衍生肽、端粒长度调节剂及其在抗衰老中的应用制造技术

本发明专利技术涉及肉桂活性成分技术领域，尤其涉及衍生肽、端粒长度调节剂及其在抗衰老中的应用。该衍生肽来自肉桂（Cinnamomum aromaticum）籽，经过对肉桂籽脱脂、碱处理、酸处理、酶解和纯化得到寡肽，再对寡肽进行脂化处理得到该衍生肽。该衍生肽能够减缓细胞端粒缩短速度，对抗氧化应激作用，提高端粒酶逆转录因子和端粒酶逆转录酶活性，减少端粒磨损。减少端粒磨损。减少端粒磨损。

【技术实现步骤摘要】
衍生肽、端粒长度调节剂及其在抗衰老中的应用


[0001]本专利技术涉及肉桂活性成分
，尤其涉及衍生肽、端粒长度调节剂及其在抗衰老中的应用。

技术介绍

[0002]肉桂（Cinnamomum aromaticum）为樟科樟属植物，其干燥树皮、干燥嫩枝为中医临床常用药材，具有补火助阳、温里散寒的功效。《中国药典》2020年版规定肉桂、桂枝分别为肉桂的干燥树皮及干燥嫩枝。关于肉桂的植物化学研究，目前共分离鉴定出160多种成分，肉桂不同部位的化学成分相似，但在种类和含量上仍有一定差异。其中，肉桂醛（cinnamaldehyde，CA）被认为是该植物的代表性成分，通常以反式肉桂醛（transcinnamaldehyde，TCA）存在于肉桂挥发油中，是《中国药典》中肉桂和桂枝药材的标示成分，为浅黄色油状液体，具有抗炎、解热镇痛、抗肿瘤、降糖等药理活性。除肉桂醛外，2
′‑
羟基肉桂醛（2
′‑
hydroxycinnamaldehyde，HCA）、2
′‑
苯甲酰氧肉桂醛（2
′‑
benzoyloxycinnamaldehyde，BCA）等也具有良好抗炎活性。而对于肉桂的蛋白类激活性成分，利于多肽或者小分子肽的活性研究甚少。

