绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ编码区核苷酸序列制造技术

本发明专利技术涉及从体外培养的绒山羊胎儿成纤维细胞分离的编码４Ｅ－ＢＰ１蛋白的ｃＤＮＡ的核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。本发明专利技术通过比对已知的牛、马、人、小鼠、黑猩猩、猪的４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ的核苷酸序列，找到保守区，然后根据牛４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ序列（ＧｅｎＢａｎｋ登录号ＮＭ＿００１０７７８９３），在不打乱氨基酸编码序列的前提下设计出了一对用于ＲＴ－ＰＣＲ扩增绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ编码区片段的简并引物并用这对引物通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了特异性片段，测序后得到了绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ的编码区的２３２ｂｐ的核苷酸序列和与它的前２３１ｂｐ核苷酸序列对应的氨基酸序列。获得的这２３２ｂｐ的核苷酸序列可进一步用于绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因全长ｃＤＮＡ的克隆及用于通过ＲＴ－ＰＣＲ或杂交的方法检测４Ｅ－ＢＰ１基因的组织表达特异性，也可用于重组表达得到蛋白后制备检测４Ｅ－ＢＰ１的抗体。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
本专利技术涉及一段从体外培养的绒山羊胎儿成纤维细胞分离的编码４Ｅ－ＢＰ１蛋白的ｃＤＮＡ，更具体地说涉及编码４Ｅ－ＢＰ１蛋白质的ｃＤＮＡ编码区核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列。目前应用ＲＴ－ＰＣＲ方法克隆基因并获得相应的核苷酸序列是获得基因（ｃＤＮＡ）核苷酸序列的常用方法。本项专利技术设计了一对引物并应用这对引物通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ的编码区特异性片段，经过测序后得到这一片段的２３２ｂｐ的核苷酸序列，其特征是在还没有绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因核苷酸序列的情况下，通过比较已知的牛、马、人、小鼠、黑猩猩、猪的４Ｅ－ＢＰ１基因的核苷酸序列，找到保守区，然后根据牛４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ序列（ＮＭ＿００１０７７８９３），在不打乱氨基酸编码序列的前提下设计ＰＣＲ简并引物，进而通过ＲＴ－ＰＣＲ方法扩增出了绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ的编码区片段，测序后得到了２３２ｂｐ的核苷酸序列和与它的前２３１ｂｐ的核苷酸序列对应的氨基酸序列，这一绒山羊４Ｅ－ＢＰ１基因ｃＤＮＡ编码区片段的核苷酸序列和与它的前２３１ｂｐ的核苷酸序列对应的氨基酸序列在国内外是首次获得。　　基于上述说明的本专利技术的技术特征，本专利技术的独立权利要求表述为：一种自绒山羊分离的多核苷酸序列和与它对应的氨基酸序列，是下列序列之一：１）序列表中ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１的ｃＤＮＡ序列；２）与序列表中ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：１的ｃＤＮＡ序列的前２３１ｂｐ的核苷酸序列对应的标注为ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：２的氨基酸序列。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：王志钢，刘东军，旭日干，
申请(专利权)人：王志钢，刘东军，旭日干，
类型：发明
国别省市：15[中国|内蒙]