一种慢生根瘤菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种慢生根瘤菌及其应用，属于固氮共生微生物技术领域。本发明专利技术的慢生根瘤菌，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.27064。该菌种具有较好的促生特性，并具有很强的耐氮性和广谱性。在减少氮肥施用量的情况下，该菌株能够显著增加盛花期花生的根瘤数、侧枝数、主茎长和果针数，提高成熟期花生的产量，从而为获得适合多种品种花生种植的根瘤菌剂提供了菌种来源，为减少氮肥施用、节约种植成本提供了技术基础，提供了高效稳定促生的微生物种质资源，扩大了我国油料作物共生菌种质资源，为研发高效稳定的微生物肥料以及应用技术提供基础。础。础。

【技术实现步骤摘要】
一种慢生根瘤菌及其应用


[0001]本专利技术属于固氮共生微生物
，具体涉及一种慢生根瘤菌及其应用。

技术介绍

[0002]慢生根瘤菌是一类广泛分布在土壤中的革兰氏阴性细菌。花生能通过与慢生根瘤菌的共生形成根瘤，将空气中的氮气固定为植物能够吸收利用的氨。据统计，根瘤能够为花生提供60～65％的氮素，能够部分替代化学氮肥以满足花生生育对氮素的需求，节氮潜力巨大，同时也能减少化肥对环境的污染。以种植面积490万公顷计算，一个生长季节可节约尿素71万吨，节省开支14.2亿元，省煤106.5万吨。因此，慢生根瘤菌与花生的共生在降低氮肥的施用量、保护环境、节约能源上具有巨大的潜力。
[0003]土壤中氮素含量对根瘤的固氮效率影响较大，当氮素浓度过高时会明显抑制根瘤的固氮作用，且抑制程度同施肥量和施用时间正相关。土壤中过量的氮素通过抑制根瘤菌对植物根部的附着和侵染，通过激活植物体内的氮反馈调控、激素反馈调控和结瘤自动调控系统来减少根瘤的形成。
[0004]目前，我国花生种植存在过量施肥、重氮肥轻磷钾肥等现象，这导致了花生种植土壤氮肥含量过高、慢生根瘤菌
‑
花生共生关系难建立、花生根瘤数量和根瘤固氮效率降低等问题。当共生关系很难建立时，植物的生长和产量将变得更加依赖氮肥，造成了氮肥对环境的进一步破坏以及作物产量和品质很难得到进一步提高。耐氮根瘤菌能够打破这种局面，这类根瘤菌可以在高氮肥土壤中与豆科作物进行结瘤共生，通过固氮作用为植物提供氮源进而降低作物对氮肥的依赖性和需求量，在不施用氮肥或减少氮肥施用量的情况下保证作物高产并改善作物品质。
[0005]虽然花生根瘤菌菌剂在农业生产上有诸多优点，但由于每种花生根瘤菌都具有各自偏好的花生品种，这就导致花生根瘤菌菌剂在生产上的效果极为不稳定。因此，就目前的情况来看，想要推广花生根瘤菌菌剂并扩大菌剂的应用范围难度较大。现阶段所面临的关键问题是，如何筛选获得耐氮能力强、适应范围广、节约氮肥以及促进花生高产的花生根瘤菌菌株，以进一步制备适应于花生种植的根瘤菌菌剂。

