一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法技术

本发明专利技术涉及生物医药技术领域，且公开了一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法，所述的生物标志物包括LncRNA NEAT1、miR

【技术实现步骤摘要】
一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体为一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法。

技术介绍

[0002]过敏性鼻炎(allergic rhinitis，AR)是一种由应变原引起的以免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)为主导的鼻黏膜Ⅰ型变态反应性疾病。患者常伴有阵发性喷嚏、流涕、鼻腔瘙痒、鼻阻塞、结膜充血、水肿等临床症状，严重影响其生活质量。AR的病因十分复杂，其致病机制尚处于研究阶段。积极探索AR相关发病机制，可为AR的防治提供可靠的理论基础。长链非编码RNA(long non
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coding RNA，LncRNA)转录长度超过200nt，无蛋白编码能力，但可参与基因表达调控系统，是调节炎症免疫反应的关键因子，并影响细胞生长发育，参与多种疾病的发生及进展。长链非编码RNA核富集转录本1(Long noncoding RNA nuclear
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enriched abundant transcript 1，LncRNA NEAT1)与炎症小体激活、促趋化因子生成等关系密切，被证实与哮喘、红斑狼疮等过敏性疾病相关。研究表明AR患者存在LncRNA NEAT1上调现象，Lnc RNA NEAT1可能通过免疫抑制、炎症反应等参与AR发生，影响AR症状严重程度，有望成为AR的潜在标志物。
[0003]根据过敏性鼻炎(AR)的临床诊断标准。目前尚无用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物。寻找特异、敏感的生物标志物，为临床提供一种新的诊断过敏性鼻炎(AR)的方法，及时确诊后可将过敏性鼻炎进行及时治疗，同时控制上、下呼吸道炎症，并通过控制上呼吸道的炎症来预防过敏性鼻炎(AR)的发作及后续哮喘的发生。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术提供了一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法，提出了LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4轴调控鼻黏膜上皮细胞炎性细胞因子参与AR的假说，采用过表达miR
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3p或敲低LncRNA NEAT1的方法，结合体内、外研究模型，从细胞和动物模型水平，阐明这一调轴调控鼻黏膜细胞中炎性因子在AR发生发展中的作用机制，探索LncRNA NEAT1及其靶点(miR
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3p)与AR炎症反应、疾病的风险及严重程度的关系，为临床发现AR评估新的生物标志物，并控制AR和缓解症状提供新的治疗靶点以及理论依据。
[0006](二)技术方案
[0007]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0008]一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物，一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物，所述的生物标志物包括LncRNA NEAT1、miR
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3p和KLF4。
[0009]一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物的诊断方法，所述方法是将生物标志物用于在过敏性鼻炎体内模型或体外模型中，检测LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4轴中每个分
子的表达模式，明确其表达模式与AR鼻粘膜上皮细胞增殖、凋亡和炎性细胞因子分泌等关键表型改变的相关性；
[0010]利用LncRNA NEAT1敲低和miR
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3p过表达慢病毒分别干预体内模型或体外模型，观察体内、体外鼻粘膜上皮细胞增殖、凋亡行为和炎性细胞因子分泌的变化规律，分析KLF4 mRNA和蛋白表达、细胞增殖和凋亡相关通路的表达模式，确定LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4轴参与了对鼻黏膜上皮细胞增殖、凋亡行为和炎性细胞因子分泌的调控过程；
[0011]采用RNA pull
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down技术确定miR
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3p与LncRNA NEAT1之间的相互作用。
[0012]优选的，所述体内模型是通过构建卵清蛋白诱导的小鼠AR动物模型。
[0013]优选的，所述体外模型是通过构建白细胞介素
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13(IL
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13)刺激原代小鼠鼻黏膜上皮细胞的细胞模型。
[0014](三)有益效果
[0015]与现有技术相比，本专利技术提供了一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物及诊断方法，具备以下有益效果：
[0016]本专利技术的诊断方法，首次在过敏性鼻炎体内、外模型中检测LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4水平，发现miR
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3p的表达较健康对照下调，而LncRNA NEAT1与KLF4的表达水平上调；该生物标志物可有效地用于过敏性鼻炎患者的诊断，且当LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4三个指标联合时，对过敏性鼻炎的诊断价值最高。
附图说明
[0017]图1为本专利技术的方法流程图；
[0018]图2为本专利技术中慢病毒干扰过敏性鼻炎小鼠模型的造模图。
具体实施方式
[0019]下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。
[0020]实施例一：
[0021]一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物，所述的生物标志物包括LncRNA NEAT1、miR
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3p和KLF4，该生物标志物在动物体内的实验。
[0022]实验目的：该生物标志物在动物体内中LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4轴中每个分子的表达模式，明确其表达模式与AR鼻粘膜上皮细胞增殖、凋亡和炎性细胞因子分泌等关键表型改变的相关性。
[0023]实验过程：
[0024]1.1过敏性鼻炎小鼠模型的建立及分组
[0025]基础致敏：在第0、7、14天分别以含卵清蛋白(OVA)25μg、氢氧化铝凝胶1mg、生理盐水0.5ml的混悬液0.5ml进行小鼠腹腔注射使之基础致敏；鼻腔激发：于第15天开始以500μg OVA加20μl生理盐水给予小鼠双侧鼻腔滴注，连续进行局部激发7天。过敏性鼻炎小鼠模型成功判定标准：以记分方式评定，最后一次OVA激发后观察30min，记录喷嚏数、鼻痒程度和鼻分泌物量，总分>5分表示造模成功。
[0026]分组：
[0027]A对照组(6只)
[0028]B模型组(6只)
[0029]1.2Ki67细胞增殖检测
[0030]1.按照标准操作过程本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物，其特征在于：所述的生物标志物包括LncRNA NEAT1、miR
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3p和KLF4。2.根据权利要求1所述的一种用于诊断过敏性鼻炎的生物标志物的诊断方法，其特征在于：所述方法是将生物标志物用于在过敏性鼻炎体内模型或体外模型中，检测LncRNA NEAT1/miR
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3p/KLF4轴中每个分子的表达模式，明确其表达模式与AR鼻粘膜上皮细胞增殖、凋亡和炎性细胞因子分泌等关键表型改变的相关性；利用LncRNA NEAT1敲低和miR
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3p过表达慢病毒分别干预体内模型或体外模型，观察体内、体外鼻粘膜上皮细胞增殖、凋亡行为和炎性细胞因子分泌的变化规律，分析KLF4 mR...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁红宇，
申请(专利权)人：内蒙古自治区人民医院，
类型：发明
国别省市：