技术实现思路

[0003]为解决或缓解上述部分技术问题，本专利技术提供了一种延缓端粒长度缩短的衍生肽，其通过来源于肉桂的多肽进行脂化得到，具有应用于抗衰老和抗癌领域的前景。为此，本专利技术至少公开了以下技术方案：第一方面，一种延缓端粒长度缩短的衍生肽，选自CH3‑
(CH2)8‑
YALYTAFGQ
‑
CONH2、CH3‑
(CH2)8‑
VRWLAVHG
‑
CONH2和CH3‑
(CH2)8‑
YLQYRRGD
‑
CONH2中的至少一项，其中，多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD来自于肉桂（Cinnamomum aromaticum）籽。
[0004]在一些实施例中，所述衍生肽是将YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD中的至少一项分别进行脂化得到的脂肽。
[0005]第二方面，本专利技术公开了第一方面所述的衍生肽的制备方法，包括：获取肉桂籽粉，用石油醚脱脂处理；取肉桂籽脱脂粉经碱液处理和酸液处理，得到肉桂籽粗蛋白；将肉桂籽粗蛋白经酶解处理和纯化，得到多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD；将多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD分别与正癸酸反应，收集反应物，纯化得到所示衍生肽。
[0006]在一些实施例中，所述酶解的步骤包括：将所述肉桂籽粗蛋白粉经酸性蛋白酶、蛋白酶K和无花果蛋白酶酶解。
[0007]在一些实施例中，所述肉桂籽粗蛋白粉经酸性蛋白酶的步骤包括：配置含有5%(w/v)的肉桂籽粗蛋白粉溶液，用1M盐酸水溶液调节pH至3.5，加入酸性蛋白酶，于40℃水浴酶解4h后，100℃灭酶10min，10000rpm离心5min，取上清液，过滤，冷
冻干燥，得到第一酶解粉。
[0008]在一些实施例中，经所述蛋白酶K酶解的步骤包括：取所述第一酶解粉分散在0.05mM氯化钠溶液中，加入蛋白酶K，置于水浴37℃酶解3h，100℃灭酶10min，10000rpm离心5min，取上清液，过滤，冷冻干燥，得到第二酶解粉。
[0009]在一些实施例中，经所述无花果蛋白酶酶解的步骤包括：取所述第二酶解粉溶解在去离子水中，加入无花果蛋白酶，，置于水浴37℃酶解0.5h，100℃灭酶10min，10000rpm离心5min，取上清液，过滤，冷冻干燥，得到第三酶解粉。
[0010]第三方面，本专利技术公开了一种端粒长度调节剂，包含第一方面所述的衍生肽。
[0011]第四方面，本专利技术公开了第一方面所述的衍生肽在制备抗衰老药物中的应用。
[0012]第五方面，本专利技术公开了第一方面所述的衍生肽在制备抗癌药物中的应用。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的优点及积极效果至少如下：本专利技术通过对市售的肉桂籽进行脱脂、碱液提取和酸液提取，并继续进行酶解和纯化，得到四种寡肽A1~A4。其中A1~A3经过细胞实验和动物实验证实对LO2细胞无毒性作用，能够缩短细胞端粒缩短速度，对抗氧化应激作用，提高端粒酶逆转录因子（c
‑
Myc）和端粒酶逆转录酶（TERT）活性，延缓端粒磨损。
[0014]本专利技术进一步将四种寡肽A1~A3进行脂化，发现缩短细胞端粒缩短、抗氧化应激作用和延缓端粒磨损作用均强于寡肽A1~A3。
[0015]本专利技术还进行了动物实验证实了，该寡肽A1~A3的衍生肽能够较佳地保持小鼠外周血白细胞端粒长度，并保护小鼠肝脏细胞对抗衰老。
[0016]另外，本专利技术还通过细胞实验发现，寡肽A1~A3及其衍生肽能够促使A549细胞活性降低，并破坏该细胞的细胞膜，提示其具有抑制或者杀灭肺癌细胞的作用。
附图说明
[0017]图1为本专利技术提供的寡肽A1~A4的质谱图。
[0018]图2为本专利技术提供的寡肽B1~B2的质谱图。
[0019]图3为本专利技术提供的脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10的质谱图。
[0020]图4为本专利技术提供的寡肽B1
‑
C10~B2
‑
C10的质谱图。
[0021]图5为本专利技术提供的寡肽A1~A4、寡肽B1~B2、脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10和脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10对LO2细胞的细胞活力实验结果图。
[0022]图6为本专利技术提供的寡肽A1~A4、寡肽B1~B2、脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10和脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10对LO2细胞的细胞相对端粒长度实验结果图。
[0023]图7为本专利技术提供的寡肽A1~A4、寡肽B1~B2、脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10和脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10对LO2细胞的GSH
‑
Px实验结果图。
[0024]图8为本专利技术提供的寡肽A1~A4、寡肽B1~B2、脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10和脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10对LO2细胞的CAT实验结果图。
[0025]图9为本专利技术提供的寡肽A1~A4、寡肽B1~B2、脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10和脂肽A1
‑
C10~A4
‑
C10对LO2细胞的SOD实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种延缓端粒长度缩短的衍生肽，其特征在于，选自CH3‑
(CH2)8‑
YALYTAFGQ
‑
CONH2、CH3‑
(CH2)8‑
VRWLAVHG
‑
CONH2和CH3‑
(CH2)8‑
YLQYRRGD
‑
CONH2中的至少一项，其中，多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD来自于肉桂（Cinnamomum aromaticum）籽。2.根据权利要求1所述的衍生肽，其特征在于，所述衍生肽是将YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD中的至少一项分别进行脂化得到的脂肽。3.权利要求1或2所述的衍生肽的制备方法，其特征在于，包括：获取肉桂籽粉，用石油醚脱脂处理；取肉桂籽脱脂粉经碱液处理和酸液处理，得到肉桂籽粗蛋白；将肉桂籽粗蛋白经酶解处理和纯化，得到多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD；将多肽YALYTAFGQ、VRWLAVHG和YLQYRRGD分别与正癸酸反应，收集反应物，纯化得到所示衍生肽。4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述酶解的步骤包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：王智亮，
申请(专利权)人：广东旺合生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：