非蛋白稳定的梭菌毒素药物组合物制造技术

一种梭菌毒素药物组合物，包括诸如肉毒毒素的梭菌毒素，其中存在于药物组合物中的梭菌毒素被非蛋白赋形剂稳定，所述的赋形剂例如聚乙烯吡咯烷酮、二糖、三糖、多糖、醇、金属、氨基酸、表面活性剂和／或聚乙二醇。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及梭菌毒素药物组合物。具体地说，本专利技术涉及含有非 蛋白赋形剂的梭菌毒素药物组合物，所述非蛋白赋形剂的作用是使存 在于药物组合物中的梭菌毒素(例如肉毒毒素)稳定。
技术介绍
药物组合物是一种如下的制剂，它含有至少一种活性成分(例如梭 菌毒素)，还含有例如一种或多种赋形剂、緩冲剂、载体、稳定剂、防 腐剂和/或填充剂，并且适用于向患者给药以达到期望的诊断结果或治疗 效果。本文中公开的药物组合物具有诊断、治疗和/或研究的用途。为达到稳定储存和处理方便，药物组合物可以被制成冻干的(即冷 冻千燥的)或真空干燥的粉剂，该粉剂可在向患者给药前用适合的液体 复水，例如用生理盐水或水复水。另外，该药物组合物可被制成水溶液 或悬浮液。药物组合物可以含有具有蛋白质性质的活性成分。不幸的是， 蛋白质活性成分非常难于稳定(即维持在一种生物活性损失最小的状 态)，因此导致含蛋白质的药物组合物在制备、复水(如需要)期间和 使用前的保存期内损失蛋白质和/或损失蛋白质的活性。稳定性的问题是 由于蛋白质变性、降解、二聚化和/或聚合而发生。多种赋形剂，例如白 蛋白和明胶，已被用于尝试并稳定存在于药物组合物中的活性成分，并 已获得不同程度的成功。此外，例如乙醇之类的防冻剂已被用于减少在冻干法的冷冻条件下的蛋白质变性。 蛋白质赋形剂多种蛋白质，例如白蛋白和明胶已被用于稳定存在于一种药物组合 物中的肉毒毒素。白蛋白是小且大量的血浆蛋白质。人血清白蛋白的分子量约为69千道尔顿(kD)，已被作为非活性成分用于药物组合物 中，并在其中作为存在于药物组合物中的某些蛋白质活性成分的大载 体(bulk carrier)和稳、定剂。白蛋白在药物组合物中的稳定功能可体现在药物组合物的多步制 备中和之后的所制备药物组合物的复水时。因此，白蛋白可通过以下 方式赋予药物组合物中具有蛋白质性质的活性成分稳定性例如(1) 降低蛋白质活性成分与表面(例如实验玻璃器皿、导管的表面)、药 物组合物复水的药水瓶和用于注射药物组合物的注射器内表面间的粘 着力(通常被称为"粘性，，)。蛋白质活性成分粘附到表面会导致活 性成分的损失和剩余蛋白质活性成分的变性，两者都会降低存在于药 物组合物中的活性成分的总活性，以及；(2)降低在制备活性成分的 低稀释溶液时发生的活性成分的变性。除了能够使药物组合物中的蛋白质活性成分稳定以外，人血清白 蛋白在注射入病人体内时还具有通常可忽略免疫原性的优点。 一种具致过敏反应和;或抗药性的/生，使得含有免疫原性组分的药物组合物 可能难以治愈所要治疗的疾病或障碍。重组白蛋白曾被提出作为肉毒毒素药物组合物中的稳定剂。因此， 已出版的申请号为2003 0118598 ( Hunt )的美国专利申请中公开了多 种赋形剂一例如重组白蛋白、胶原蛋白或淀粉一用于稳定存在于药物 组合物中的肉毒毒素的用途。胶原蛋白是哺乳动物中最丰富的蛋白质，约占体内所有蛋白质的 四分之一，并且是结締组织(例如皮肤、韧带和腱)的主要组分。天 然的胶原蛋白是三个高分子量蛋白质的三螺旋。组成胶原蛋白螺旋的 三条蛋白质链的每一条都含有多于1400个氨基酸。在人体中已识别出 至少二十五种不同类型的胶原蛋白。胶原蛋白在美容学上已被用作治疗皮肤轮廓问题的一种填充材料，例如用于平滑笑紋和皱紋，眉间紋、眼角紋和嘴唇上下的细小的 垂直紋。胶原蛋白还可用于平滑某些术后外伤或痤疮疤痕，以及病毒 痘痕、例如水痘痘痕。为达到这些目的，胶原蛋白被注射进真皮以垫尚皮狭。明胶可通过胶原蛋白的水解得到。明胶已被用于一些蛋白质活性 成分药物组合物中作为白蛋白的替代物。