一种微环游离表达载体及其构建方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种微环游离表达载体及其构建方法和应用，该载体含有噬菌体整合酶基因、Ｉ－ＳｃｅＩ基因及酶切位点、人源性的ＭＡＲ序列及ａｔｔＢ和ａｔｔＰ位点；其构建方法是首先构建含整合酶基因和Ｉ－ＳｃｅＩ基因的载体ｐＥＴ－及含人源性的ＭＡＲ序列的载体ｐｃＤＮＡＭ，然后将ｐｃＤＮＡＭ载体上的目的片段再克隆到ｐＥＴ－载体中构建成微环游离表达载体ｐＥＭＷ；其应用体现在基因治疗及基因工程方面。本发明专利技术的载体能在宿主菌内完成微环载体的重组过程，消除原核质粒元件；还可游离于宿主细胞基因组ＤＮＡ之外稳定持久的表达外源基因；利用本发明专利技术的表达载体可以成功地在各种人类及动物细胞中高效表达外源基因。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种微环游离表达载体，其特征在于：所述载体是在真核表达载体上引入链霉菌噬菌体φｃ３１整合酶基因、内切酶Ⅰ－ＳｃｅⅠ基因、Ⅰ－ＳｃｅⅠ酶切位点、人源性的ＭＡＲ序列及链霉菌基因组ａｔｔＢ和链霉菌噬菌体ａｔｔＰ位点构建而成的重组质粒载体。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王天云，王小引，石如玲，董玉珍，杨磊，韩忠敏，张靖，林艳，
申请(专利权)人：新乡医学院，
类型：发明
国别省市：41[中国|河南]