一种t(8;21)AML的新抗原肽及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种t(8；21)AML的新抗原肽及其应用，所述新抗原肽的氨基酸序列为KVLHSSLVCK。本发明专利技术通过分析，发现AE融合蛋白可以产生上述的新抗原，并可以被HLA

【技术实现步骤摘要】
一种t(8;21)AML的新抗原肽及其应用


[0001]本专利技术涉及生物
，尤其涉及一种t(8；21)AML的新抗原肽及其应用。

技术介绍

[0002]白血病是全球十大高发恶性肿瘤之一，其中急性髓系白血病(acute myelocytic leukemia,AML)的发病率为2
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4/10万人，占成人急性白血病的80％
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90％。AML发病机制复杂，死亡率高，治疗费用昂贵，给社会和患者家庭带来了沉重的经济负担。在急性白血病中染色体易位是最为常见的遗传学异常，其中t(8；21)(q22；q22)在AML中发生率最高，t(8；21)AML占所有AML的10％
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15％，在M2型AML中更是高达40％
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60％。t(8；21)AML的诱导缓解率为85％
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90％，有10％
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15％的患者存在原发耐药，获得缓解的患者中30％
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50％出现复发，即半数以上患者最终成为难治/复发t(8；21)AML，而提升此部分患者的再诱导缓解率，延长其总生存期是临床亟需解决的重大难题。
[0003]基于肿瘤新抗原(Neo
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antigens)的个体化免疫细胞治疗为肿瘤免疫治疗提供了新的思路并成为研究热点。肿瘤新抗原是在肿瘤发生、发展过程中因基因点突变或融合形成的，能被T细胞特异性识别的肿瘤特有的抗原。肿瘤新抗原特异性T细胞在杀伤肿瘤细胞的同时，对正常组织没有交叉免疫反应，不会引起重要器官(如心、肝、肺等)的致命性毒性。细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)是体内自然存在的杀伤肿瘤细胞的最主要免疫效应细胞，新抗原在体内通常会刺激多克隆的CTL产生。靶向新抗原的免疫治疗策略通常采集患者自身淋巴细胞在体外通过新抗原刺激扩增CTL后回输入体内或用疫苗诱导体内的新抗原特异性CTL扩增。
[0004]近年来，靶向肿瘤新抗原的免疫治疗临床研究大多数集中在实体瘤的治疗上，2014年Science杂志报道了一个非常成功案例，研究者将一例晚期胆管癌患者的肺部转移灶切除，获得肿瘤浸润T细胞，并进一步分离出能特异性识别由肿瘤ERBB2IP基因突变产生新抗原的T细胞，先后两次回输经体外扩增的新抗原特异性T细胞使患者获得完全缓解。在非t(8；21)AML的基础研究中，研究者发现t(16；16)AML细胞内存在CBFB
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MYH11融合基因，可以编码产生对应的融合蛋白，来源于融合蛋白的新抗原肽REEMEVHEL可以被HLA
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B*40:01递呈，并诱导新抗原特异性CTL对AML细胞进行杀伤；Dyantha等人的研究显示NPM1基因因移码突变而产生NPM1c蛋白，来源于NPM1c蛋白的新抗原WQWRKSL、CLAVEEVSL和AVEEVSLRK可以在体外刺激特异性CTL扩增，进而识别和杀伤AML细胞。可见，靶向肿瘤新抗原的细胞免疫治疗在非t(8:21)AML的AML治疗中具有潜在的可观疗效。然而，应用新抗原特异性CTL治疗t(8:21)AML的研究尚未见任何报道。因此，进一步开发靶向t(8:21)AML肿瘤新抗原的新抗原肽对于提升难治/复发t(8:21)AML患者的再诱导缓解率，延长其总生存期具有积极意义。
[0005]因此，现有技术还有待于改进和发展。

