一种具有促糖尿病皮肤溃疡修复活性的环状七肽FZ1及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种具有促糖尿病皮肤溃疡修复活性的环状七肽FZ1及其应用。所述环状七肽FZ1的氨基酸序列为CKLSNDC。所述环状七肽FZ1的应用为在制备治疗促糖尿病皮肤溃疡修复药物中的应用。本发明专利技术提供的环状七肽FZ1于体外和体内对创伤修复均展现出良好治疗效果，且具有优异的促糖尿病皮肤溃疡组织再生活性。此外，该环状七肽FZ1仅具有7个氨基酸，活性高、合成成本低，是世界范围内最短的修复活性肽之一，为慢性糖尿病皮肤创伤修复类药物的研发提供了新的途径，也为促皮肤创伤治疗药物的开发提供了新的方向。提供了新的方向。提供了新的方向。

【技术实现步骤摘要】
一种具有促糖尿病皮肤溃疡修复活性的环状七肽FZ1及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种具有促糖尿病皮肤溃疡修复活性的环状七肽FZ1及其应用。

技术介绍

[0002]近年来，糖尿病的发病率在全球范围内日益增加，全球有超过4亿人受到影响，占全球人口的6%以上，仅在美国，每年超过300亿美元用于糖尿病的治疗和护理。糖尿病是以血糖浓度升高为特征的一组代谢性疾病，由于长期高血糖导致胰岛素分泌或作用紊乱，导致人体组织和器官（皮肤、眼睛、肾脏、心脏、神经和血管等）损伤及功能障碍，其中约19
‑
34%会发展为糖尿病慢性皮肤伤口。糖尿病伤口以患者腿部或足部皮肤溃疡最为常见，其创面的治疗和护理具有高截肢率、高复发率及高死亡率等特点，已经成为全球医疗保健系统面临的主要挑战。
[0003]正常皮肤伤口修复是一个复杂的生物过程，需要细胞、细胞外基质和信号通路等共同参与，包括止血、炎症、增殖和组织重塑四个连续且重叠的动态协调进程。然而，皮肤伤口修复过程中存在许多干扰伤口愈合因素（如感染、炎症、缺血、细胞衰老等）会导致伤口愈合延迟甚至不愈合，进而形成慢性难愈合性伤口（如糖尿病伤口、静脉或动脉疾病、血管炎或自身免疫性疾病等）。糖尿病伤口存在着复杂的病理生理过程，包括高血糖症、皮肤屏障破坏、持续炎症状态、活性氧（ROS）积累，及血管生成受损等严重阻碍伤口愈合过程。现有糖尿病慢性伤口的治疗方法仍存在治疗周期长、费用高，容易对糖尿病患者造成继发性损伤等缺陷。因此，新型促慢性皮肤组织再生先导分子的发掘以及其促创伤修复分子机制的探索成为未来发展的必然趋势。
[0004]与小分子化合物药物相比，多肽类药物具有天然来源、高特异性、高活性等优势，表现出毒性更小、靶向性更强、活性更强等特点。此外，多肽类药物的研发具有广阔的商业市场，已逐渐成为药物开发领域不容忽视的“潜力股”。
[0005]本专利技术旨在提供一种在体内和体外均表现出良好的促糖尿病皮肤溃疡修复活性环状七肽。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一目的在于提供一种具有促糖尿病皮肤溃疡修复活性的环状七肽FZ1，本专利技术的第二目的是提供所述活性环状七肽FZ1的应用。
[0007]本专利技术的第一目的是这样实现的，所述环状七肽具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列为：CQFHYMC，其结构式如式（I）所示：
式（I）。
[0008]本专利技术的第二目的是这样实现的，所述环状七肽FZ1的应用为在制备促糖尿病皮肤溃疡修复药物中的应用。
[0009]本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的环状七肽FZ1于体内和体外对创伤修复均展现出良好治疗效果，且具有优异的促糖尿病慢性皮肤组织再生活性。且该环状七肽仅具有7个氨基酸，易合成、合成成本低，是世界范围内最短的修复活性肽之一，慢性糖尿病皮肤创伤修复类药物的研发提供了新的途径，也为促皮肤创伤治疗药物的开发提供了新的方向。
附图说明
[0010]图1为本专利技术环状七肽FZ1的结构式；图2为本专利技术环状七肽FZ1的促人角质形成细胞（HaCaT）划痕修复活性图；图3为本专利技术环状七肽FZ1的促人角质形成细胞（HaCaT）增殖活性图；图4为本专利技术环状七肽FZ1的促人角质形成细胞（HaCaT）迁移活性图；图5为本专利技术环状七肽FZ1对Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤全皮层损伤修复活性图，其中，A为Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤全皮层创口修复变化，B为Ⅱ型糖尿病小鼠皮肤全皮层伤口修复情况的量化。