技术实现思路

[0006]本专利技术提供了一种慢生根瘤菌(Bradyrhizobium sp.)，所述菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.27064。
[0007]上述慢生根瘤菌具有较好的耐氮性、共生广谱性、促生功能以及节氮促高产能力。基于此，本专利技术提供了上述慢生根瘤菌在植物促生和/或节氮促高产中的应用。
[0008]本专利技术提供了一种根瘤菌菌剂，所述菌剂含有上述慢生根瘤菌。此外，所述菌剂还可含有其它常规辅料。
[0009]上述根瘤菌菌剂的剂型可选自液体菌剂、粉剂或颗粒剂。
[0010]在一个具体实施方案中，所述菌剂具体为液体菌剂，所述液体菌剂是通过采用TY
液体培养基培养上述慢生根瘤菌获得的；所述液体菌剂中慢生根瘤菌的浓度为1
×
10
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～1
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10
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cfu/mL。
[0011]本专利技术提供了上述根瘤菌菌剂在植物促生和/或节氮促高产中的应用。
[0012]上述慢生根瘤菌或根瘤菌菌剂可替代部分氮肥，与磷肥和钾肥组成微生物肥料。基于此，本专利技术提供了上述慢生根瘤菌或根瘤菌菌剂在制备微生物肥料中的应用。
[0013]本专利技术提供了一种微生物肥料，所述肥料含有上述慢生根瘤菌或根瘤菌菌剂。所述微生物肥料还可含有磷肥和钾肥。
[0014]本专利技术提供了一种根瘤菌种衣剂，所述种衣剂由上述慢生根瘤菌菌液、微量元素母液以及羧甲基纤维素钠溶液组成。
[0015]上述慢生根瘤菌菌液是通过采用TY液体培养基培养上述慢生根瘤菌获得的；所述菌液中慢生根瘤菌的浓度为1
×
10
10
～1
×
10
11
cfu/mL。
[0016]上述微量元素母液的组成如下：H3BO
3 2.86g/L，MnSO
4 1.81g/L，CuSO4·
5H2O 0.80g/L，ZnSO
4 0.22g/L，H2MoO
4 0.02g/L，余量为水；其中，所述微量元素的作用是为植物提供营养元素。
[0017]上述羧甲基纤维素钠溶液选自含有终浓度为10g/L羧甲基纤维素钠的水溶液，即溶液浓度为1％。
[0018]本专利技术提供了一种种子包衣方法，步骤如下：
[0019]向上述慢生根瘤菌菌液中添加微量元素母液，混匀，形成混合菌液；然后将混合菌液均匀喷洒在种子表面，阴干；利用羧甲基纤维素钠溶液对阴干的种子再次拌种，进行包衣，阴干。
[0020]上述微量元素母液与慢生根瘤菌菌液的体积比选自1:1000。即向所述菌液中添加的微量元素母液的量可选自：每1000mL所述菌液添加1mL所述微量元素母液。
[0021]上述混合菌液的使用量为150mL/30kg植物种子。
[0022]上述羧甲基纤维素钠溶液的使用量为150mL/30kg植物种子，用于保持根瘤菌的附着和湿度。
[0023]在本专利技术中，所述植物选自豆科植物；优选为花生。
[0024]本专利技术的有益效果为：
[0025]本专利技术提供的慢生根瘤菌，具有较好的促生特性，并具有很强的耐氮性和广谱性，是生物安全菌株。在减少氮肥施用量的情况下，该菌株能够显著增加盛花期花生的根瘤数、侧枝数、主茎长和果针数，提高成熟期花生的产量，从而为获得适合多种品种花生种植的根瘤菌剂提供了菌种来源，为减少氮肥施用、节约种植成本提供了技术基础，提供了高效稳定促生的微生物种质资源，扩大了我国油料作物共生菌种质资源，为研发高效稳定的微生物肥料以及应用技术提供基础。
附图说明
[0026]图1为SBJ24在TY培养基上的菌落形态。
[0027]图2为SBJ24菌体的革兰氏染色图。
[0028]图3为不同浓度KNO3处理下SBJ24接种花生的结瘤情况。
具体实施方式
[0029]1、试验材料
[0030]本专利技术所使用的培养基、试剂及其它材料，如下：
[0031]TY培养基：将胰蛋白胨5g、酵母粉3g和CaCl
2 0.6g溶于适量去离子水，然后用去离子水定容至1000mL，调节pH值至6.8～7.2，琼脂15～20g(固体培养基)，121℃灭菌30min。
[0032]YMA培养基：甘露醇10.0g，K2HPO
4 0.25g，KH2PO
4 0.25g，MgSO
4 0.1g，NaCl 0.1g，酵母提取物3.0g，去离子水1L，pH 6.8～7.0，琼脂15～20g(固体培养基)，121℃灭菌20min。
[0033]血琼脂培养基：蛋白胨18g，酵母粉1g，NaCl 5g，琼脂15～20g，去离子水1000mL，pH6.8～7.2。121℃灭菌20min后，待培养基冷却至50本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种慢生根瘤菌(Bradyrhizobium sp.)，其特征在于，所述菌种保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.27064。2.权利要求1所述慢生根瘤菌在植物促生和/或节氮促高产中的应用。3.一种根瘤菌菌剂，其特征在于，含有权利要求1所述的慢生根瘤菌。4.根据权利要求3所述的根瘤菌菌剂，其特征在于，所述菌剂的剂型选自液体菌剂、粉剂或颗粒剂。5.根据权利要求4所述的根瘤菌菌剂，其特征在于，所述液体菌剂中慢生根瘤菌的浓度为1
×
10
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～1
×
10
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cfu/mL。6.权利要求1所述慢生根瘤菌或权利要求3所述根瘤菌菌剂在制备微生物肥料中的应用。7.一种微生物肥料，其特征在于，含有权利要求1所述慢生根瘤菌或权利要求3所述根瘤菌菌剂。8.一种根瘤菌种衣剂，其特征在于，由慢生根瘤菌菌液、微量元素母液以及羧甲基纤维素钠溶液组成；所述慢生根瘤菌菌液是通过采用TY液体培养基培养权利要求1所述的慢生根瘤菌获得的；所述菌液中慢生根瘤菌的浓度为1<...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴月，杨吉顺，吴正锋，张智猛，郑永美，于天一，吴菊香，李尚霞，
申请(专利权)人：山东省花生研究所，
类型：发明
国别省市：