抗-VISTA（B7H5）抗体制造技术

本发明专利技术涉及抗

【技术实现步骤摘要】
抗
‑
VISTA(B7H5)抗体
[0001]本申请是分案申请，其原申请的国际申请号为PCT/IB2017/000100，中国国家申请号为201780016401.8，申请日为2017年2月10日，专利技术名称为“抗
‑
VISTA(B7H5)抗体”。
[0002]相关申请
[0003]此申请要求于2016年2月12日提交的美国临时申请号62/294,922的权益。上文申请案的全部教示内容是以引用方式并入本文中。


[0004]本专利技术涉及抗
‑
VISTA(B7H5)抗体。

技术介绍

[0005]通过肿瘤微环境中癌细胞或免疫细胞的负免疫调节剂的表达可以抑制宿主对肿瘤的免疫应答。为了有效地对抗癌症，期望阻断肿瘤介导的宿主免疫应答的抑制。因此，需要抑制肿瘤微环境中的负免疫调节剂的新的和有效的治疗剂，所述负免疫调节剂抑制抗肿瘤免疫应答。

技术实现思路

[0006]在一个实施例中，本专利技术提供了诱导受试者中生物应答的方法。该方法包括向受试者施用足以引起受试者中生物应答的量的结合T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)蛋白的抗体或其抗原结合片段。在某些实施例中，所述生物应答选自下组，该组由以下组成：循环免疫细胞数量的减少；骨髓和脾中粒细胞数量的减少；肿瘤微环境(TME)中嗜中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞或其组合的数量的增加；以及一种或多种细胞因子(如趋化因子)的水平增加；或这些应答的任何组合。在一个具体实施例中，结合VISTA的抗体或其抗原结合片段包含与免疫细胞(例如，NK细胞)上的Fc受体(例如，CD16受体)结合的Fc区。
[0007]在另一个实施例中，本专利技术提供了鉴定结合T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)蛋白并引起生物应答的抗体的方法。该方法包括以下步骤：向细胞、组织、器官或生物体提供结合VISTA或其抗体片段的抗体，并确定该抗体或其抗体片段是否在细胞、组织、器官或生物体中引起生物应答。在某些实施例中，所述生物应答选自下组，该组由以下组成：单核细胞的活化；T细胞的活化；循环免疫细胞数量的减少；骨髓和脾中粒细胞数量的减少；肿瘤微环境中中性粒细胞、巨噬细胞或两者的数量的增加；以及一种或多种细胞因子的水平增加；或这些应答的任何组合。在一个具体实施例中，结合VISTA的抗体或其抗原结合片段包含与免疫细胞(例如，NK细胞)上的Fc受体(例如，CD16受体)结合的Fc区。
[0008]本专利技术的方法可用于，例如，表征结合VISTA蛋白的抗体和筛选候选抗VISTA抗体以获得与潜在治疗功效相关的生物学活性。
附图说明
[0009]本专利或申请文件含有至少一幅彩色附图。在请求并支付必要的费用后，官方将
会提供带有彩色附图的本专利或专利申请公开物的副本。
[0010]图1A
‑
图1C：图表显示TF
‑
1AML细胞上VISTA表达通过流式细胞术的VISTA蛋白质的表达显示在TF
‑
1AML细胞系中。
[0011]图2A
‑
图2E：图表显示用于鉴定人类骨髓和淋巴亚组的染色和门控策略。
[0012]图3A
‑
图3G：图表显示来自一个健康正常供体的人类骨髓和淋巴亚组上VISTA的表达。
[0013]图4：图表显示在多个健康正常供体的人类骨髓和淋巴亚组上VISTA的表达。
[0014]图5A
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图5B：图表显示用于鉴定人单核细胞和巨噬细胞上VISTA表达的染色和门控策略。
[0015]图6A
‑
图6C：图表显示在人单核细胞和巨噬细胞上VISTA的表达。
[0016]图7A
‑
图7E：图表显示用于鉴定人T细胞和NK细胞亚组上VISTA表达的染色和门控策略。
[0017]图8A
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图8G：图表显示来自一个健康正常供体的人类T细胞和NK细胞亚组上VISTA的表达。
[0018]图9：图表显示在多个健康正常供体的人类T细胞和NK细胞亚组上VISTA的表达。
[0019]图10A
‑
图10D：图表显示用于鉴定人树突细胞亚组上VISTA表达的染色和门控策略。
[0020]图11A
‑
图11C：图表显示来自一个健康正常供体的人类树突细胞亚群和嗜碱性粒细胞上VISTA的表达。
[0021]图12：图表显示在多个健康正常供体的人类树突细胞亚群和嗜碱性粒细胞上VISTA的表达。
[0022]图13A
‑
图13D：VISTA在健康人外周血细胞中的表达的分析。使用多色流式细胞术分析VISTA在健康人外周血细胞上的表达谱：分析来自2个不同个体的全血样品在单核细胞(SSC
lo,
CD11b
hi
CD14
hi
CD16
‑
ve
CD33
+ve
HLA
‑
DR
+ve
CD19
‑
ve
)(图13A)和中性粒细胞(SSC
hi
CD177
+
CD11b
hi
CD14
lo
CD16
+ve
CD33
+ve
HLA
‑
DR
‑
ve
CD19
‑
ve
)(图13B)上VISTA的表达。使用Ficoll梯度分离外周血单核细胞以分析(图13C)CD4+T细胞(CD3
