一种多肽、多肽水凝胶及其制备与应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程领域，提供了一种多肽，序列为NH2‑

【技术实现步骤摘要】
一种多肽、多肽水凝胶及其制备与应用


[0001]本专利技术涉及生物工程领域，尤其涉及一种多肽、多肽水凝胶及其制备与应用。

技术介绍

[0002]桑葚为桑科植物桑树的成熟果穗，其营养丰富，含水量高达80％，同时还富含矿物质、维生素、糖类和黄酮类等多种营养物质。其中，花青素是桑葚的主要活性物质之一。
[0003]花青素(Anthocyanidin)是一种无毒的天然色素，相关研究已表明其在抗癌、抗氧化、抗病毒、抗过敏、抗糖尿病和降低血糖等方面具有重要作用，且已被广泛应用于食品、药品、保健食品等领域方面，具有极高的研究价值。然而，花青素在食品工业中的应用由于“其在产品加工和储存过程中对物理和化学因素的不稳定性”而受到损害。pH、温度、金属离子及光照等环境因素都会影响水溶液中“花青素的稳定性”，导致花青素易被降解为褐色或无色的降解产物，严重影响其产品的外观(色泽、澄清度)和品质。由此，“如何提高花青素等天然色素的稳定性”成为限制花青素等天然色素拓展应用的主要限制之一，所以通过封装方法将花青素封装到不同的载体内成为“提升花青素稳定性”的主要研究方向。
[0004]目前为止，“花青素酰化”可以提高花青素稳定性，但不可避免地造成其化学性质的改变；“共色素法”可以延长花青素的保质期，但通过该方法处理后的花青素仍容易受到pH和温度变化的影响；“花青素和金属离子形成络合物”同样可以增强花青素的稳定性，但是却引入了金属离子对食用造成了一定的影响。由此，开发新型高效、安全、稳定的花青素附载体是产学两界长期关注的方向。
[0005]多肽作为一类生物内源性分子，具有较高的生物相容性和低细胞毒性，无明显有害代谢产物。多肽水凝胶是一类很有前途的生物材料，由于其制作成本低，操作简便，被广泛应用于细胞培养等生物医学工程和活性分子附载等领域。得益于氨基酸分子的多样性，合理设计的多肽分子可形成具有附载能力的水凝胶材料，实现花青素等多种天然活性分子的有效附载，提高其稳定性、生物利用度等生物物理化学性质，为增强花青素稳定性提供了新的方向。

