基于环介导等温扩增技术的嗜肺军团菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法技术

本发明专利技术公开了基于环介导等温扩增技术的嗜肺军团菌基因快速诊断试剂盒及其检测方法，该试剂盒由两对引物、ＤＮＡ聚合酶、稳定液、反应液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒应用六个区段，四条引物，根据是否扩增就能判断靶标物质的存在与否，因此具有高特异性。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒快速、高效、灵敏度高，只需一个恒定温度就能扩增反应，不需要特殊试剂与设备，检测成本低。本发明专利技术的基因快速诊断试剂盒鉴定简便，从ｄＮＴＰ析出的焦磷酸根离子与反应溶液中的Ｍｇ↑［２＋］结合，产生副产物－－焦磷酸镁沉淀，可通过肉眼观察鉴定，并且加入显色液后，阴阳性结果显色差异显著，更加明显可靠。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种嗜肺军团菌基因快速诊断试剂盒，其特征在于由两对引物、Ｂｓｔ　ＤＮＡ聚合酶、反应液、稳定液、样品预处理液、显色液和阳性对照液组成，以上七种液体分别置于容器中，　上述两对引物为：　外引物Ｆ３：ＴＣＴＡＴＴＧＡＡＡＴＡＧＣＡＣＴＴ ＡＡＧＣＴ；　外引物Ｂ３：ＴＧＧＡＴＴＣＣＧＡＴＣＧＧＧＡＴＧ；　内引物ＦＩＰ：ＧＣＴＧＴＴＣＣＡＴＡＡＣＴＧＣＴＣＡＣＡＡＴＴＴｔｔｔｔＡＡＴＴＴＡＧＡＧＴＣＴＴＣＡＴＡＣＧＡＣＴＧＡ；　内引物ＢＩＰ：ＴＴＡＧＡＡＧＴＡ ＡＧＴＣＧＡＡＡＴＧＣＧＡＧＴＧｔｔｔｔＧＴＡＴＴＴＣＡＴＴＧＣＣＡＧＣＣＴＧ；　每１Ｌ反应液中含有１．６～２ｍｍｏｌ　ｄＮＴＰ、２０～２５ｍｍｏｌ　Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１０～１２．５ｍｍｏｌ氯化钾、１０～１２．５ｍｍｏｌ硫酸铵、８～１ ０ｍｍｏｌ硫酸镁、１～１．２５ｍｌ　ＴｒｉｔｏｎＸ－１００、０．８～１ｍｏｌ甜菜碱、内引物ＦＩＰ／ＢＩＰ各１．６～２ｍｏｌ和外引物Ｆ３／Ｂ３各０．２～０．２５ｍｏｌ；　每１Ｌ样品预处理液中含有１０～２０ｍｍｏｌ　ｐＨ　８．０的Ｔｒｉｓ －ＨＣｌ、１～２ｍｍｏｌ　ＥＤＴＡ和１０～１２ｍｌ　Ｔｒｉｔｏｎ　Ｘ－１００；　上述阳性对照为嗜肺军团菌基因组ＤＮＡ。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：曹以诚，陈洵，杜正平，谭慧媚，邓小玲，柯昌文，李志勇，李心晖，
申请(专利权)人：广州华峰生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：81[]