山豆根水提取物的制备方法及应用技术

本发明专利技术涉及一种山豆根的水提取物的制备方法、成分检测方法和山豆根水提取物在治疗帕金森方面的应用。将山豆根药材粉碎成粗粉，使用蒸馏水进行回流提取，合并提取液，进行冻干，得到冻干粉，用液相色谱联合质谱分析山豆根水提取物，得到147种成分。经过小鼠试验发现山豆根水提取物能够使其脑内纹状体多巴胺的含量增加，从而起到治疗帕金森病模型的作用。从而起到治疗帕金森病模型的作用。从而起到治疗帕金森病模型的作用。

【技术实现步骤摘要】
山豆根水提取物的制备方法及应用


[0001]本专利技术主要涉及山豆根提取物的制备方法及应用。

技术介绍

[0002]帕金森病(Parkinson
’
s disease，PD)为一种常见的神经系统性变疾病。老年人的病发率较高，大多数人发病约在60岁左右，青年病例较少。在我国， 60岁以上的老年人病发率约为1.7％。最常见的病例为散发，10％左右的患者有家族史。帕金森本身既不会影响寿命，也不会导致致命。随着中国治疗水平的提升，大部分病人的症状可以依靠药物来维持正常生活。但如果不及时治疗，就会导致身体机能降低，更要甚者会导致生活不能自理、瘫痪。经过调研此种病症并不能预防，并且导致病发的原因目前尚不明确，但是已经有相关研究表示可能与环境毒素有关。
[0003]6.参考2020版中国药典，山豆根为豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根和根茎，主要产于广西、广东、贵州等省。其味苦，寒；有毒。归肺、胃经。有清热解毒，消肿利咽之功效。用于火毒蕴结，乳蛾喉痹，咽喉肿痛，齿龈肿痛，口舌生疮。秋季采挖，除去杂质，洗净，干燥。目前从山豆根水提取物得到成分147种。但现在对于山豆根治疗脑部疾病的研究较少，此前研究表明山豆根对于阿尔兹海默病及脑缺血灌注损伤模型具有治疗作用。然而没有研究表明，山豆根对帕金森病具有治疗潜能，本专利技术将用试验证明山豆根提取物确实对帕金森产生治疗效果。
[0004]7.本专利技术与专利《一种山豆根的乙酸乙酯提取物及其制备、检测方法和应用》 CN103690595A不同，本专利技术的提取工艺与CN103690595A的提取工艺完全不同。
[0005]8.本专利技术与专利《提出了一种山豆根的水提醇沉部位》CN1306854A提取工艺不同。CN1306854A具体制备方法是：取山豆根，用水浸泡后加热提取，再经 0～3次热水提取后，过滤，合并水提液，浓缩，加乙醇，取醇沉部分即得。本专利技术与其不同点的是使用10倍量的蒸馏水进行回流提取，总共提取3次，每次2个小时，合并提取液，进行冻干，得到冻干粉。
[0006]9.本专利技术通过山豆根提取物提出了其治疗帕金森病的想法，改变了传统山豆根清热解毒、消肿利咽的观点，有望获得更安全、有效的新型药物，这是中药现代化的重要表现。

