一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法技术

一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，包括以下步骤：采用高效液相色谱法对含右雷佐生的待测溶液进行检测，使用正相手性色谱柱，以正己烷和醇类溶剂的混合液为流动相进行等度洗脱，其中，色谱柱温度为25～35℃，检测波长为200～220nm，流速为0.4～0.6ml/min，进样量5～40μl，对右雷佐生的光学异构体含量进行检测，方法操作检单，光学异构体与右雷佐生峰分离度高，灵敏度高，经方法学验证表明该分析方法专属性好，精密度高，准确度高，能够准确定量分析右雷佐生中的光学异构体，可以对右雷佐生原料药及冻干粉制剂进行有效的质量控制，值得推广应用。值得推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法


[0001]本专利技术属于药物检测领域，具体涉及一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法。

技术介绍

[0002]右雷佐生(Dexrazoxane)，又名右丙亚胺，分子式为C
11
H
16
N4O4，化学名为(S)
‑
4,4'
‑
(1
‑
甲基
‑
1,2
‑
乙二基)双
‑
2,6
‑
哌嗪二酮，是消旋雷佐生的D
‑
异构体，其光学异构体为消旋雷佐生的R
‑
异构体，化学名为(R)
‑
4,4'
‑
(1
‑
甲基
‑
1,2
‑
乙二基)双
‑
2,6
‑
哌嗪二酮，消旋雷佐生的两种光学异构体的结构式为：
[0003][0004]右雷佐生是一款目前临床上唯一认可的、用于治疗蒽环类药物外渗及诱发心脏毒性的抗肿瘤辅助药品，右雷佐生原料药及其制剂中的光学异构体来源途径之一为合成副产物，鉴于光学异构体往往具有截然不同的药理活性，因此，光学异构体的分离与检测便在右雷佐生原料药及其制剂的质量控制中变得十分重要。
[0005]右雷佐生中光学异构体的检测存在如下问题：
[0006]第一，右雷佐生与光学异构体难以分离，右雷佐生与其光学异构体色谱保留行为相似，在普通反相色谱条件下难以实现分离。
[0007]第二，右雷佐生盐酸盐在低极性有机溶剂中溶解度低，右雷佐生冻干粉制剂为右雷佐生的盐酸盐制剂，在低极性有机溶剂中的溶解度较低，若采用正相色谱，选择极性比较低的有机溶剂体系，如高比例正己烷、甲基叔丁基醚等做流动相，样品在色谱系统中存在析出风险。
[0008]第三，紫外吸收靠近末端，右雷佐生及其光学异构体紫外最大吸收波长在205～210nm左右，靠近末端，常用的高极性有机相溶液或添加剂，如甲醇、乙醇、异丙醇、乙酸等，均在205～210nm附近有末端吸收。
[0009]中国专利CN108226309B中提供了一种右丙亚胺有关物质的反相高效液相色谱方法，该方法采用耐纯水的低密度键合反相C18色谱柱；以8～12mmol/L、pH 4.5～5的磷酸二氢钾溶液和甲醇作为洗脱液进行梯度洗脱，梯度洗脱60min，测定选自化学结构如下所示的物质：
[0010][0011]可见，其目的为对右雷佐生的上述杂质之间或杂质与主峰的分离。
[0012]吕艳芹等(RP
‑
HPLC法测定注射用右丙亚胺的含量及有关物质，内蒙古中医药，2011年10月，38
‑
39页)采用shim
‑
pack CLC
‑
ODS色谱柱(150mm
×
4.6mm，5μm)，流动相为0.01mol
·
L
‑1磷酸二氢钾溶液
‑
甲醇(85:15)，流速为1.0mL
·
min
‑1，检测波长为208nm，对注射用右丙亚胺的含量与有关物质进行检测。
[0013]上述专利和文献报道中主要针对右雷佐生的有关物质和含量进行了研究，不涉及对右雷佐生光学异构体的质量控制研究。至今，各国药典均未收录右雷佐生原料药及其制剂的质量标准，然而，鉴于光学异构体往往具有截然不同的药理活性，因此，亟需开发对右雷佐生光学异构体进行分离与检测的方法，以便对右雷佐生原料药及其制剂进行质量控制。

