红树植物ＤＮＡ的提取方法技术

本发明专利技术涉及红树植物的ＤＮＡ提取方法，包括以下步骤：（１）、取叶片研磨，加入预热的２％ＣＴＡＢ提取液溶解，然后加入２％体积的ＰＶＰ；（２）、温浴后加入少量ＲＮａｓｅ保温，再加入氯仿－异戊醇混合液后，常温下高速离心；（３）、取上清液转入离心管，加入预热的２％ＣＴＡＢ提取液，再加入氯仿－异戊醇混合液混合后，常温下高速离心；（４）、取上清液再转入离心管，加入ＮａＣｌ溶液，并加入冰冷异丙醇混合后，低温条件下放置沉淀ＤＮＡ；（５）、低温下高速离心，弃上清液，回收沉淀，用乙醇洗涤风干后加入ＴＥ缓冲液，置于低温下保存，本发明专利技术能有效除去ＤＮＡ提取过程中产生的多糖和单宁，得到的红树植物ＤＮＡ含量大、纯度高。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种红树植物ＤＮＡ的提取方法，其特征是包括以下步骤：　　（１）、取叶片用液氮充分研磨成粉末，加入预热的２％ＣＴＡＢ提取液溶解，然后加入２％体积的ＰＶＰ；　　（２）、在５５℃～６５℃下温浴４５ｍｉｎ～９０ｍｉｎ，加入少量ＲＮａｓｅ，３７℃保温１小时～２小时，再加入等体积的氯仿－异戊醇混合液混合后，常温下高速离心；　　（３）、取上清液转入离心管，加入１／２体积预热的２％ＣＴＡＢ提取液，再加入等体积的氯仿－异戊醇混合液混合后，常温下高速离心；　　（４）、取上清液再转入离心管，加入１／５体积的５ｍｏｌ／Ｌ的ＮａＣｌ溶液，并加入２／３体积的冰冷异丙醇混合后，低温条件下放置９０ｍｉｎ以上沉淀ＤＮＡ；　　（５）、低温下高速离心，弃上清液，回收沉淀，用７０％乙醇洗涤２～４次，风干后加入ＴＥ缓冲液，置于低温下保存。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：陈少波，丁文勇，仇建标，陈骁，刘伟成，艾为明，谢起浪，李尚鲁，王成义，王广银，郑春芳，池伟，黄丽，
申请(专利权)人：浙江省海洋水产养殖研究所，
类型：发明
国别省市：33[中国|浙江]