人PC4蛋白Ser17位点的磷酸化在肿瘤细胞增殖调控中的应用制造技术

本发明专利技术公开了人PC4蛋白Ser17位点的磷酸化在肿瘤细胞增殖调控中的应用。具体包括PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤诊断靶点或治疗靶点中的应用。本发明专利技术研究得到，RNA结合蛋白PC4的第17位丝氨酸残基(Ser)发生磷酸化修饰，该位点磷酸化水平在肿瘤细胞中显著降低，并且该位点磷酸化会减弱PC4与RNA结合能力，进而抑制了肿瘤细胞的细胞周期进展和细胞增殖。因此针对PC4蛋白Ser17位点开发治疗肿瘤的诊断产品和靶向药物具有较大的临床应用价值。另外，本发明专利技术针对人PC4蛋白Ser 17位点磷酸化，制备了特异性的抗原肽和抗体，可应用于调控肿瘤细胞增殖或生长，可作为或用于开发临床肿瘤疾病的诊断与治疗产品。断与治疗产品。断与治疗产品。

【技术实现步骤摘要】
人PC4蛋白Ser17位点的磷酸化在肿瘤细胞增殖调控中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
更具体地，涉及人PC4蛋白Ser17位点的磷酸化在肿瘤细胞增殖调控中的应用。

技术介绍

[0002]恶性肿瘤是威胁人类生命和健康的重大疾病之一，近年来肿瘤发病率逐渐上升，死亡率也居高不下，并且发病年龄呈年轻化趋势。尽管近年来肿瘤的基础研究和临床治疗取得了较大进展，但仍然缺乏高效特异的早期诊断指标和治疗方法，再加上肿瘤容易复发和转移的特性，所以大部分肿瘤患者的预后都比较差。因此，深入研究恶性肿瘤发生发展机制，鉴定一些辅助肿瘤早期诊断的生物标志物，以及发现肿瘤治疗的新靶点对于肿瘤的预防和治疗都具有十分重要的意义。
[0003]辅助转录因子4(Positive Cofactor 4，PC4)是一种功能强大且结构高度保守的核蛋白，广泛存在于酵母、哺乳动物和人类等组织细胞中。除了参与RNA聚合酶Ⅱ介导的基础转录，PC4还可以调控DNA复制、染色质重塑、DNA修复以及RNA代谢等分子生物学过程。近年来关于PC4的生物学功能研究逐渐增多，本课题组最早报道了PC4在正常细胞恶性转化后的模型以及肺癌、骨肉瘤等多种肿瘤临床标本中异常高表达，并且调控肿瘤的恶性进展(Shi CM，2007，In vitro cell dev biol；Peng Y，2012，Cancer gene ther；Luo P，2019，cell commun signal)。
[0004]鉴于PC4在肿瘤发生和发展过程中发挥的重要作用，而磷酸化、泛素化等翻译后修饰往往在细胞信号通路介导的生理和病理过程中发挥着关键作用，但具有不同修饰如何发挥作用是未知的，因而进一步研究PC4蛋白的翻译后修饰及其对肿瘤的影响，具有重要意义。

