山豆根酮A10在制备抗炎产品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在制备抗炎产品中应用，以及一种体外非治疗目的的抑制巨噬细胞活化的方法。本发明专利技术经过研究首次证实了山豆根酮A10与S100A8/A9具有高蛋白亲和力，且可通过TLR4/NFκB/MyD88信号通路抑制细胞炎症因子的产生，抑制巨噬细胞的活化，调节机体炎症反应。因此，山豆根酮A10可用于制备抗炎产品，具有良好的市场应用前景。前景。前景。

【技术实现步骤摘要】
山豆根酮A10在制备抗炎产品中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及山豆根酮A10在制备抗炎产品中的应用。

技术介绍

[0002]山豆根酮A10(EuchrenoneA10)，主要为来自豆科植物中提取、化学合成和生物工程技术合成，其分子式为C
25
H
26
O5，分子量为406.5，结构式如下所示：
[0003][0004]炎症，就是平时人们所说的“发炎”，是机体对于刺激的一种防御反应，表现为红、肿、热、痛和功能障碍。炎症，可以是感染引起的感染性炎症，也可以不是由于感染引起的非感染性炎症。巨噬细胞是一种位于组织内的白血球，源自于单核细胞。巨噬细胞作为组织微环境的缔造者，广泛参与并贯穿于炎症的病理过程，可释放出多种炎症介质从而引起相应炎症通路激活。因此，通过调节巨噬细胞活化可以抑制过度炎症反应，从而起到抗炎的作用，防治与过度炎症反应相关的疾病。
[0005]S100A8、S100A9多功能钙结合蛋白家族S100蛋白家族的主要成员，常以二聚体S100A8/A9的形式存在，其主要来源于激活的中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和树突状细胞等，参与了多种炎症疾病的发生与发展。

