用于调节纤溶酶原的方法和组合物技术

本公开提供了针对纤溶酶原的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰的或未修饰的核苷酸，并且其中所述双链或单链siRNA的至少一条链具有与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少80％序列同一性的序列。还提供了针对纤溶酶原的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰的或未修饰的核苷酸并且长度为25至35个核苷酸。siRNA分子可以如本文所述配制在脂质纳米颗粒中。脂质纳米颗粒中。脂质纳米颗粒中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节纤溶酶原的方法和组合物
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2021年2月16日提交的标题为“Inhibition of fibrinolytics to management bleeding disorders using siRNA against Plasminogen”的美国临时专利申请系列号63/149,720的权益。


[0003]本公开涉及用于靶向纤溶酶原的核酸及其药物制剂。

技术介绍

[0004]在出血病症中，患者难以形成并维持稳定的凝块。出血病症是由凝血因子，抗纤维蛋白溶解蛋白或血小板的遗传或获得性缺陷或缺陷引起的。这些疾病包括血友病A和B、冯维勒布兰德病(VWD)、血小板病症和其它罕见的出血病症。严重血友病通常用因子替代疗法的预防方案治疗，该方案包括频繁静脉注射缺失的或缺陷的因子。这引起血栓形成的高风险并且使得患者依从性困难。主要的并发症是针对输注因子的中和性抗体的出现，这使得这种治疗无效。
[0005]克服这一点的一种策略是通过使用“旁路剂”，其激活缺失的或缺陷的因子下游的凝血级联。旁路剂可用于治疗出血的活动发作，但携带血栓形成的风险，并且不适合用作长期预防。相比之下，“轻度”血友病是按需治疗，而不是预防性治疗的，因为血栓形成的风险高于出血。然而，由轻度血友病引起的出血发作常常是难以检测的，导致患者不知道内部出血，直到太迟了，导致对关节和肌肉的严重损伤。由于血友病A和B的X连锁遗传，这些疾病对女性的负担被大大低估；严重的血友病是罕见的，但是在治疗中心中高达23％的轻度血友病患者是女性，并且大约30％的血友病携带者会经历异常出血。患有出血病症的女性通常不符合可用的疗法或临床试验，因为其凝血因子水平可能太高而不能合格。然而，她们经常经历严重影响生活质量的月经过多，导致在生殖年限内进行子宫切除术，其中许多可通过适当治疗适当控制出血来避免。抗纤维蛋白溶解药物，例如氨甲环酸(TXA)，用于患有多种出血病症的患者的短期预防和急性出血。然而，由于仅3小时的短活性寿命，TXA不适于长期使用。尽管一些临床研究已经显示出长期预防的有限效果，但是这被轻度至中度的不良事件，例如恶心和胃肠窘迫所超过。
[0006]长期减少纤维蛋白溶解可能是在多种出血病症中控制出血的替代策略。用于出血的基因疗法在临床试验中，但是它们对血友病A或B是特异性的，并且这些疗法都不靶向纤维蛋白溶解。使用siRNA的基因沉默疗法已经成功地降低抗凝蛋白的表达以控制长期凝血。然而，先前由于致命的和非致命的血栓形成并发症而停止了临床试验，表明在靶向用于治疗应用的抗凝血因子方面存在主要限制。
[0007]本公开解决了现有技术中描述的一个或多个问题和/或提供了用于治疗或预防出血病症的已知方法的有用的替代方案。