+ve
CD4
+ve
)和(图13D)CD8+T细胞(CD3
+ve
CD8
+ve
)。
[0023]图14A
‑
图14C：在肺癌患者和健康对照供体外周血细胞中的VISTA表达的分析。使用多色流式细胞术分析VISTA在肺癌患者外周血细胞上的表达谱：显示了来自一名个体的代表性FACS图(图14A)。通过Ficoll分离外周血单核细胞，并分析在(图14B)单核细胞(CD14+CD11b+CD33+HLADR+CD15
‑
)和(图14C)骨髓衍生抑制细胞(CD14
‑
CD11b+CD33
‑
HLADR
‑
CD15+CD16+)的VISTA的表达。
[0024]图15A
‑
图15C：使用多色流式细胞术分析VISTA在结肠癌患者外周血细胞上的表达谱：显示了来自一名个体的代表性FACS图(图15A)。通过Ficoll分离外周血单核细胞，并分析在(图15B)单核细胞(CD14+CD11b+CD33+HLADR+CD15
‑
)和(图15C)骨髓衍生抑制细胞(CD14
‑
CD11b+C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种在受试者中诱导生物应答的方法，所述方法包括向所述受试者施用足以引起所述受试者中生物应答的量的、结合T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)蛋白的抗体或其抗原结合片段，其中所述生物应答选自下组，该组由以下组成：a)循环免疫细胞数量的减少；b)骨髓和脾中粒细胞数量的减少；c)肿瘤微环境中嗜中性粒细胞、巨噬细胞、T细胞或其组合的数量的增加；以及d)一种或多种细胞因子的水平增加；或e)其组合。2.如权利要求1所述的方法，其中所述生物应答为循环免疫细胞数量的减少。3.如权利要求2所述的方法，其中所述循环免疫细胞是单核细胞、嗜中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞或其组合。4.如权利要求1、2或3所述的方法，其中所述循环免疫细胞数量的减少是瞬时的。5.如权利要求1所述的方法，其中所述生物应答为骨髓和脾中粒细胞数量的减少。6.如权利要求1所述的方法，其中所述生物应答为肿瘤微环境中嗜中性粒细胞、巨噬细胞或其组合的数量的增加。7.如权利要求1所述的方法，其中所述生物应答为一种或多种细胞因子的水平增加，并且其中所述一种或多种细胞因子选自下组，该组由以下组成：IL
‑
6、TNFα、MCP
‑
3、MDC、MIP
‑
1β、IP
‑
10、IL
‑
1Rα、GM
‑
CSF、IL
‑
12p70、GRO、MIP
‑
1α、IL
‑
1β、RANTES、G
‑
CSF、IL
‑
1α、IL
‑
7、IL
‑
12p40、IL
‑
13、IFNγ、TNFβ、IFNα、IL
‑
4、IL
‑
10、FGF
‑
2、分形趋化因子、VEGF、IL
‑
17、Flt3L、IL
‑
9、TGFα、IL
‑
15、EGF、PDGF
‑
αα、MCP
‑
1、IL
‑
8、sCD40L、嗜酸性粒细胞趋化因子、IL
‑
2、IL
‑
3和IL
‑
5和PDGF
‑
BB。8.如权利要求1
‑
7中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包含在免疫细胞上结合Fc受体的Fc区。9.如权利要求8所述的方法，其中所述Fc受体是CD16受体。10.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段包含抗体VH结构域，所述抗体VH结构域包含具有SEQ ID NO:25的氨基酸序列的VH CDR1、具有SEQ ID NO:26的氨基酸序列的VH CDR2和具有SEQ ID NO:27的氨基酸序列的VH CDR3，并且所述抗体或其抗原结合片段还包含抗体VL结构域，所述抗体VL结构域包含具有SEQ ID NO:28的氨基酸序列的VL CDR1、具有SEQ IDNO:29的氨基酸序列的VL CDR2和具有SEQ ID NO:30的氨基酸序列的VL CDR3。11.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。12.如权利要求11所述的方法，其中所述哺乳动物是人。13.如权利要求11所述的方法，其中所述哺乳动物是非人类灵长类动物。14.如权利要求11所述的方法，其中所述哺乳动物是啮齿动物。15.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有肿瘤。16.如前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有肺癌、膀胱癌或乳腺癌。17.一种鉴定结合T细胞活化的V结构域Ig抑制剂(VISTA)蛋白并引起生物应答的抗体的方法，所述方法包括：
a)提供将VISTA或其抗体片段结合至细胞、组织、器官或生物体的抗体；以及b)确定所述抗体或其抗体片段是否在所述细胞、组织、器官或生物体中诱导生物应答，其中所述生物应答选自下组，该组由以下组成：i)单核细胞的活化；ii)T细胞的活...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：詹森药业有限公司，
类型：发明
国别省市：