本发明专利技术涉及一种注射用大豆卵磷脂的制备工艺。以大豆磷脂为原料，先经丙酮脱油、膜分离、吸附脱色等过程获得粗卵磷脂，然后将粗卵磷脂采用柱色谱分离、过滤除菌、减压浓缩及真空干燥即得注射用大豆卵磷脂。本发明专利技术采用膜分离代替传统的溶剂萃取，操作简单。以带有表面羟基的极性化合物为固定相，先用弱极性溶剂与强极性溶剂组成的混合溶剂作洗脱剂进行梯度洗脱，待脑磷脂全部流出后，改用强极性溶剂为洗脱剂，不仅分离选择性高，大大减少了洗脱剂用量，而且卵磷脂的提取率高，产品质量稳定，便于工业化大规模生产。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及从大豆磷脂中提取高纯度卵磷脂，尤其涉及一种从大豆磷脂中提取一种注射用大豆卵磷脂的制备工艺。
技术介绍
卵磷脂是构成人体生物膜的重要物质，在维持生物膜的生理活性和机体的正常代 谢方面起关键作用。它具有防止动脉硬化、改善神经组织、提高大脑活力的作用，被誉为"细 胞的保护神"和"血管的清道夫"。又由于卵磷脂分子中含磷酸根、胆碱基的极性端，具有亲 水性，由碳氢键组成的非极性端，具有亲脂性，这种独特的物化特性和生理活性使其在制药 工业中有着十分重要的应用价值。目前，高纯卵磷脂在医药工业中的最大用途是制备高能 量的肠外营养液——脂肪乳输液和制成脂质体作为各种抗癌药物的载体。随着脂肪乳产品 市场每年以15 %的速度增长，供注射用的卵磷脂需求量也不断增长，而我国供注射用的卵 磷脂主要依赖从欧、美等地区大量进口。因此，如何制备供注射用的卵磷脂及实现其工业化 生产是一项热门的研究课题，具有显著的经济和社会意义。 卵磷脂广泛存在于蛋黄和大豆中，尽管蛋黄中卵磷脂含量比大豆中要高，但工业 上成功从蛋黄中提取高纯卵磷脂难度较大，而且成本较高。我国是世界上大豆主产国之一， 大豆油脚资源十分丰富，这些油脚如不及时处理，极易滋生微生物而造成环境污染，若能从 大豆油脚中提取出大豆磷脂，加以利用，则可变废为宝，制备出高附加值的大豆卵磷脂产 品。因此，与蛋黄卵磷脂相比，从大豆油脚中提取卵磷脂产品具有原料来源广泛、价格低廉， 而且大豆卵磷脂中含有较少的胆固醇。以大豆油脚经浓縮脱水后的大豆磷脂为原料，从中 提取可供注射用的高纯卵磷脂，不仅可大大降低成本，而且稳定性好，可减少进口量。 目前，卵磷脂的精制方法主要有溶剂萃取法、柱层析法和超临界流体萃取法。采用 传统的溶剂萃取法得到的卵磷脂产品纯度低，溶剂用量大，且质量差，远不能达到注射级要 求；超临界流体萃取法，多采用C02作萃取剂，由于其对卵磷脂的溶解能力差，不利于对各磷 脂的分离，而且设备昂贵；柱层析法利用各组分磷脂在一定吸附剂上吸附能力的差异，通过 淋洗可使各组分磷脂得到很好的分离，并且操作简单，设备费用低，易于工业化生产，工业 柱层析技术在石油化工高纯对二甲苯生产中已得到广泛应用。大多数文献报道的注射用大 豆卵磷脂制备方法中，得到的卵磷脂纯度只能达到80%左右，且其他一些质量指标也达不到要求，仅适用于口服。作为供人体注射用的卵磷脂，其质量要求比较严格，必须符合药用 注射剂标准，如酸值、碘值、过氧化值、重金属含量、残留溶剂、微生物限度等。此外，在现有 柱层析技术中，固定相多为硅胶和氧化铝，洗脱剂为甲醇、氯仿与甲醇的混合溶剂或乙醇， 且多采用等度洗脱。这些技术虽然得到的卵磷脂纯度较高，但洗脱剂用量太大，洗脱时间 长，高纯卵磷脂的回收率低。此外，采用氧化铝作固定相后不能进行再生，而且在柱层析中 会生成溶血性磷脂，影响产品质量。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种可供注射用的大豆卵磷脂制备工艺，以大豆磷脂为原 料，采用膜分离与柱色谱技术相结合的工艺制备注射用大豆卵磷脂。本专利技术的技术方案为一种注射用大豆卵磷脂的制备工艺，其具体步骤如下 A.丙酮脱油将大豆磷脂与丙酮按质量比为1 : 1 20进行混合，脱油处理，得 丙酮不溶物； B.膜分离将步骤A得到的丙酮不溶物用烷烃与Q C4醇的混合溶剂进行溶解， 然后将所得溶液通过超滤膜，得到渗透液； C.吸附脱色向步骤B得到的渗透液中加入占渗透液质量2% 30%的吸附剂， 充分搅拌吸附处理，过滤，滤液经减压浓縮、真空干燥后即得粗卵磷脂； D.柱色谱分离以带有表面羟基的极性化合物为固定相，用弱极性溶剂浸泡后湿法装柱，称取占固定相质量2% 10%的步骤(:得到的粗卵磷脂，用3 10倍粗磷脂质量的弱极性溶剂溶解后上样，先用弱极性溶剂与强极性溶剂组成的混合溶剂进行洗脱，待脑磷脂全部流出后，改用强极性溶剂作洗脱剂；收集液经HPLC检测后，将纯卵磷脂收集液合并； E.过滤除菌、真空浓縮将步骤D得到的纯卵磷脂收集液用除菌板加滤纸过滤后，再减压浓縮、真空干燥，即得注射用卵磷脂产品。 