技术实现思路

[0005]本专利技术要解决的技术问题是克服现有PC4蛋白与肿瘤之间研究的不足，提供一种能够用于诊断与靶向治疗肿瘤的PC4蛋白磷酸化位点，并给予此开发肿瘤诊断产品与靶向治疗药物，并进一步开发能够特异识别人PC4蛋白的Ser17磷酸化位点的抗体。
[0006]本专利技术第一目的是提供PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤诊断靶点，PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平在作为肿瘤诊断指标，以及检测PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。
[0007]本专利技术第二目的是提供PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用，或作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用，以及能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的试剂在制备肿瘤治疗产品中的应用。
[0008]本专利技术第三目的是提供CK2磷酸激酶在作为或制备能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的产品中的应用，或在制备肿瘤治疗产品中的应用。
[0009]本专利技术第四目的是提供一种磷酸化修饰pPC4
s17
抗原肽。
[0010]本专利技术第五目的是提供一种特异性识别PC4蛋白Ser17磷酸化位点的抗体。
[0011]本专利技术第六目的是提供所述抗原肽或所述抗体在作为或制备肿瘤检测/诊断/筛查、治疗或预后判定产品中的应用。
[0012]本专利技术上述目的通过以下技术方案实现：
[0013]我们研究发现，PC4氨基酸序列中的Ser17位点是其蛋白磷酸化修饰的位点，然而该修饰是否能通过影响PC4蛋白功能来影响肿瘤细胞生长还不清楚。我们进一步研究显示：PC4蛋白的Ser17位点磷酸化在肿瘤细胞或组织的表达水平比正常细胞或组织的表达水平低；激活PC4蛋白的Ser17位点磷酸化能够明显减弱PC4蛋白与RNA结合的能力，导致细胞周期阻滞和肿瘤细胞生长抑制，抑制肿瘤细胞生长、增殖和恶性表型转化。表明PC4的Ser17可作为关键的靶点应用于肿瘤诊断产品或肿瘤靶向药物的开发。因此可以针对该位点开发肿瘤筛查、诊断与治疗疗效的监测产品，以及靶向治疗肿瘤的药物。进一步地，本专利技术还开发了针对人PC4蛋白Ser17位点的磷酸化抗体，可应用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定等。
[0014]基于本专利技术的研究成果，本专利技术要求保护如下方案：
[0015]PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤诊断靶点中的应用。
[0016]PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平在作为肿瘤诊断指标中的应用。
[0017]检测PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。
[0018]PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用。所述调控是抑制肿瘤细胞增殖、生长和恶性进展。调控手段是通过激活PC4蛋白Ser17位点磷酸化，进而可明显减弱PC4蛋白与RNA结合的能力，导致细胞周期阻滞，抑制肿瘤细胞生长和恶性进展。
[0019]PC4蛋白Ser17位点在作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。
[0020]能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的试剂在制备肿瘤靶向治疗产品中的应用。
[0021]本专利技术还研究了CK2磷酸激酶直接催化PC4的Ser17位点磷酸化，抑制PC4与RNA结合，进而阻碍PC4对RNA的稳定性调控，最终导致肿瘤细胞生长受限，因此要求保护：CK2磷酸激酶在作为或制备能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的产品中的应用，以及CK2磷酸激酶在制备肿瘤治疗产品中的应用。
[0022]另外，本专利技术还进一步开发了一种磷酸化修饰pPC4
s17
抗原肽，序列为：CSSGSD
‑
pSDSEV。其中的Ser氨基酸被磷酸化修饰。该抗原肽既能解决PC4蛋白磷酸化修饰有效研究的问题，又能用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定。
[0023]更进一步地，利用所述抗原肽作为免疫原免疫动物，制备了一种特异性识别PC4蛋白Ser17磷酸化位点(pPC4
s17
)的多克隆抗体(命名为p
‑
PC4
‑
S17抗体)。该抗体既能解决PC4蛋白磷酸化修饰有效研究的问题，又能用于肿瘤等疾病的诊断、治疗及预后判定。
[0024]因此，所述抗原肽在制备特异性识别PC4蛋白Ser17磷酸化位点(pPC4
s17
)的多克隆抗体中的应用，也应在本专利技术保护范围之内。
[0025]所述抗原肽或所述抗体在作为或制备肿瘤检测/诊断/筛查、靶向治疗或预后判定产品中的应用，也应在本专利技术保护范围之内。
[0026]其中抗体用于诊断或靶向治疗药物开发，包括将抗体与药物链接开展肿瘤靶向治疗、将抗体与放射性标记物链接进行放射性免疫显像来协助肿瘤的诊断。
[0027]本专利技术方案中所述肿瘤包括肝癌、宫颈癌、结直肠癌、乳腺癌和前列腺癌。
[0028]本专利技术方案中所述包括药物等。
[0029]PC4蛋白作为一种RNA结合蛋白，通过调控肝癌细胞周期相关基因的mRNA稳定性和蛋白表达水平，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤诊断靶点中的应用。2.PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平在作为肿瘤诊断指标中的应用。3.检测PC4蛋白Ser17位点磷酸化水平的试剂在制备肿瘤诊断产品中的应用。4.PC4蛋白Ser17位点在作为肿瘤治疗靶点或肿瘤细胞增殖调控靶点中的应用，或作为靶点在筛选、开发和/或设计预防和/或治疗肿瘤产品中的应用。5.能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的试剂在制备肿瘤治疗产品中的应用。6.CK2磷酸激酶在作为或制备能够激活/促进PC4蛋白Ser17位点磷酸化的产品中的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：史春梦，罗鹏，潘绮湄，
申请(专利权)人：中国人民解放军陆军军医大学，
类型：发明
国别省市：