值得注意的是，明胶是一种 来源于动物的蛋白质，因此具有与人血清白蛋白相同的潜在的易感染性风险。中国专利CN 1215084中讨论了由天然明胶(一种胶原蛋白水 解物)、动物来源的蛋白质、葡聚糖和蔗糖制得的无白蛋白的A型肉 毒毒素。美国专利No. 6， 087， 327中还公开了 一种由天然明胶制得的A 型和B型肉毒毒素的组合物。不幸的是，虽然已知蛋白质赋形剂例如白蛋白或明胶具有稳定作 用，但是在药物组合物中使用它们具有明显的缺陷。例如白蛋白和明 胶价格昂贵且越来越难以获得。此外，当用血液制品或来源于动物的 产品(例如白蛋白和明胶)向患者给药时，会使患者处于获得血液传 播的病原菌或感染剂的潜在风险中。因此，已知存在这样的可能性， 即在药物组合物中含有来源于动物的蛋白质赋形剂会导致不慎将感染 成分掺入药物组合物。例如，已经报道过使用人血清白蛋白会将朊病 毒传到药物组合物中。朊病毒是一种具有蛋白质性质的感染颗粒，它 被假设是由产生正常蛋白质的相同核酸序列产生的异常构型的同种 型。也有进一步假设认为感染性存在于翻译后水平上正常同种型蛋白 质对朊病毒同种型的"募集反应(recruitment reaction)"中。显 然，正常的内生细胞蛋白质被诱导而错误折叠成一个致病的朊病毒构 型。因此，人们期望能够找到 一种适合的可用于使存在于肉毒毒素药 物组合物中的肉毒毒素稳定的赋形剂。优选地，所述肉毒毒素稳定剂 不是来源于动物(即哺乳动物)源的蛋白质。肉毒毒素梭状芽孢杆菌属("M"/V/w/z7)根据形态和功能分类包括有127 个以上的菌种。革兰氏阳性厌氧菌肉毒梭菌(67ay"/V/w/z/ ^^//77z/yz/)产生强力的多肽神经毒素——肉毒毒素，它引起人或动物的神经性麻痹疾病，称为肉毒中毒。肉毒梭菌及其芽孢通常存在于 土壤中，并且该细菌能生长在家庭罐头工厂未适当消毒和封口的食物 容器内，这是许多肉毒中毒病例的原因。肉毒中毒现象通常出现在食用肉毒梭菌培养物或芽孢污染的食物后18到36小时。肉毒毒素能毫 无削弱地明显穿过肠道壁并攻击外周运动神经元。肉毒毒素中毒的症 状逐渐从行走、吞咽、说话困难发展到呼吸肌麻痹和死亡。A型肉毒毒素是人类所知最致命的天然生物毒素。A型肉毒毒素 (纯化的神经毒素复合物)对小鼠的LDso约是50皮克。有趣的是， 在摩尔单位基础上，A型肉毒毒素的致死力比白喉强18亿倍，比氰 化钠强6亿倍，比眼镜蛇毒素强约3000万倍，比霍乱强约1200万倍。 Singh， Cr/〃ca/ J577ec" Aa"er/a/ /Vofe//7 7bu./751， Natural Toxins II的63至84页(第四章)，B. R. Singh et al.主编，Plenum Press, New York (1976)(其中才吏正了所称的A型肉毒毒素的LD5。 为0. 3ng等于1U的说法，因为实际上1U约等于0. 05ng BOTOX )。 肉毒毒素一个单位(U)的定义是腹膜内注射每只重18到20克的雌 性Swiss Webster小鼠得到的LD5。。也就是说， 一单位的肉毒毒素是 杀死一组雌性Swiss Webster小鼠中的50%所用的肉毒毒素的量。七 种通常在免疫学上不同的肉毒神经毒素已经被鉴定，它们分别是血清 型为A、 B、 d、 D、 E、 F和G的肉毒神经毒素，每种都通过与类型特 异性抗体的中和来辨别。肉毒毒素的不同血清型在感染的动物种类和 所引起的麻痹的严重程度和持续时间方面有所不同。例如，已经证实， 通过用在大鼠中产生麻痹的速率测本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种药物组合物，包括：　　　　（ａ）肉毒毒素，以及；　　　　（ｂ）聚乙烯吡咯烷酮。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：TJ亨特，
申请(专利权)人：阿勒根公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]