一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2及其应用，涉及植物基因工程技术领域。所述基因启动子D14Q2选自SEQID NO.01、SEQIDNO.02、与SEQIDNO.01或SEQIDNO.02序列进行杂交的核酸序列、与SEQIDNO.01或SEQIDNO.02所述序列有至少95％序列一致性的序列、与SEQIDNO.01或SEQIDNO.02任一所述序列互补的DNA或者RNA序列中的任意一种。本发明专利技术克服了现有技术的不足，提供了一种具有低温或高渗透压诱导应答特性的基因启动子，在农业生产的分子生物学层面育种中可以利用这样的方式培育出特殊品种的耐盐碱地、抗旱、抗冻品种。抗冻品种。

【技术实现步骤摘要】
一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2及其应用


[0001]本专利技术涉及植物基因工程
，具体涉及一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2及其应用。

技术介绍

[0002]启动子是RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列，它含有RNA聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列，多数位于结构基因转录起始点的上游，启动子本身不被转录。但有一些启动子(如tRNA启动子)位于转录起始点的下游，这些DNA序列可以被转录。启动子的特性最初是通过能增加或降低基因转录速率的突变而鉴定的。启动子一般位于转录起始位点的上游。
[0003]启动子就像“开关”，决定基因的活动。既然基因是成序列的DNA核苷酸，那么启动子也应由DNA组成。启动子本身并不控制基因活动，而是通过与被称为转录因子的这种蛋白质结合而控制基因活动的。转录因子就像一面“旗子”，指挥着RNA聚合酶的活动。这种酶制造基因的RNA复制本。一般分为广谱表达型启动子、组织特异性启动子、肿瘤特异性启动子等多种形式。基因的启动子部分发生突变，则导致基因表达的调节障碍。这种变化常见于恶性肿瘤。
[0004]为验证启动子是否在该条件下正确应答，可采用DNA荧光定量比对的方式，即在该启动子下游插入一段带有特定已知序列的基因，在本启动子对应产生应答的UVB暴露环境进行一定时间的组织培养后用内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析等方式验证该序列相对于未插入启动子片段的细胞的转录量，经对比后即可初步判断该启动子对于相同基因在同一环境下表达量的影响。相同的，对于不便进行细胞层面DNA荧光验证的条件，也可以在进行基因编辑时直接在启动子下游插入经转录翻译后可合成对该种作物有抗冻或抗高盐度效果的蛋白质的基因片段，并对该基因编辑作物在该种启动子对应诱导应答的环境下进行种植，以该基因编辑作物的存活率相对于为进行基因编辑插入启动子片段的对照组的存活率的对比，对该启动子在低温或高渗透压环境下对基因表达的调控效果进行验证。