技术实现思路

[0006]鉴于上述现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种t(8；21)AML的新抗原肽及
其应用，旨在解决目前缺乏靶向t(8:21)AML肿瘤新抗原的新抗原肽的问题。
[0007]本专利技术的技术方案如下：
[0008]一种t(8；21)AML的新抗原肽，其中，所述新抗原肽的氨基酸序列如SEQ.ID NO.1所示。
[0009]所述的t(8；21)AML的新抗原肽，其中，所述新抗原肽被HLA
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A*31:01或HLA
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A*11:01递呈。
[0010]所述的t(8；21)AML的新抗原肽，其中，所述新抗原肽被HLA
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A*31:01或HLA
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A*11:01递呈后，诱导CD8+T细胞产生细胞免疫应答。
[0011]一种t(8；21)AML的新抗原肽的开发方法，其中，包括步骤：
[0012]提供t(8；21)AML细胞的转录组高通量二代测序数据；
[0013]根据所述转录组高通量二代测序数据分析白血病相关融合基因的融合突变，并预测得到候选融合新抗原；
[0014]通过肿瘤特异性抗原预测筛选平台将所述候选融合新抗原与正常蛋白进行比对，筛选获得所述t(8；21)AML的新抗原肽。
[0015]所述的t(8；21)AML的新抗原肽开发方法，其中，所述新抗原肽的氨基酸序列如SEQ.ID NO.1所示。
[0016]一种药物组合物，其中，所述药物组合物包含如上任一所述的新抗原肽。
[0017]所述的药物组合物，其中，所述药物组合物包括药学上可接受的载体或赋形剂，其药用形式可为疫苗。
[0018]一种t(8；21)AML的新抗原肽的应用，其中，将如上任一所述的新抗原肽应用于制备t(8；21)AML抗原特异性的疫苗，或应用于诱导产生所述新抗原肽特异性的细胞毒性T细胞，或应用于制备所述新抗原肽致敏的抗原提呈细胞。
[0019]一种t(8；21)AML的新抗原肽的应用，其中，将如上任一所述的新抗原肽应用于TCR
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T、CAR
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T或CAR
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NK产品的开发。
[0020]一种t(8；21)AML的新抗原肽的应用，其中，将如上任一所述的新抗原肽应用于t(8；21)AML诊断试剂盒的开发。
[0021]有益效果：本专利技术提供了一种t(8；21)AML的新抗原肽及其应用。本专利技术通过对t(8:21)AML细胞系和t(8；21)AML患者原代AML细胞的RNA
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seq数据进行分析，发现AE融合蛋白可以产生新抗原KVLHSSLVCK，并可以被HLA
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A*31:01或HLA
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A*11:01递呈。通过合成KVLHSSLVCK肽段，使用抗原肽
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DC
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CTL培养体系，本专利技术发现了AE融合蛋白所产生的新抗原KVLHSSLVCK可以促进CTL对t(8；21)AML细胞进行有效的杀伤，表明以KVLHSSLVCK为靶点的DC
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CTL细胞免疫治疗疗法对于t(8；21)AML的治疗具有潜在疗效。本专利技术首次通过数据分析和实验验证的方法鉴定出了AE融合蛋白可以产生新抗原，而AE融合蛋白在所有t(8；21)AML患者均存在。因此，靶向AE产生的新抗原肽的DC
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CTL疗法可以覆盖所有的t(8；21)AML患者。故而，上述的新抗原肽可应用于开发t(8；21)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种t(8；21)AML的新抗原肽，其特征在于，所述新抗原肽的氨基酸序列如SEQ.ID NO.1所示。2.根据权利要求1所述的t(8；21)AML的新抗原肽，其特征在于，所述新抗原肽被HLA
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A*31:01或HLA
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A*11:01递呈。3.根据权利要求2所述的t(8；21)AML的新抗原肽，其特征在于，所述新抗原肽被HLA
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A*31:01或HLA
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A*11:01递呈后，诱导CD8+T细胞产生细胞免疫应答。4.一种t(8；21)AML的新抗原肽的开发方法，其特征在于，包括步骤：提供t(8；21)AML细胞的转录组高通量二代测序数据；根据所述转录组高通量二代测序数据分析白血病相关融合基因的融合突变，并预测得到候选融合新抗原；通过肿瘤特异性抗原预测筛选平台将所述候选融合新抗原与正常蛋白进行比对，筛选获得所述t(8；21)AML的新抗原肽。5.根据权利要求4所述的t(8；21)AML的新抗原肽开发方法，其特征在于，所述新抗原肽的氨基酸序列如S...

【专利技术属性】
技术研发人员：王立新，廖卫捷，陈菁鸿，于力，
申请(专利权)人：深圳大学总医院，
类型：发明
国别省市：