短肽Fmoc-L-Ser(tBu)-L-Ser(tBu)-OH及其制备方法技术

本发明专利技术公开了结构式如下的短肽Fmoc

【技术实现步骤摘要】
短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH及其制备方法


[0001]本专利技术属于多肽合成
，涉及一种短肽及其制备方法。

技术介绍

[0002]糖尿病是因胰岛素绝对或相对分泌不足以及胰岛素利用障碍引发机体糖、蛋白质、脂质等代谢紊乱性疾病，目前已成为全球性公共健康问题，世界各国糖尿病患者人数逐年增多。作为一类新型降糖药物，索玛鲁肽、利拉鲁肽、贝那鲁肽、度拉糖肽等胰高血糖样肽
‑
1受体激动剂(GLP
‑
1RA)，不仅在降糖方面表现突出，而且在减重、心血管系统获益以及安全性等方面表现出了显著的优势，临床应用越来越广泛。
[0003]目前GLP
‑
1RA主要采用从C端(羧基端)至N端(氨基端)逐个氨基酸偶联制备主肽链多肽序列的固相合成法来制备。从1963年固相多肽合成以来，经过不断的改进和完善，到今天固相合成法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术，其简便、快速，大大减轻了合成人员每步产品提纯的难度。然而固相合成法也存在固有的缺点，例如，需要昂贵的树脂、大大过量的保护氨基酸、溶剂的反复洗涤等，导致成本很高；每一个氨基酸的连接没有提纯，存在氨基酸缺失、氨基酸消旋、氨基酸异构、产生某些常见副产物(二酮哌嗪、3
‑
哌嗪基丙氨酸、异天冬氨酸)等风险，所得粗肽纯度低且提纯困难，导致终产品价格昂贵。如果能预先制备一些短肽片段，例如索玛鲁肽、利拉鲁肽、贝那鲁肽、度拉糖肽的多肽肽序中都含有
‑
Ser
‑
Ser
‑
短肽片段，通过短肽片段的偶联来制备多肽序列可以在一定程度上减少上述问题。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于通过液相合成法制备
‑
Ser
‑
Ser
‑
短肽片段，产物纯度高，成本低，适合工业化大规模生产，所得短肽片段可用于生产多肽药物索玛鲁肽、利拉鲁肽、贝那鲁肽、度拉糖肽等。
[0005]经研究，本专利技术提供如下技术方案：
[0006]1.短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH，具有以下结构式：
[0007][0008]2.所述短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH的制备方法，采用液相合成法，包括以下步骤：
[0009](1)将N
‑
芴甲氧羰基
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸即Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与活化剂HOR在缩合剂存在下于有机溶剂中反应，制得活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR；
[0010][0011](2)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与碱即MOH在溶剂中进行皂化反应，制得中间体O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸M盐即H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM；
[0012][0013](3)将步骤(2)制得的中间体H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM与步骤(1)制得的活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR进行亲核取代反应，制得短肽N
‑
芴甲氧羰基
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酰
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸即Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH；
[0014][0015]上述HOR和Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR中的R为MOH和H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM中的M为Na或K。
[0016]优选的，所述短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH的制备方法，包括以下步骤：
[0017](1)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与活化剂HOR溶于有机溶剂中，控制温度在0℃以下加入缩合剂，加毕，搅拌反应；反应结束后，浓缩，加入石油醚即PET打浆，固液分离，固体干燥，制得活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR；
[0018](2)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与碱MOH溶于溶剂中，搅拌反应；反应结束后，用乙酸乙酯即EA萃取除杂，得到中间体H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM溶液；
[0019](3)将步骤(2)制得的中间体H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM溶液与步骤(1)制得的活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR混合，搅拌反应；反应结束后，用PET萃取除杂，再加入EA萃取，收集EA层，用饱和氯化钠溶液洗涤，酸化到pH＝2～3，再用饱和氯化钠溶液洗涤，无水硫酸钠干燥，固液分离，液体浓缩，加入PET结晶，固液分离，固体干燥，制得短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH。
[0020]在上述技术方案中，
[0021]优选的，所述HOR和Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR中的R为
[0022]优选的，步骤(1)中所述缩合剂为N,N
’‑
二异丙基碳二亚胺即DIC、1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH，其特征在于，具有以下结构式：2.权利要求1所述短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH的制备方法，其特征在于，采用液相合成法，包括以下步骤：(1)将N
‑
芴甲氧羰基
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸即Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与活化剂HOR在缩合剂存在下于有机溶剂中反应，制得活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR；(2)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与碱即MOH在溶剂中进行皂化反应，制得中间体O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸M盐即H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM；(3)将步骤(2)制得的中间体H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM与步骤(1)制得的活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR进行亲核取代反应，制得短肽N
‑
芴甲氧羰基
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酰
‑
O
‑
叔丁基
‑
L
‑
丝氨酸即Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH；上述HOR和Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR中的R为MOH和H
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OM中的M为Na或K。3.如权利要求2所述的短肽Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与活化剂HOR溶于有机溶剂中，控制温度在0℃以下加入缩合剂，加毕，搅拌反应；反应结束后，浓缩，加入石油醚即PET打浆，固液分离，固体干燥，制得活化酯中间体Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OR；(2)将Fmoc
‑
L
‑
Ser(tBu)
‑
OH与碱MOH溶于溶剂中，搅拌反应；反应结束后，用乙酸乙酯即EA萃取除杂，得到中间体H<...

【专利技术属性】
技术研发人员：郑征，曹力智，杨再宽，张东海，杨大成，周星宇，孙梦春，吴惠峰，刘佳琪，杨昆，陈昌华，仲良，姚波，
申请(专利权)人：成都郑源生化科技有限公司，
类型：发明
国别省市：