技术实现思路

[0005]针对现有技术不足，本专利技术提供一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2及其应用，提供了一种具有低温或高渗透压诱导应答特性的基因启动子，在农业生产的分子生物学层面育种中可以利用这样的方式培育出特殊品种的耐盐碱地、抗旱、抗冻品种。
[0006]为实现以上目的，本专利技术的技术方案通过以下技术方案予以实现：
[0007]一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2，其特征在于，所述基因启动子D14Q2的DNA核苷酸序列选自下列序列中任意一组：
[0008](1)如SEQIDNO.01所示的DNA核苷酸序列，具体序列如下：
[0009]ACTAAATATATATAGAACATTATTCTATGAAGGAAAAGTATATGCAACCAAAAAGTTATCAGCCAAAAA
CTAAATAAAATCATATTAATTTATATTAATAATTAATTTTAAATTTTTTAAATTCAAAATTTAGAAAATTTAAGTAAACCTAATTAAAACATAAAAATACCTTCCTCTTCTCTTTCACATTAACCTACCCACTTCTAACAATCACACACAGACCTCTCTCTCACCATCAGACCCTCTCCGCCTCCTCACCGCGACCCACTCCTCTTCTTGAAGTAGAAAGCGACACGTTGGAGAGGCTTTGCACCGACAGGGAATCGGAGGCGTTGATTGAGTCGGTCCAATAT
[0010]GACGTGAGCGACGTGGAGGTGGTTGGTGTCGAAGCAATCGGTA
[0011]GCACGAATGAGCTCCTCTATGAAATCGAAGCCGGTGGCGGAAG
[0012]AATTATTGGAGGTGTCGTGGAGGAGGCGGTCGAGGGTAGCAGT
[0013]GGCATTGGCGTAGTTGTAGGATATGGTTTGGATGTCTGGGAATT
[0014]CGAAGTGTGGGTCGAAGGAAGGAGAGAAGTCAGGGACATTAG
[0015]GGAGGGTGGTCTTGAACAAGGATGGGTTGGAGTTTTCGTGGAA
[0016]TCCAAGGTCCTTCATGATGGAGTCCCAATCAAGATTGTGCAGCA
[0017]CATGGTCCTCTAGCTGGTGAAGACCCTCTTGCTGTGTGTTGGGT
[0018]GCAGTAGCCACCAGCGCAGCCTTCTCAGGGGTGGGGCTTCTAC
[0019]ACAGGTCCAGCACCAAAAAAACATTCATTTAATATAAAAAAAA
[0020]CATCTTAATACTTAACAAAAGAAACATCTAATTATATTTTAGCAA
[0021]AAATAATTAAATATCTATAAAATTTAAAAAAAATATGAAATTCTT
[0022]AAAGAAATGGATATTCACATTTGCAATACAAAAAAATTCGAAAA
[0023]ATATATAAAAGAACATCCATTTAGTATGAAAAAGAAACATTCTGA
[0024]TACTTAGTAGAAGAAACATCCATATATATTAACTCGTAGAGATTT
[0025]TGAATTCATTCAAAGATATTTGGCTGGTTTTGGCTGATATGCTTT
[0026]TGGTTCCCTAGCTTTACTCTTCTATGAAAGATAAAAACAAATAA
[0027]AGATAAGATAAGAACAACTAAAGATAAGATAAAGAAAAAATAA
[0028]GATAAGATAATAAAGACTAAAATTGTAATTGAATTTATGTATTCT
[0029]GTTAGGTTAAATTTGTGAGCCACGAGACTTCTTTATTGATGTCAT
[0030]GGACTAAAGTGAAAGAGTAGTTTAATATAATTTAAATTAATCAAA
[0031]TGATTAACTCACTTGTTTATTTAAGTAAGTATCATGATTTAAATTT
[0032]TTTTAATGTATAAACTATAGAAAAAAAATTAGTGTACTGAAAATA
[0033]CCGATATTCTAGTTGTTTTAACCGTTAATTTTAATTAATATATATTA
[0034]TATATCTTTTTTATAATTTAGATCAACAGTTAAAATAACTGGAAC
[0035]ACTAGTATTTCCAGTATACATAAAACTCTTCCTAAACTATAAAGC
[0036]AATTTCTTAGCCAAT本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2，其特征在于，所述基因启动子D14Q2的DNA核苷酸序列选自下列序列中任意一组：(1)如SEQ ID NO.01所示的DNA核苷酸序列；(2)如SEQ ID NO.02所示的与SEQ ID NO.01的DNA核苷酸序列反向互补的序列，即为与原序列形成完整碱基互补配对形成双链结构，而方向相反的单链序列；(3)能够与SEQ ID NO.01或SEQ ID NO.02序列进行杂交的核酸序列；(4)与SEQ ID NO.01或SEQ ID NO.02所述序列有至少95％序列一致性的序列；(5)与SEQ ID NO.01或SEQ ID NO.02任一所述序列互补的DNA或者RNA序列。2.根据权利要求1所述的一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2，其特征在于：所述基因启动子D14Q2能在特定的低温或高渗透压条件下活化RNA聚合酶，使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。3.根据权利要求1所述的一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2，其特征在于：所述基因启动子D14Q2通过PCR扩增技术获得。4.根据权利要求3所述的一种低温/高渗透压诱导响应基因启动子D14Q2，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：骆超，李小濠，
申请(专利权)人：海南弥生生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：