技术实现思路

[0007]本专利技术为了解决山豆根的水提取物制备方法、成分检测方法及其在治疗帕金森方面的应用的问题，将提供以下步骤：
[0008]1.一种山豆根水提取物的制备方法：
[0009]a.取山豆根2000g，粉碎成粗粉；
[0010]b.使用使用10倍量的蒸馏水进行回流提取，总共提取3次，每次2个小时；
[0011]c.合并提取液，进行冻干，得到冻干粉。
[0012]在步骤b中，使用10倍量的蒸馏水提取。
[0013]在步骤b中，提取次数为3次。
[0014]在步骤b中，每次提取时间为2小时。
[0015]在步骤c中，提取液进行冻干，并得到冻干粉。
[0016]本专利技术还包括一种上述方法得到的山豆根水提取物，检测成分为：槐醇、氧化苦参碱、槐苷等147种成分(见表1)。
[0017]本专利技术还包括一种检上述的山豆根水提取物的方法，用SCIEX ExionLC
TM AC液相色谱联合SCIEX Triple TOF 5600质谱系统对山豆根提取物进行分析，来获取其水提取物的色谱图轮廓，其特征在于所述检测方法由以下步骤组成：
[0018]色谱分析条件：柱温：40℃；流动相A：0.1％甲酸水溶液；流动相B： 0.1％甲酸乙腈；进样量：5μL；流速：0.4mL/min；洗脱梯度：0
‑
3min，5％
‑
14％ B；3
‑
3.5min，14％B；3.5
‑
5min，14％
‑
28％B；5
‑
6.5min，28％B；6.5
‑
12min， 28％
‑
60％B；12
‑
13.5min，60％B；13.5
‑
18min，60％
‑
100％B；18
‑
25min，100％B。
[0019]质谱分析条件：ESI正负离子模式；MS扫描范围：100
‑
1200；MSMS扫描范围：50
‑
1200；源参数：扫描类型：TOF；源温度：550℃；去簇电压： 90V；气源1气压：50psi；气源2气压：50psi；幕帘气压：35psi；离子喷雾电压：5500V/
‑
4500V；碰撞能量：10V(MS模式)、35V/
‑
35V(MSMS 模式)；碰撞分散能量15V(MSMS模式)。
[0020]表1山豆根提取物中的化学成分
[0021][0022][0023][0024][0025][0026][0027][0028]本专利技术提供的山豆根水提取物具有下述特点：
[0029]1.本专利技术提供一种山豆根水提取物的制备法，经过蒸馏水回流提取，回流提取后收集提取液，进行冻干。经检测后，得到槐醇、氧化苦参碱、槐苷等147种成分，优势明显，分析结果清晰明确。
[0030]2.本专利技术应用SCIEX ExionLC
TM AC液相色谱联合SCIEX Triple TOF 5600质谱系统对山豆根提取物进行分析，来获取其水提取物的色谱图轮廓。此方法包括山豆根会提取物的UPLC
‑
MS分析条件，本专利技术的色谱图可用于验证山豆根水提取物的成分。本专利技术首次提出山豆根的水提取物来增加脑内纹状体多巴胺，治疗帕金森病症。经过小鼠体内实验，发现本专利技术提供的山豆根水提取物确实对增加纹状体多巴胺有明显作用。
[0031]3.本专利技术方法设计比较稳定、合理，操作简便，有较强的实用作用。
[0032]4.有望获得更安全、有效治疗帕金森模型的新药。
附图说明：
[0033]图1为山豆根的水提取物的色谱图轮廓(A:正离子模式B:负离子模式)。
具体实施方案：
[0034]实施例1：山豆根的水提取物
[0035]取山豆2000g，粉碎成粗粉。加入10倍量的蒸馏水进行回流提取，总共提取3次，每次2个小时，合并提取液，进行冻干，得到冻干粉，其得率为 13.21％。
[0036]实施例2：山豆根的水提取物治疗帕金森氏病试验
[0037]1.实验材料：
[0038]a.动物：18只雄性C57/BL6小鼠(20
‑
25g)购自中国医学科学院放射医学研究所，许可证号：SYXK(津)2019
‑
0002；
[0039]b.药物：30mg/kg 1
‑
甲基
‑4‑
苯基
‑
1,2,3,6
‑
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种山豆根的水提取法，其特征在于：由以下步骤组成：a.取山豆根2000g，粉碎成粗粉；b.使用使用10倍量的蒸馏水进行回流提取，总共提取3次，每次2个小时；c.合并提取液，进行冻干，得到冻干粉。2.如权利要求1所述的山豆根的水提取方法，其特征在于步骤b中，使用10倍量的蒸...

【专利技术属性】
技术研发人员：李煦照，
申请(专利权)人：贵州中医药大学，
类型：发明
国别省市：