一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法技术

本发明专利技术公开了一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法，属于生物医药技术领域，该方法包括在卵类粘蛋白溶液中加入谷胱甘肽或半胱氨酸溶液诱导卵类粘蛋白去折叠，之后加糖进行糖基化反应的步骤。本发明专利技术通过两种去折叠辅助糖基化方法加工的卵类粘蛋白产物经模拟胃肠消化后，降低了卵类粘蛋白的消化稳定性，很好地解决了卵类粘蛋白耐消化问题，同时均显著提高了卵类粘蛋白产物的抗氧化活性和金属离子螯合能力，尤其是在超氧阴离子自由基清除方面提高尤为显著；并且本发明专利技术方法简单易行，大幅度提升了鸡蛋中高含量蛋白质卵类粘蛋白的抗氧化活性和亚铁离子螯合活性，为开发抗氧化药品和补铁剂提供了新的前景。发抗氧化药品和补铁剂提供了新的前景。发抗氧化药品和补铁剂提供了新的前景。

【技术实现步骤摘要】
一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法。

技术介绍

[0002]鸡蛋蛋清蛋白质含量丰富，其价格低廉，食用方便，是日常优质蛋白质的最佳来源。卵类粘蛋白是蛋清中含量最高的蛋白质之一，占蛋清中蛋白质总量的11％。由于卵类粘蛋白具有较高的溶解度，且它具有较高的热稳定性，加之其在鸡蛋中的高含量，给卵类粘蛋白相关活性物质的开发奠定了良好的基础。然而，目前对于卵类粘蛋白抗氧化活性肽的研究罕见报道，分析原因有以下两个方面：1.卵类粘蛋白(pI＝4.1)与卵白蛋白(pI＝4.3
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4.5)等电点相似，较难将其纯化，很多研究因为没有原材料不方便进行；(2)卵类粘蛋白对胰蛋白酶有一定的抑制作用，耐消化，因而针对其消化产物的研究少，消化肽活性的研究就更少。专利技术人前期工作已克服了第一个难题，通过简单的离子交换层析获得了卵类粘蛋白纯品(一种高活性卵类粘蛋白的分离方法，专利号ZL201810501744.X)。而针对如何解决卵类粘蛋白耐消化，不易生产卵类粘蛋白肽产物，以及生物活性较弱等问题，现有技术仍鲜有报道。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术方法简单易行，大幅度提升了鸡蛋中高含量蛋白质卵类粘蛋白的抗氧化活性和亚铁离子螯合活性，为开发抗氧化药品和补铁剂提供了新的前景。
[0004]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0005]本专利技术提供一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法，包括以下步骤：
[0006]在卵类粘蛋白溶液中加入谷胱甘肽或半胱氨酸溶液诱导卵类粘蛋白去折叠，之后加糖进行糖基化反应。
[0007]进一步地，所述卵类粘蛋白溶液的用量和所述谷胱甘肽或半胱氨酸溶液的用量的体积比为1：1；其中，所述卵类粘蛋白溶液的浓度为4mg/mL，所述谷胱甘肽或半胱氨酸溶液的浓度均为2mg/mL。
[0008]进一步地，所述糖为麦芽糖，所述麦芽糖与所述卵类粘蛋白的赖氨酸残基的摩尔比为10：1。
[0009]进一步地，所述糖基化反应的条件为90℃水浴反应8h。
[0010]进一步地，所述抗氧化能力包括ABTS自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基清除能力，以及FRAP抗氧化能力；所述金属离子螯合能力包括亚铁离子螯合能力。
[0011]本专利技术还提供一种如所述方法制备获得的卵类粘蛋白产物。
[0012]本专利技术还提供一种所述的卵类粘蛋白产物在制备抗氧化药品中的应用。
[0013]本专利技术还提供一种所述的卵类粘蛋白产物在制备补铁剂中的应用。
[0014]本专利技术公开了以下技术效果：
[0015]本专利技术通过两种去折叠辅助糖基化方法加工的卵类粘蛋白产物经模拟胃肠消化后，降低了卵类粘蛋白的消化稳定性，很好地解决了卵类粘蛋白耐消化问题，同时均显著提高了卵类粘蛋白产物的抗氧化活性和金属离子螯合能力，尤其是在超氧阴离子自由基清除方面提高尤为显著。
[0016]本专利技术方法简单易行，大幅度提升了鸡蛋中高含量蛋白质卵类粘蛋白的抗氧化活性和亚铁离子螯合活性，为开发抗氧化药品和补铁剂提供了新的前景。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为卵类粘蛋白模拟婴幼儿胃消化的SDS
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PAGE结果；(A)中孔道1、2、3、4依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Gsh
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gly
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OVM；(B)中孔道1、2、3、5依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Lcy
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gly
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OVM；
[0019]图2为卵类粘蛋白模拟婴幼儿胃肠消化的SDS
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PAGE结果；(A)中孔道1、2、3、4依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Gsh
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gly
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OVM；(B)中孔道1、2、3、5依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Lcy
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gly
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OVM；
[0020]图3为卵类粘蛋白模拟成人胃消化的SDS
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PAGE结果；(A)中孔道1、2、3、4依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Gsh
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gly
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OVM；(B)中孔道1、2、3、5依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Lcy
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gly
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OVM；
[0021]图4为卵类粘蛋白模拟成人胃肠消化的SDS
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PAGE结果；(A)中孔道1、2、3、4依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Gsh
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gly
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OVM；(B)中孔道1、2、3、5依次为unt
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OVM、h
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OVM、gly
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OVM和Lcy
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gly
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OVM；
[0022]图5为卵类粘蛋白消化肽的ABTS自由基清除能力；(A)Gsh
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gly
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OVM和三个对照组模拟婴幼儿胃肠消化产物的ABTS自由基清除能力；(B)Gsh
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gly
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OVM和三个对照组模拟成人胃肠消化产物的ABTS自由基清除能力；(C)Lcy
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gly
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OVM和三个对照组模拟婴幼儿胃肠消化产物的ABTS自由基清除能力；(D)Lcy
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gly
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OVM和三个对照组模拟成人胃肠消化产物的ABTS自由基清除能力；图中*：P<0.05；
[0023]图6为卵类粘蛋白消化肽的超氧阴离子自由基清除能力；(A)Gsh
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gly
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OVM和三个对照组模拟婴幼儿胃肠消化产物的超氧阴离子自由基清除能力；(B)Gsh
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种提高卵类粘蛋白的抗氧化和金属离子螯合能力的方法，其特征在于，包括以下步骤：在卵类粘蛋白溶液中加入谷胱甘肽或半胱氨酸溶液诱导卵类粘蛋白去折叠，之后加糖进行糖基化反应。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述卵类粘蛋白溶液的用量和所述谷胱甘肽或半胱氨酸溶液的用量的体积比为1：1；其中，所述卵类粘蛋白溶液的浓度为4mg/mL，所述谷胱甘肽或半胱氨酸溶液的浓度均为2mg/mL。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述糖为麦芽糖，所述麦芽糖与所述卵类粘蛋白的赖氨酸残基的摩尔比为10：1...

【专利技术属性】
技术研发人员：麻小娟，夏娴，石修权，刘俊，杨英，周荣钦，
申请(专利权)人：遵义医科大学，
类型：发明
国别省市：