性形式或以易于代谢为其活性形式的形式释放药物部分。还公开了包含所述药物缀合物的药物组合物，以及使用所述部分缀合物治疗癌症的方法。
[0005]在一些方面中，治疗性缀合物被设计成在对象的肿瘤微环境中释放治疗有效量的药物(或其他药物部分)而不在所述对象中诱导急性毒性。出乎意料的是，即使在不存在细胞结合性(例如靶向)部分的情况下，本公开内容的缀合物能够局部递送治疗有效量的药物。代替靶向部分或其他细胞特异性归巢机制，本公开内容的缀合物包含半衰期延长部分和可切割接头，其使得药物(或其他药物部分)能够特异性地在肿瘤微环境中局部累积和释放。半衰期延长部分使得药物能够局部累积，而特异性是使用被肿瘤微环境中高水平存在的酶特异性切割的可切割接头实现的。因此，酶对接头的特异性切割导致在肿瘤微环境中局部释放治疗有效量的药物，而没有通常与药物全身递送相关的毒性副作用。
[0006]本公开内容的一些方面提供了治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的药物部分，其中所述治疗性缀合物在体内的循环血清半衰期为至少48小时，并且所述缀合物不包含以1
×
10
‑6M或更小的K
d
与细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。
[0007]本公开内容的另一些方面提供了治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的药物部分，其中所述治疗性缀合物在体内的循环血清半衰期为至少48小时，并且所述缀合物不包含与肿瘤微环境中的细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。
[0008]本公开内容的另一些方面还提供了治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的药物部分，其中所述治疗性缀合物的体内循环血清半衰期相对于未与半衰期延长部分连接的药物部分的循环血清半衰期延长至少2倍，并且所述缀合物不包含以1
×
10
‑6M或更小的K
d
与细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。
[0009]本公开内容的另一些方面还提供了治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头
与半衰期延长部分连接的药物部分，其中所述治疗性缀合物的体内循环血清半衰期相对于未与半衰期延长部分连接的药物部分的循环血清半衰期延长至少2倍，并且所述缀合物不包含与肿瘤微环境中细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。
[0010]不与半衰期延长部分连接的药物部分在本文中称为“游离”药物部分(即由酶切割缀合物产生的药物部分的亲本分子)。
[0011]在一些实施方案中，半衰期延长部分包含血清蛋白。例如，血清蛋白可选自纤连蛋白、转铁蛋白和人血清白蛋白(human serum albumin，HSA)。
[0012]在一些实施方案中，半衰期延长部分包含与血清蛋白结合的分子。例如，与血清蛋白结合的分子可以是纤连蛋白、转铁蛋白或HSA。
[0013]在一些实施方案中，与血清蛋白结合的分子与血清蛋白结合的分子是抗体。例如，抗体可以是Fab、F(ab)2、F(ab
’
)、F(ab
’
)2、F(ab
’
)3、Fd、Fv、二硫键连接的Fv、dAb或sdAb(或)、CDR、scFv、(scFv)2、di
‑
scFv、bi
‑
scFv、tascFv(串联scFv)、(例如，双抗体、三抗体和四抗体)、T细胞接合物Fc、scFv
‑
Fc、Fcab、mAb2、小模块化免疫药物(small modular immunopharmaceutical，SMIP)、Genmab/unibody或duobody、V
‑
NAR结构域、IgNAR、minibody、IgGACH2、DVD
‑
Ig、probody、胞内抗体或多特异性抗体。
[0014]在一些实施方案中，与血清蛋白结合的分子是非抗体分子。例如，非抗体分子可以是亲和体(affibody)、多肽、affilin、抗运载蛋白、atrimer、avimer、DARPin、FN3支架(例如，Adnectin、Centyrin)、fynomer、Kunitz结构域、nanofitin、pronectin、三抗体、双环肽或Cys
‑
结。本公开内容涵盖了与血清蛋白结合的其他非抗体分子。
[0015]在一些实施方案中，半衰期延长部分包含stefin多肽(即，多肽)的HSA结合性重组改造变体。
[0016]在一些实施方案中，stefin多肽(即，多肽)的重组改造变体包含与SEQ ID NO：110至132中任一个的氨基酸序列具有至少70％、至少80％、至少90％或100％同一性的氨基酸序列。
[0017]在一些实施方案中，半衰期延长部分包含抗体Fc结构域，其任选地来自IgA、IgD、IgE、IgG或IgM、或其亚类。
[0018]在一些实施方案中，半衰期延长部分包含生物相容性聚合物，其任选地选自聚(乙二醇)(poly(ethylene glycol)，PEG)、羟乙基淀粉、XTENTM聚合物和脯氨酸
‑
丙氨酸
‑
丝氨酸聚合物。
[0019]在一些实施方案中，治疗性缀合物由下式之一表示：X
‑
L1‑
SRS
‑
L2‑
DM，其中X是半衰期延长部分，L1是间隔基或键，SRS是可被酶(例如，存在于肿瘤微环境中的酶)切割的底物识别序列，L2是自牺牲接头(self
‑
immolative linker)(例如，其在FAPα切割之后被代谢或以其他方式清除以释放游离治疗性部分)或键，并且DM是药物部分。
[0020]在一些实施方案中，治疗性缀合物由下式之一表示：X
‑
(L1‑
SRS
‑
L2‑
DM)
n
；X
‑
L1‑
(SRS
‑
L2‑
DM)
n
；(X)
m本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的急性毒性药物部分，其中所述治疗性缀合物在体内的循环血清半衰期为至少48小时，所述缀合物不包含以1
×
10
‑6M或更小的K
d
