一种靶向YKL-40的人源化单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种靶向YKL

【技术实现步骤摘要】
一种靶向YKL
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40的人源化单克隆抗体及其应用


[0001]本专利技术属于生物医院
，具体涉及一种靶向YKL
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40的人源化单克隆抗体及其应用。

技术介绍

[0002]大量研究报道，肠道感染性疾病、糖尿病、血管疾病、神经退行性疾病、癌症等多种病人的血液和组织均呈现高表达的分泌性糖蛋白YKL
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40(基因名CHI3L1，分子量为40kDa)。而且，这些患者中YKL
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40表达的高低直接与疾病的恶化程度呈正相关，提示YKL
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40可作为疾病诊断和预后的潜在生物标志物。
[0003]申请人在前期2012年自主研发了抗YKL
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40功能的小鼠中和性抗体(mAY)，这是最早报道的鼠源性单克隆抗YKL
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40的中和抗体，具有阻断YKL
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40蛋白的功能。但是，对YKL
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40功能阻断作用的治疗性研究，尤其对有望用于临床病人治疗的人源化YKL
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40抗体靶向药物研发至今尚未报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的，是提供一种靶向YKL
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40的人源化单克隆抗体。本专利技术研究发现，YKL
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40分子的C端(334
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345位氨基酸)有一个富含碱性氨基酸精氨酸(R)和赖氨酸(K)的功能结构域(KR
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rich domain)，具有很强的肝素亲和力。YKL
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40正是借助该结构域与细胞膜上受体结合，发挥病理学功能，包括促进肿瘤细胞的迁移和肿瘤血管增生。本专利技术利用鼠源性YKL
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40单克隆抗体与YKL
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40结合的关键重、轻链CDR片段整合到人源抗体中，从15个侯选抗体中筛选到一个亲和力高的人源化抗体，并证明了该抗体能够有效阻断YKL
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40蛋白的功能，将此人源化中和YKL
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40的抗体命名为洛沙单抗，洛沙单抗是通过特异结合YKL
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40蛋白C末端的多元赖氨酸和精氨酸的功能结构域而发挥阻断作用，具有高特异性，预期针对多种肿瘤患者有效；相较于小分子药物，洛沙单抗有应用广、特异性强、副作用小的显著优势。
[0005]本专利技术进一步设想应用人源化YKL
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40单克隆抗体特异识别YKL
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40的功能结构域，封闭其生物学功能，进而抑制癌症的发生，阻断YKL
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40的作用可能对癌症患者起到个性化的治疗效果。
[0006]本专利技术为解决上述技术问题所采用的技术方案如下：
[0007]本专利技术提供一种靶向YKL
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40的单克隆抗体，该单克隆抗体与YKL
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40的333
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346位氨基酸特异性结合。本专利技术研究发现：人源化YKL
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40单克隆抗体能够特异性的与YKL
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40的333
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346位氨基酸结合，因此利用YKL
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40的333
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346位氨基酸多肽直接研发获得的中和抗体，均属于本专利技术所述的靶向YKL
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40的单克隆抗体。
[0008]作为优选实施方案，所述单克隆抗体的重链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成的CDR3；
[0009]所述单克隆抗体的轻链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:4的氨基酸序列组
成的CDR1、由SEQ ID NO:5的氨基酸序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:6的氨基酸序列组成的CDR3。
[0010]作为优选实施方案，所述单克隆抗体为人源化抗体，所述人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示。
[0011]作为优选实施方案，所述单克隆抗体为人源化抗体，所述人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:20所示。
[0012]本专利技术还提供一种核酸分子，编码所述的单克隆抗体。
[0013]作为优选实施方案，所述核酸分子的重链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:7的碱基序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:8的碱基序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:9的碱基序列组成的CDR3；
[0014]所述核酸分子的轻链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:10的碱基序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:11的碱基序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:12的碱基序列组成的CDR3。
[0015]本专利技术还提供一种CHO
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S稳转细胞株，所述细胞株表达抗YKL
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40人源化抗体。
[0016]本专利技术还提供一种所述的单克隆抗体在制备预防或治疗癌症药物中的应用，所述癌症选自脑胶质瘤、乳腺癌、胆囊癌。
[0017]本专利技术还提供一种所述的单克隆抗体在制备抑制血管再生药物中的应用。
[0018]本专利技术还提供一种所述的单克隆抗体在制备提高免疫力药物中的应用。
[0019]本专利技术还提供一种所述的单克隆抗体在制备抗慢性炎症药物中的应用。
[0020]本专利技术还提供一种用于预防或治疗癌症的药物，所述药物包含所述的单克隆抗体作为有效成分。
[0021]本专利技术所涉及的序列如下所示：
[0022][0023][0024]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0025]1.本专利技术提供了一种人源化YKL
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40单克隆抗体，该抗体与抗原蛋白结合位点是在位于YKL
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40蛋白C末端的多元赖氨酸和精氨酸的功能结构域，该单克隆抗体与YKL
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40的333
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346位氨基酸特异性结合，具有高特异性，预期针对多种肿瘤患者有效；有望作为抗肿瘤新药用于脑胶质瘤、乳腺癌、胆囊癌等癌症病人的治疗，并能联合其它靶向药增强药物疗效。
[0026]2.由于YKL
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40蛋白高表达于慢性肠炎、慢性关节炎、老年性痴呆、二型糖尿病等患者中，本专利技术提供的人源化YKL
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40单克隆抗体，对慢性肠炎、慢性关节炎、老年性痴呆、二型糖尿病病人的治疗有着广阔前景，今后可以推广进入国际市场。
[0027]3.本专利技术提供的人源化YKL
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40单克隆抗体，有阻断YKL
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40的血管再生和肿瘤发展功能及机制，为下一步进入临床试验，成为自主创新的首个抗YKL
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40靶向药打下基础本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向YKL
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40的单克隆抗体，其特征在于，该单克隆抗体与YKL
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40的333
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346位氨基酸特异性结合。2.根据权利要求1所述单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:1的氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:2的氨基酸序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:3的氨基酸序列组成的CDR3；所述单克隆抗体的轻链可变区的互补决定区包含由SEQ ID NO:4的氨基酸序列组成的CDR1、由SEQ ID NO:5的氨基酸序列组成的CDR2以及由SEQ ID NO:6的氨基酸序列组成的CDR3。3.根据权利要求1所述单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为人源化抗体，所述人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示，轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:19所示。4.根据权利要求1所述单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为人源化抗体，所述人源化抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:16所示，轻链可变区的氨基酸序列如SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：邵荣，龚伟，刘颖斌，
申请(专利权)人：上海交通大学医学院附属新华医院，
类型：发明
国别省市：