具体实施方式
[0011]下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步的详细说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或改进，均落入本专利技术的保护范围。
[0012]本专利技术提供了一种环状七肽FZ1，其具有如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列：CQFHYMC，其结构式如式（I）所示：
式（I）。
[0013]本专利技术还提供了所述环状七肽FZ1在制备促皮肤创伤修复药物中的应用。
[0014]所述皮肤创伤为糖尿病慢性皮肤创伤。
[0015]本专利技术进一步提供了一种药物组合物，其包含作为活性剂的所述环状七肽FZ1及其药学上有效的载体。
[0016]实施例1促皮肤创伤修复活性环状七肽FZ1的合成所述环状七肽FZ1的氨基酸序列为CKLSNDC，采用常规化学合成或基因表达的方式制备得到环状七肽FZ1。
[0017]本专利技术环状七肽FZ1由武汉百意欣生物技术有限公司按照设计的环状七肽结构合成。
[0018]实施例2环状七肽FZ1体外促皮肤创伤修复活性检测1、体外角质形成细胞划痕修复活性检测取对数生长期的角质形成细胞消化离心后，用含10% 胎牛血清的DMEM/F12培养基重悬细胞，调整细胞2
´
105/mL、500 μL/孔接种于24孔板中培养。待24孔板中角质形成细胞长满时，用200 μL规格的枪头尖端在孔板中垂直划出一条直线，沿孔壁轻轻加入500 μL PBS冲洗3次。加入450 mL无胎牛血清的DMEM /F12培养基，再分别加入50 μL PBS（control）, rh
‑
bFGF（100 ng/mL，positive control）和FZ1（1 nM）环状七肽处理角质形成细胞划痕。分别于划痕后0 h、12 h和24 h时使用倒置显微镜观察并拍照记录角质形成细胞划痕修复情况。上述实验重复3次，每次重复3个孔，通过Image J软件量化细胞划痕修复面积。计算公式：划痕修复率（%）=（初始无细胞区域面积
‑
不同时间点无细胞区域面积）/初始无细胞区域面积
ꢀ´
100%结果：如图2所示：环状七肽FZ1能够显著促进角质形成细胞的划痕修复,划痕修复率在FZ1处理24 h后达到94.60%。此外，1 nM（2.086 ng/mL）OA
‑
RD17的修复活性显著高于阳性对照100 ng/mL rh
‑
bFGF（87.94%），表明环状七肽FZ1的促皮肤创伤修复效果相当于商业合成的rh
‑
bFGF的49倍，具有良好的研发前景。
[0019]2、体外角质形成细胞增殖活性检测
取对数生长期的上述角质形成细胞经消化后，1000 rpm 离心5 min，加入无血清的培养基重悬细胞，调整细胞密度为5
´
103/mL，90 mL/孔接种于96孔板中，种板4 h细胞贴壁后分别加入10 mL的各组不同环状七肽溶液，培养过夜后每孔再加入10 μL的MTS试剂，继续在5% CO2，37 ℃的细胞培养箱中孵育3 h后用酶标仪在490 nm下测定每孔OD值，记录结果并计算其平均值。实验中控制每孔的吸光度值在0.8~1.2之间，每个细胞的增殖实验至少重复3次，每次6个重复孔，并根据下列公式计算并使用GraphPad Prism软件对数据进行分析和处理。相对细胞增殖率（%）=平均对照组OD490
‑
平均实验组OD490/平均对照组OD本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.环状七肽FZ1，其氨基酸序列为：CQFHYMC，其结构式如式（I）所示：式（I）。2.权利要求1所述环状七肽FZ1在制备促皮肤创伤修复药物中的应用。3.根据权...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨新旺，王滢，付喆，贾秋叶，刘乃心，
申请(专利权)人：云南民族大学，
类型：发明
国别省市：