技术实现思路

[0006]基于此，本专利技术的目的在于提供山豆根酮A10在制备抗炎产品中应用。山豆根酮A10可以抑制巨噬细胞的活化，降低IL
‑
6的表达，抑制TLR4/NFκB/MyD88信号通路相关基因的表达。
[0007]为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案。
[0008]山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在制备抗炎产品中应用。
[0009]在一些实施例中，所述抗炎产品可以抑制巨噬细胞的活化。
[0010]在一些实施例中，所述抗炎产品可以抑制S100A8基因和/或S100A9基因的表达。
[0011]在一些实施例中，所述抗炎产品可以抑制IL
‑
6的表达。
[0012]在一些实施例中，所述抗炎产品可以抑制TLR4/NFκB/MyD88信号通路。
[0013]本专利技术还提供了一种抗炎药物，所述抗炎药物包含山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐以及药物学上可接受的辅料。
[0014]在一些实施例中，所述药物的剂型包括颗粒剂、片剂、溶液剂、丸剂、酊剂、散剂、注射剂、浸膏剂、软膏剂、胶囊剂。
[0015]本专利技术还提供了一种体外非治疗目的的抑制巨噬细胞活化的方法，所述方法包括以下步骤：在巨噬细胞体外培养体系中加入山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐进行处理，然后加入巨噬细胞活化诱导剂；所述山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在所述培养体系中的终浓度为0.1
‑
1000μM。
[0016]在一些实施例中，所述山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在所述培养体系中的终浓度为1
‑
500μM；优选地，所述山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在所述培养体系中的终浓度为5
‑
200μM；更优选地，所述山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在所述培养体系中的终浓度为10
‑
150μM。
[0017]在一些实施例中，所述巨噬细胞活化诱导剂选自脂多糖LPS、钙卫蛋白S100A8/A9中的至少一种。
[0018]本专利技术经过研究首次证实了山豆根酮A10与S100A8/A9具有高蛋白亲和力，且可通过TLR4/NFκB/MyD88信号通路抑制细胞炎症因子的产生，抑制巨噬细胞的活化，调节机体炎症反应。因此，山豆根酮A10可用于制备抗炎产品，具有良好的市场应用前景。
附图说明
[0019]图1为山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9相互作用分子对接图。
[0020]图2为生物膜层表面干涉技术(BLI)检测山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9的蛋白亲和力结果。
[0021]图3为山豆根酮A10对RAW264.7巨噬细胞内S100A8、S100A9及IL
‑
6mRNA表达的影响结果。
[0022]图4为山豆根酮A10对RAW264.7巨噬细胞内S100A8/A9影响的作用机制结果。
[0023]图5为山豆根酮A10对外源性S100A8/A9蛋白刺激RAW264.7巨噬细胞的作用机制结果。
具体实施方式
[0024]本专利技术下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。实施例中所用到的各种常用化学试剂，均为市售产品。
[0025]除非另有定义，本专利技术所使用的所有的技术和科学术语与属于本专利技术的
的技术人员通常理解的含义相同。本专利技术的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不用于限制本专利技术。
[0026]本专利技术的术语“包括”和“具有”以及它们任何变形，意图在于覆盖不排他的包含。例如包含了一系列步骤的过程、方法、装置、产品或设备没有限定于已列出的步骤或模块，而是可选地还包括没有列出的步骤，或可选地还包括对于这些过程、方法、产品或设备固有的其它步骤。
[0027]在本专利技术中提及的“多个”是指两个或两个以上。“和/或”，描述关联对象的关联关系，表示可以存在三种关系，例如，A和/或B，可以表示：单独存在A，同时存在A和B，单独存在B这三种情况。字符“/”一般表示前后关联对象是一种“或”的关系。
[0028]下面结合具体实施例进行说明。
[0029]实施例1山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9间相互作用
[0030]通过在相应数据库中查阅山豆根酮A10、钙结合蛋白S100A8/A9三维结构后，在工作站中通过分子对接计算方法寻找蛋白质活性配体来确定山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9间的相互作用。结果显示：山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9具有相互作用(表1、图1)。
[0031]表1山豆根酮A10与S100A8/A9间相互作用计算机分子模拟对接分值
[0032][0033]实施例2山豆根酮A10与钙结合蛋白S100A8/A9亲和力试验
[0034]将山豆根酮A10采用二倍梯度稀释法稀释6个浓度梯度后，与制备好的钙结合蛋白S100A8/A9探针在分子相互作用仪上进行检测。检测结果发现山豆根酮A10与S100A8/A9蛋白(Kd＝34.7
±
9.14)具有较强亲和力(图2)。
[0035]实施例3山豆根酮A10对RAW264.7巨噬细胞内S100A8、S100A9及IL
‑
6mRNA表达的影响
[0036]1×
105的RAW264.7细胞接种于6孔板中培养24h，进行以下分组：(1)对照组(Control)：不做任何处理；(2)模型组(Model)：继续培养2h后加入终浓度为100ng/ml的LPS刺激诱导；(3)帕奎莫德组(paquinimod)：加入终浓度为5μM的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐在制备抗炎产品中应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗炎产品可以抑制巨噬细胞的活化。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗炎产品可以抑制S100A8基因和/或S100A9基因的表达。4.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗炎产品可以抑制IL
‑
6的表达。5.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述抗炎产品可以抑制TLR4/NFκB/MyD88信号通路。6.一种抗炎药物，其特征在于，所述抗炎药物包含山豆根酮A10或其在药学上可接受的盐以及药物学上可接受的辅料。7.如权利要求6所述的抗炎药物，其特征在于，所述药物的剂型包括颗粒剂、片剂、溶液剂、丸剂、酊剂、散剂、注射剂、浸膏剂、软膏剂、胶囊剂。8.一...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘胡丹，刘良，何金莲，肖瑶，
申请(专利权)人：广东省中医院广州中医药大学第二附属医院，广州中医药大学第二临床医学院，广东省中医药科学院，
类型：发明
国别省市：