技术实现思路

[0014]本专利技术的目的在于提供一种能准确检测右雷佐生及其光学异构体的正向色谱分析检测方法，右雷佐生及其光学异构体在该方法中分离度良好，分离度达到1.5以上，专属性和灵敏度高，精密度与准确度好，分析结果准确可靠，能对右雷佐生原料药及其制剂进行有效的质量控制。
[0015]为了达到上述目的，本专利技术提供如下技术方案：
[0016]一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，包括以下步骤：
[0017]采用高效液相色谱对含右雷佐生的待测溶液进行检测，采用正相手性色谱柱，以正己烷与醇类有机溶剂的混合液为流动相进行等度洗脱，检测右雷佐生及其光学异构体的含量，其中，所述手性色谱柱硅胶表面涂敷有纤维素
‑
三(3
‑
氯
‑4‑
甲基苯基氨基甲酸酯)，色谱柱温度为25～35℃，检测波长为200～220nm；右雷佐生的光学异构体为消旋雷佐生的R
‑
异构体，化学名为(R)
‑
4,4'
‑
(1
‑
甲基
‑
1,2
‑
乙二基)双
‑
2,6
‑
哌嗪二酮。
[0018]进一步，所述流动相中，正己烷与醇类溶剂的体积比为(1～40)：(99～60)。
[0019]又，所述醇类溶剂选自乙醇、异丙醇和甲醇中的一种、两种或三种。
[0020]优选地，所述醇类溶剂中，甲醇占流动相总体积的0％
‑
20％，其余为乙醇与异丙醇；或，乙醇占流动相总体积的45％
‑
99％，其余为甲醇与异丙醇；或，异丙醇占流动相总体积的0％
‑
25％，其余为甲醇与乙醇。
[0021]再，所述待测溶液为右雷佐生原料药或制剂的醇溶液。
[0022]优选地，所述待测溶液以醇为溶剂，所述溶剂为甲醇、乙醇或甲醇与乙醇任意比例的混合溶液。
[0023]又，所述流动相的组成为乙醇:甲醇:异丙醇:正己烷＝40～70:10～20:10～15:10～30，体积比。
[0024]优选地，检测时流动相的流速为0.4～0.6ml/min。
[0025]进一步，所述待测溶液中右雷佐生含量为0.2～2mg/ml，右雷佐生光学异构体含量为1～10μg/ml。
[0026]又，检测波长为200～220nm，进样量为5～40μl。
[0027]本专利技术中，手性色谱柱为硅胶表面涂敷纤维素
‑
三(3
‑
氯
‑4‑
甲基苯基氨基甲酸酯)的正相手性色谱柱，流动相为正己烷与醇类有机溶剂的混合液，在该流动相等度洗脱作用下，对消旋雷佐生的R
‑
异构体(R)
‑
4,4'
‑
(1
‑
甲基
‑
1,2
‑
乙二基)双
‑
2,6
‑
哌嗪二酮具有优异的选择性，对右雷佐生及其光学异构体具有良好的分离能力，在合适范围内调整供试溶液浓度或提高进样量，即便右雷佐生峰会变宽，与光学异构体之间的分离度发生下降，本专利技术中两者依然能达到基线分离，分离度仍大于1.5。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，包括以下步骤：采用高效液相色谱对含右雷佐生的待测溶液进行检测，采用正相手性色谱柱，以正己烷与醇类有机溶剂的混合液为流动相进行等度洗脱，检测右雷佐生及其光学异构体的含量，其中，所述手性色谱柱硅胶表面涂敷有纤维素
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三(3
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氯
‑4‑
甲基苯基氨基甲酸酯)，色谱柱温度为25～35℃，检测波长为200～220nm；右雷佐生的光学异构体为消旋雷佐生的R
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异构体，化学名为(R)
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4,4'
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(1
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甲基
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1,2
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乙二基)双
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2,6
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哌嗪二酮。2.根据权利要求1所述右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，其特征在于，所述流动相中，正己烷与醇类溶剂的体积比为(1～40)：(99～60)。3.根据权利要求1所述右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，其特征在于，所述醇类溶剂选自乙醇、甲醇、异丙醇中的一种、两种或三种。4.根据权利要求3所述右雷佐生及其光学异构体的正相色谱分析检测方法，其特征在于，所述醇类溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇的混合溶剂；...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨易可，周洁，陈新晶，梁屹，程燕，
申请(专利权)人：上海旭东海普药业有限公司，
类型：发明
国别省市：