技术实现思路

[0006]本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种多肽、多肽水凝胶及其制备与应用；其中，基于四种不同序列的多肽水凝胶，均可用于高效附载花青素等天然活性分子并提高其稳定性。
[0007]本专利技术采用以下技术方案解决上述技术问题：
[0008]一种多肽，所述多肽的序列为NH2‑
MAAAAAA、Fmoc
‑
MAAAAAA、NH2‑
MMAAAAAA或Fmoc
‑
MMAAAAAA；其中，A为L
‑
丙氨酸(Ala)，M为L
‑
甲硫氨酸(Met)，Fmoc为9
‑
芴甲氧羰基。
[0009]一种多肽水凝胶，包括序列如NH2‑
MAAAAAA、Fmoc
‑
MAAAAAA、NH2‑
MMAAAAAA或Fmoc
‑
MMAAAAAA所示的多肽形成的多肽水凝胶。
[0010]一种上述多肽水凝胶的制备方法，在所述多肽中加入纯乙腈或75％乙腈，然后超
声处理，自主形成对应多肽水凝胶。
[0011]作为本专利技术的优选方式之一，对于序列如NH2‑
MAAAAAA、Fmoc
‑
MAAAAAA所示的多肽，通过加入75％乙腈成胶；对于序列如NH2‑
MMAAAAAA、Fmoc
‑
MMAAAAAA所示的多肽，通过加入纯乙腈成胶。
[0012]作为本专利技术的优选方式之一，在所述多肽中加入纯乙腈或75％乙腈后，37℃超声5min，自主形成水凝胶。
[0013]一种上述多肽水凝胶的应用，将所述多肽水凝胶作为附载材料，在附载天然活性分子中的应用。其中，天然活性分子包括但不限于于花青素。
[0014]作为本专利技术的优选方式之一，先将多肽粉末和天然活性分子材料混合，随后加入纯乙腈或75％乙腈，并做超声处理，最终形成的多肽水凝胶将所述天然活性分子稳定附载于其中。
[0015]本专利技术相比现有技术的优点在于：
[0016](1)本专利技术多肽水凝胶是一种可以将花青素等天然活性分子有效附载于其中、且提高花青素稳定性的附载材料，其能够简便快速附载形成花青素水凝胶的同时，提高其热稳定性、金属离子稳定性和pH稳定性，为多肽水凝胶载药提供了新的参考方向；
[0017](2)本专利技术多肽水凝胶的制备简便，且能快速成胶，有益于解决现有水凝胶载药成胶缓慢和成胶条件苛刻的问题。
附图说明
[0018]图1为多肽水凝胶的扫描电镜图SEM微观表征图(图中，a图为NM多肽水凝胶；b图为NMM多肽水凝胶；c图为FM多肽水凝胶；d图为FMM多肽水凝胶；表明多肽水凝胶形成了三维网状的微观结构)；
[0019]图2为多肽水凝胶扫描振幅和频率振幅的流变图(图中，a图为扫描振幅；b图为频率振幅；多肽水凝胶表现出弹性固体的流变特性，表明形成了刚性凝胶网络)；
[0020]图3为多肽水凝胶与新鲜小鼠血细胞孵育后的照片(图中，a图为SDS阳性对照组；b图为NM多肽水凝胶；c图为NMM多肽水凝胶；d图为FM多肽水凝胶；e图为FMM多肽水凝胶；表明多肽水凝胶具有较高的生物相容性和低溶血毒性)；
[0021]图4为通过MTT法验证多肽水凝胶的细胞毒性结果图；
[0022]图5为附载花青素前后四种多肽水凝胶的形貌图；
[0023]图6为附载花青素前后四种多肽水凝胶的显微镜图；
[0024]图7为附载花青素前后四种多肽水凝胶的傅里叶红外光谱图；
[0025]图8为四种多肽水凝胶附载花青素后的倒置荧光显微成像图；
[0026]图9为多肽水凝胶提高花青素分子稳定性的实验结果图(图中，a图为热稳定性结果；b图为金属离子稳定性结果；c图为pH稳定结果)。
具体实施方式
[0027]下面对本专利技术的实施例作详细说明，本实施例在以本专利技术技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。
[0028]实施例1
[0029]Fmoc
‑
MMAAAAAA(简写为“FMM”)多肽水凝胶的合成与制备：
[0030]1、FMM多肽分子的合成：
[0031](1)多肽固相合成：称取Rink amide MBHA树脂于接肽管中，加入N，N
‑
二甲基甲酰胺(DMF)，鼓氮气溶胀40min。加入50％(v/v)吗啡啉的N,N
‑
二甲基酰胺(DMF)溶液，鼓氮气40min，脱去Fmoc保护基团。用DMF和DCM交替洗涤树脂3次,每次1min，将配好的Fmoc
‑
Ala
‑
OH(5eq，0.4M,DMF)溶液，2
‑
(7
‑
偶氮苯并三氮唑)
‑
N，N本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种多肽，其特征在于，所述多肽的序列为NH2‑
MAAAAAA、Fmoc
‑
MAAAAAA、NH2‑
MMAAAAAA或Fmoc
‑
MMAAAAAA。2.一种多肽水凝胶，其特征在于，包括序列如NH2‑
MAAAAAA、Fmoc
‑
MAAAAAA、NH2‑
MMAAAAAA或Fmoc
‑
MMAAAAAA所示的多肽形成的多肽水凝胶。3.一种如权利要求2所述的多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，在所述多肽中加入纯乙腈或75％乙腈，然后超声处理，自主形成对应多肽水凝胶。4.根据权利要求3所述的多肽水凝胶的制备方法，其特征在于，对于序列如NH2‑<...

【专利技术属性】
技术研发人员：李文君，杨文宇，林李芳洲，
申请(专利权)人：西华大学，
类型：发明
国别省市：