与细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。2.治疗性缀合物，其包含通过可被酶切割的接头与半衰期延长部分连接的急性毒性药物部分，其中所述治疗性缀合物在体内的循环血清半衰期相对于游离药物部分的循环血清半衰期延长了超过2倍，并且所述缀合物不包含以1
×
10
‑6M或更小的K
d
与细胞的细胞表面蛋白结合的细胞结合部分。3.权利要求1或2所述的治疗性缀合物，其中所述半衰期延长部分包含血清蛋白。4.权利要求3所述的治疗性缀合物，其中所述血清蛋白选自纤连蛋白、转铁蛋白和人血清白蛋白(HSA)。5.权利要求1至4中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述半衰期延长部分包含与血清蛋白结合的分子，所述血清蛋白任选地选自纤连蛋白、转铁蛋白和HSA。6.权利要求5所述的治疗性缀合物，其中所述与血清蛋白结合的分子是抗体，任选地选自：Fab、F(ab)2、F(ab
’
)、F(ab
’
)2、F(ab
’
)3、Fd、Fv、二硫键连接的Fv、dAb或sdAb(或)、CDR、scFv、(scFv)2、di
‑
scFv、bi
‑
scFv、tascFv(串联scFv)、(例如，双抗体、三抗体和四抗体)、T细胞接合物()、Fc、scFv
‑
Fc、Fcab、mAb2、小模块化免疫药物(SMIP)、Genmab/unibody或duobody、V
‑
NAR结构域、IgNAR、minibody、IgGACH2、DVD
‑
Ig、probody、胞内抗体和多特异性抗体。7.权利要求5所述的治疗性缀合物，其中所述与血清蛋白结合的分子为非抗体分子，任选地选自：亲和体、多肽、affilin、抗运载蛋白、atrimer、avimer、DARPin、FN3支架(例如，Adnectin、Centyrin)、fynomer、Kunitz结构域、nanofitin、pronectin、三抗体、双环肽和Cys
‑
结。8.权利要求7所述的治疗性缀合物，其中所述半衰期延长部分包含stefin多肽(即，多肽)的HSA结合性重组改造变体。9.权利要求8所述的治疗性缀合物，其中stefin多肽(多肽)的所述重组改造变体包含与SEQ ID NO：110至132中任一个的氨基酸序列具有至少70％、至少80％、至少90％或100％同一性的氨基酸序列。10.权利要求1或2所述的治疗性缀合物，其中所述半衰期延长部分包含抗体Fc结构域，其任选地来自IgA、IgD、IgE、IgG或IgM、或其亚类。11.权利要求1或2所述的治疗性缀合物，其中所述半衰期延长部分包含生物相容性聚合物，其任选地选自聚(乙二醇)(PEG)、羟乙基淀粉、XTEN
TM
聚合物和脯氨酸
‑
丙氨酸
‑
丝氨酸聚合物。12.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其由下式之一表示：X
‑
L1‑
SRS
‑
L2‑
DM，其中：X是半衰期延长部分，L1是间隔基或键，SRS是可被酶切割的底物识别序列，L2是自牺牲接头或键，并且
DM是药物部分。13.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其由下式之一表示：X
‑
(L1
‑
SRS
‑
L2
‑
DM)n；X
‑
L1
‑
(SRS
‑
L2
‑
DM)n；(X)m
‑
(L1
‑
SRS
‑
L2
‑
DM)n；或者(X)m
‑
L1
‑
(SRS
‑
L2
‑
DM)n其中：X是半衰期延长部分，L1是间隔基或键，SRS是可被酶切割的底物识别序列，L2是自牺牲接头或键，DM是药物部分，m是1至6的整数，并且n是1至500，任选地1至100、1至10或1至5的整数。14.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述可被酶切割的接头存在于病变组织中的细胞外，所述病变组织任选地为癌组织。15.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述可被酶切割的接头是寡肽。16.权利要求15所述的治疗性缀合物，其中所述寡肽包含与所述药物部分共价连接的C端脯氨酸，所述共价连接任选地经由键或自牺牲接头和/或N端封闭基团进行。17.权利要求16所述的治疗性缀合物，其中所述键可借助于该酶的蛋白水解活性而被切割，任选地，其中所述键是酰胺键。18.权利要求12至17中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述自牺牲接头包含杂环自牺牲部分，其任选地为His
‑
Ala、对氨基苄氧基羰基(PABC)或和2，4
‑
双(羟基甲基)苯胺。19.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述底物识别序列被蛋白酶切割。20.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述蛋白酶是丝氨酸蛋白酶、金属蛋白酶或半胱氨酸蛋白酶。21.权利要求20所述的治疗性缀合物，其中所述蛋白酶存在于对象的癌性状态组织中的细胞外的水平是所述对象的该组织的健康状态的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90或100倍高。22.权利要求20或21所述的治疗性缀合物，其中所述蛋白酶存在于对象的癌性状态组织中的细胞外的水平是所述对象的其他组织的至少2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90或100倍高。23.前述权利要求中任一项所述的治疗性缀合物，其中所述蛋白酶是基质金属蛋白酶，其选自膜结合型基质金属蛋白酶(例如MMP14
‑
17和MMP24
‑
25)和分泌型基质金属蛋白酶(例如MMP1
‑
13和MMP18
‑
23以及MMP26
‑
28)。24.前述权利要求23所述的治疗性缀合物，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：阿姆里克，
申请(专利权)人：塔夫茨大学信托人，
类型：发明
国别省市：