一种三疣梭子蟹近交家系建立方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种三疣梭子蟹近交系建立方法及应用，属于三疣梭子蟹育种技术领域，所述方法为收集不同野生群体种质资源，采用单池单蟹模式构建全同胞家系，180日龄时通过生长速度、养殖成活率综合指数进行家系选择，家系内选择优良不带病毒的雌蟹转移至室内越冬，然后进行亲蟹强化培育，再次选择优质抱卵亲蟹，采用单池单蟹模式构建全同胞家系；全同胞兄妹连续自交，建立三疣梭子蟹近交系。本发明专利技术通过家系选育、营养强化等措施，克服三疣梭子蟹自交过程中繁殖力下降、性状分化等难点，首次建立三疣梭子蟹自交18代近交系，性状稳定，养殖成活率提高20％以上，整齐度高，全甲宽变异系数＜10％。并应用近交家系，完成了三疣梭子蟹高质量遗传连锁图谱构建和全基因组组装。高质量遗传连锁图谱构建和全基因组组装。

【技术实现步骤摘要】
一种三疣梭子蟹近交家系建立方法及应用


[0001]本专利技术属于三疣梭子蟹育种
，具体地涉及一种三疣梭子蟹近交系建立方法及应用。

技术介绍

[0002]三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)是一种重要的海洋经济动物，目前全国养殖面积30万余亩，产量达12万吨，已成为我国海洋养殖主导种类之一。近年来，随着梭子蟹养殖规模的不断扩大，各种病害也开始接踵而至，并出现大规模发生和暴发性流行的趋势，给产业和区域经济的发展造成重大损失。选育具有生长速度快、抗逆(病)能力强的新品种已成为三疣梭子蟹养殖业健康发展的关键。
[0003]近交系是指通过亲代与子代或者半同胞、全同胞等方式进行近亲交配，使具有不同性状的个体产生分离，获得遗传型相对纯合的个体，近交系中个体性状会逐步趋于稳定一致。其后代性状将不再发生分离，因此近交系是动植物育种研究的重要材料。近交系动物以其遗传高度稳定、基因高度纯合，以及偏差小、可重复性强，而具有很高的生物学使用价值和研究意义。其中哺乳类实验动物近交系已有上百年培育历史，仅小鼠近交系就达450多种，最高近交代数超过210代。鱼类培育近交系也有近50年以上的历史。但同时也发现个别鱼类近交系在培育过程中存在生命力和生殖力下降等近交衰退现象，影响近交系的培育。蟹类近交系的建立及应用尚未见报到，如何创建蟹类近交系是亟待解决的问题。
[0004]但在梭子蟹近交系建立过程中，采用什么交配方式可以加快近交进程？如何解决近交导致生殖力下降、传代困难？以上问题是梭子蟹近交系建立的技术难点。近交过程中容易出现近交衰退，无法继续进行下去。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题在于提供一种三疣梭子蟹近交系建立方法及应用，该方法克服了近交过程中出现的近交衰退问题，成功构建三疣梭子蟹近交系，且本专利技术方法操作简单、效率高，能满足遗传育种工作的需要。
[0006]本专利技术是通过如下技术方案来实现的：
[0007]一种三疣梭子蟹近交系建立方法，包括种质资源选择、家系建立、家系选择、亲蟹室内越冬、亲蟹强化培育、亲蟹选择、家系建立；
[0008](1)种质资源选择：3月份收集我国不同野生地理群体三疣梭子蟹雌蟹；
[0009]进一步，步骤(1)所述的不同野生地理群体三疣梭子蟹雌蟹符合以下特征：健康、活力强、附肢完整、无机械损伤、体表光鲜无附着物、交尾、体重为250g以上，所述的雌蟹数量在30只以上。
[0010](2)家系建立：将收集的三疣梭子蟹进行室内强化培育，即将排幼时，转移至苗种培育车间，采用单池单蟹模式进行苗种培育，每个育苗池即为1个全同胞家系；培育至II期幼蟹，每个家系选取2000
‑
3000只苗种，分别转移至室外网格养殖，养殖期间进行标准化管
理，每个家系水环境和管理基本一致；家系数量10个以上；
[0011]进一步，步骤(2)所述的室外网格：养殖池用纱网平均分割成10个以上小格，使每个小格的水环境尽量保持一致，每个小格放一个家系。
[0012](3)家系选择：120日龄时，三疣梭子蟹性成熟，采取全同胞兄妹交配方式，完成交配；180日龄时，每个家系随机选取30
‑
50个个体测量体重，统计家系成活率；以全部家系平均值作对照，计算每个家系生长速度、成活率提高值，然后生长速度、成活率提高值分别加权50％、50％，计算综合指数，综合指数＝50％(家系体重
‑
全部家系平均体重)/全部家系平均体重+50％(家系成活率
‑
全部家系平均成活率)/全部家系平均成活率，综合指数最大的家系为选留家系；自选留家系中选择50
‑
70只健康交尾雌蟹；
[0013]进一步，步骤(3)从选留家系中选择健康交尾雌蟹需要进行病毒检测。
[0014](4)亲蟹室内越冬：亲蟹在室内铺沙水泥池越冬，越冬期间投喂蟹体重3