所述大豆磷脂优选为大豆浓縮磷脂或大豆粉末磷脂。 本专利技术所用的烷烃为正己烷或氯仿；所述的Q c;醇为乙醇、甲醇、丙醇、异丙醇、丁醇或异丁醇中的一种；步骤B中混合溶剂中烷烃与Q (；醇的质量比为1 : 1 20;所 述的超滤膜优选为聚丙烯腈膜、聚砜膜、聚偏氟乙烯或聚酰胺膜中的一种；膜的截留分子量 为1000 25000，膜分离的压力为0. 2 lMPa。 优选步骤C中的吸附剂为活性氧化铝、活性炭或活性白土中的一种；优选步骤D 中的弱极性溶剂为二氯甲烷、氯仿或正己烷；强极性溶剂为甲醇或乙醇；混合溶剂中弱极 性溶剂与强极性溶剂的体积比为1 : 0.2 10;色谱柱为玻璃或不锈钢层析柱，长径比为 15 45 : 1 ;固定相为带有表面羟基的极性化合物，优选为硅胶、硅藻土或凹凸棒土中的一 种；固定相粒度为100 500目，所用固定相体积为柱体积的30% 85%;洗脱剂总体积为 固定相介质体积的3 8倍。 优选步骤A中脱油温度为5 45°C，脱油处理次数为2 6次；步骤C中搅拌吸 附处理温度为25 5(TC下，搅拌吸附处理时间为20 150min ;步骤D中用弱极性溶剂与 强极性溶剂组成的混合溶剂进行洗脱，流速控制在0. 6 4. 8ml/min ;改用强极性溶剂作洗 脱剂，流速控制在1. 2 15. Oml/min ;所述的步骤E中真空干燥的温度为20 6(TC，压力 为0. 001 0. 02MPa，时间为6 24h。 优选步骤A中的丙酮脱油每次处理时间为30 120min。 本专利技术所得注射用大豆卵磷脂产品的特征在于磷脂酰胆碱含量^ 87%，酸值 《3，碘值90 110，溶血磷脂酰胆碱《3. 0%， a -生育酚《6. 5%，过氧化值《10，水分 《2. 0%，游离脂肪酸《0. 5%，残留溶剂《0. 5%，磷脂酰乙醇胺《1. 0%，重金属《10卯m， 砷含量《2卯m， lg卵磷脂中细菌数《50个，霉菌和酵母菌《50个，大肠杆菌为0。 有益效果 (1)本专利技术提出的工艺将膜分离与柱色谱技术相结合，使产品纯度得到了较大的提高，而且原料来源丰富，价格低廉，卵磷脂的提取率高。 (2)本专利技术中所有的提取与分离过程均在低温下进行，产品质量稳定，最后经过除 菌及真空干燥，以保证产品符合注射用标准。附图说明 附图1为本专利技术的工艺流程框图。具体实施方式 实施例1 取大豆浓縮磷脂100g，先用300g的丙酮于4(TC下脱油处理3次，每次30min，过 滤，丙酮不溶物中加入300g的正己烷与100g的异丙醇混合溶剂使其溶解。将混合溶液在 温度为25t:，压力为0. 38MPa的压力下通过截留分子量为15000的聚丙烯腈膜，得到渗透 液。向渗透液中加入6. 4g的活性氧化铝于35t:下吸附处理60min，过滤，滤液经减压浓縮、 真空干燥得粗卵磷脂。经HPLC分析，粗卵磷脂中磷脂酰胆碱含量为53. 2% 。 取120g硅胶(100 200目)用氯仿浸泡后，装入小25mmX900mm的玻璃层析柱， 称取4.5g粗卵磷脂用37g的氯仿溶解后上样，先用400ml的2 : l氯仿/甲醇冲洗，流速 控制在本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种注射用大豆卵磷脂的制备工艺，其具体步骤如下： Ａ．丙酮脱油：将大豆磷脂与丙酮按质量比为１∶１～２０进行混合，脱油处理，得丙酮不溶物； Ｂ．膜分离：将步骤Ａ得到的丙酮不溶物用烷烃与Ｃ↓［１］～Ｃ↓［４］醇的混合溶剂进行溶解，然后将所得溶液通过超滤膜，得到渗透液； Ｃ．吸附脱色：向步骤Ｂ得到的渗透液中加入占渗透液质量２％～３０％的吸附剂，充分搅拌吸附处理，过滤，滤液经减压浓缩、真空干燥后即得粗卵磷脂； Ｄ．柱色谱分离：以带有表面羟基的极性化合物为固定相，用弱极性溶剂浸泡后湿法装柱，称取占固定相质量２％～１０％的步骤Ｃ得到的粗卵磷脂，用３～１０倍粗磷脂质量的弱极性溶剂溶解后上样，先用弱极性溶剂与强极性溶剂组成的混合溶剂进行洗脱，待脑磷脂全部流出后，改用强极性溶剂作洗脱剂；收集液经ＨＰＬＣ检测后，将纯卵磷脂收集液合并； Ｅ．过滤除菌、真空浓缩：将步骤Ｄ得到的纯卵磷脂收集液用除菌板加滤纸过滤后，再减压浓缩、真空干燥，即得注射用卵磷脂产品。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：管国锋，吴仁荣，杨操，高正松，万辉，郁丽薇，
申请(专利权)人：南京工业大学，南京威尔化工有限公司，
类型：发明
国别省市：84[中国|南京]
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