技术实现思路

[0008]在一些实施方案中，本公开提供了用于改变纤溶酶原表达从而治疗和/或预防一种或多种出血病症的方法。
[0009]根据本公开的第一方面，提供了针对纤溶酶原mRNA的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰的或未修饰的核苷酸，并且其中所述双链或单链siRNA的至少一条链具有与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少80％序列同一性的序列。
[0010]根据本公开的第二方面，提供了针对纤溶酶原mRNA的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰的或未修饰的核苷酸并且长度为25至35个核苷酸。
[0011]在另一个实施方案中，所述序列的至少一条链与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少85％、90％、95％、97％的序列同一性，或基本上由这些序列中的任一个组成。
[0012]在另一个实施方案中，所述序列与SEQ ID NO:1
‑
8或21
‑
28(未修饰或修饰的人siRNA序列)中的任一个具有至少80％的序列同一性。
[0013]在另一个实施方案中，所述序列是缀合分子的一部分。在一个实施方案中，缀合物分子包含糖基团，包括但不限于GalNAc。
[0014]在另一个实施方案中，提供了包含上述实施方案的任一方面所述的双链或单链siRNA分子的脂质纳米颗粒。
[0015]在另一方面，提供了脂质纳米颗粒，其包含：用于抑制或减少纤溶酶原表达的核酸；以10mol％至85mol％存在的可电离的阳离子脂质；中性囊泡形成脂质，其选自磷脂和甘油三酯中的至少一种；甾醇；和以0.5mol％至5mol％存在的亲水性聚合物
‑
脂质缀合物。所述核酸可包含前述方面或实施方案中任一项所述的siRNA分子。
[0016]在另一个实施方案中，提供了包含上述siRNA分子或脂质纳米颗粒的药物组合物，并且其中所述药物组合物包含药学上可接受的盐和/或赋形剂。
[0017]另一个实施方案包括上述药物组合物用于在需要治疗的患者中治疗出血病症的用途。
[0018]另一个实施方案包括上述药物组合物在制备用于治疗出血病症的药物中的用途。
[0019]此外，提供了治疗患有出血病症的患者的方法，所述方法包括向需要所述治疗的患者施用上述药物组合物。
[0020]在另一个实施方案中，提供了靶向哺乳动物纤溶酶原的siRNA。在一些实施方案中，siRNA降低血友病和其它出血病症中的纤维蛋白溶解和/或控制出血。
[0021]在另一个实施方案中，本公开包括与编码纤溶酶原的mRNA相互作用并导致纤溶酶原表达降低的寡核苷酸。在一个实施方案中，所述寡核苷酸是siRNA。所述siRNA任选地包含3
’‑
突出端和/或可以是2
’‑
O
‑
甲基化的。
[0022]在另一个实施方案中，本公开包括长度为10
‑
40个核碱基的寡核苷酸，其包含总共10
‑
40个核苷酸的连续核苷酸序列，并且其中所述连续核苷酸序列被靶向以与哺乳动物mRNA序列杂交。
[0023]在另一个实施方案中，本公开提供了调节凝血的方法，所述方法包括：向有需要的受试者施用siRNA以抑制纤溶酶原的表达。
[0024]在另一个实施方案中，本公开包括选自SEQ ID NO:1
‑
20的任何一种或多种示例性siRNA序列及其双链体用于抑制纤溶酶原表达的用途。
[0025]在另一个实施方案中，本公开提供了在脂质纳米颗粒中包含siRNA的药物组合物，其中所述siRNA抑制纤溶酶原的表达。
[0026]在另一个实施方案中，本公开提供了与编码纤溶酶原的mRNA相互作用的寡核苷酸，其导致纤溶酶原的表达降低，如使用蛋白印迹和/或定量PCR(qPCR)在体外测量的，如本文实施例部分所述。
[0027]在另一个实施方案中，本公开提供了抑制凝血因子表达的方法，所述方法包括：向需要抑制纤溶酶原表达以降低纤溶酶原(siPLG/siP1g)表达的受试者施用在脂质纳米颗粒中的siRNA的药物组合物。本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.针对纤溶酶原mRNA的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰或未修饰的核苷酸，并且其中所述双链或单链siRNA的至少一条链具有与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少80％序列同一性的序列。2.针对纤溶酶原mRNA的双链或单链siRNA分子，所述siRNA分子含有修饰或未修饰的核苷酸且长度为25至35个核苷酸。3.如权利要求1所述的双链或单链siRNA分子，其中所述siRNA分子的长度为20至35个核苷酸。4.如权利要求1所述的双链或单链siRNA分子，其中所述siRNA分子的长度为25至35个核苷酸。5.如权利要求2所述的双链或单链siRNA分子，其中所述siRNA分子的长度为25至35个核苷酸。6.如权利要求1至5中任一项所述的siRNA分子，其中所述序列的至少一条链与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少85％的序列同一性。7.如权利要求1至6中任一项所述的siRNA分子，其中所述序列与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少90％的序列同一性。8.如权利要求7所述的siRNA分子，其中所述序列与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少95％的序列同一性。9.如权利要求8所述的siRNA分子，其中所述序列与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少97％的序列同一性。10.如权利要求9所述的siRNA分子，其中所述序列与SEQ ID NO:1至28中的任一个具有至少98％的序列同一性。11.如权利要求10所述的siRNA分子，其中所述序列基本上由SEQ ID No.1至28中任...

【专利技术属性】
技术研发人员：克里斯蒂安，
申请(专利权)人：英属哥伦比亚大学，
类型：发明
国别省市：