‑
5％沙蚕，开始为自然水温，自然水温低于12℃时，通过加热设备稳定12
±
0.5℃，隔日换水50％，溶解氧≧5.0mg/L；
[0015]进一步步骤(4)所述亲蟹、越冬池、泥沙、饵料、海水消毒均需消毒。
[0016](5)亲蟹强化培育：3月上旬，按照0.5℃/d增幅，将越冬池水温逐渐升至21
±
0.5℃强化培育，每日换水50％，溶解氧≧5.0mg/L，强化培育期间投喂蟹体重10
‑
15％沙蚕、鱿鱼、菲律宾蛤仔；海水、饵料消毒后使用；
[0017](6)亲蟹选择：亲蟹抱卵后，选择10
‑
15个优良抱卵亲蟹，亲蟹应符合以下条件：亲蟹活力强，体表光洁，无机械损伤，附肢齐全；卵块形状完整无缺，颜色鲜明，色泽均匀一致；
[0018]进一步，步骤(6)所述的健康雌蟹需要进行病毒检测。
[0019](7)家系建立：将选择的10
‑
15个优良抱卵亲蟹，转移至苗种培育车间，建立家系，方法同步骤(2)。
[0020](8)近交系建立：通过以上策略，采取全同胞兄妹交配方式，家系内连续自交，建立三疣梭子蟹近交系。
[0021]本专利技术还提供所述方法建立的三疣梭子蟹近交系应用：近交系遗传高度稳定、基因高度纯合，以及偏差小、可重复性强，可以用来培育良种、建立遗传连锁图谱及全基因组图谱绘制。
[0022]本专利技术与现有技术相比的有益效果：
[0023]1、本专利技术在国际上首次采用全同胞兄妹交配方式，快速、高效建立三疣梭子蟹近交系；通过家系选育(选择规格大、肥满度高、活力强优良个体)、营养强化(沙蚕、鱿鱼、菲律宾蛤仔搭配投喂)等措施，克服三疣梭子蟹自交过程中性状分化、繁殖力下降等问题，使近交系完成传代，首次建立三疣梭子蟹自交18代近交系，性状稳定，养殖成活率与普通商品苗种相比提高20％以上，整齐度高，全甲宽变异系数＜10％。
[0024]2、本专利技术通过室外标准化海水池塘进行三疣梭子蟹家系养殖，性成熟时，家系内自然交尾，交尾后雌蟹11月中下旬转移室内水泥池越冬；与室内人工定向交尾相比该技术有诸多有点。首先室内人工定向交尾，需要8月下旬选择性成熟优良个体，但梭子蟹生长期持续到11月份，因此8月份选择，选择性状有误差；另外室外自然交尾操作简单、效率高，且交尾雌蟹在室外养殖发育好。
具体实施方式
[0025]下面通过实施例详细叙述本专利技术的技术方法：
[0026]一种三疣梭子蟹近交系建立及应用方法，包括种质资源选择、家系建立、家系选择、亲蟹室内越冬、亲蟹强化培育、亲蟹选择、家系建立；具体步骤如下：
[0027]1、种质资源选择：2006年3月份，收集我国莱州湾野生群体三疣梭子蟹50只，符合以下特征：健康、活力强、附肢完整、无机械损伤、体表光鲜无附着物、交尾、体重为250g以上雌蟹。
[0028]2、家系建立：将收集的雌蟹进行室内强化培育，卵块灰黑色，心跳200次/分左右时，预示该蟹即将排本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种三疣梭子蟹近交系建立方法，其特征在于，所述方法包括种质资源选择、家系建立、家系选择、亲蟹室内越冬、亲蟹强化培育、亲蟹选择、家系建立；(1)种质资源选择：3月份收集我国不同野生地理群体三疣梭子蟹雌蟹；(2)家系建立：将收集的三疣梭子蟹进行室内强化培育，即将排幼时，转移至苗种培育车间，采用单池单蟹模式进行苗种培育，每个育苗池即为1个全同胞家系；培育至II期幼蟹，每个家系选取2000
‑
3000只苗种，分别转移至室外网格养殖，养殖期间进行标准化管理，每个家系水环境和管理基本一致；家系数量10个以上；(3)家系选择：120日龄时，三疣梭子蟹性成熟，采取全同胞兄妹交配方式，完成交配；180日龄时，每个家系随机选取30
‑
50个个体测量体重，统计家系成活率；以全部家系平均值作对照，计算每个家系生长速度、成活率提高值，然后生长速度、成活率提高值分别加权50％、50％，计算综合指数，综合指数＝50％(家系体重
‑
全部家系平均体重)/全部家系平均体重+50％(家系成活率
‑
全部家系平均成活率)/全部家系平均成活率，综合指数最大的家系为选留家系；自选留家系中选择50
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70只健康交尾雌蟹；(4)亲蟹室内越冬：亲蟹在室内铺沙水泥池越冬，越冬期间投喂蟹体重3
‑
5％沙蚕，开始为自然水温，自然水温低于12℃时，通过加热设备稳定12
±
0.5℃，隔日换水50％，溶解氧≧5.0mg/L；(5)亲蟹强化培育：3月上旬，按照0.5℃/d增...

【专利技术属性】
技术研发人员：高保全，吕建建，孟宪亮，孙东方，王学忠，刘萍，李健，
申请(专利权)人：昌邑市海丰水产养殖有限责任公司，
类型：发明
国别省市：