本发明专利技术公开了一种用于筛选治疗脾气虚证药物、评价治疗脾气虚证方法的动物模型的构建方法,包括如下步骤:选取适当的大鼠,称取大鼠体重,每100g体重腹腔注射1.5mL3%戊巴比妥钠溶液1.5mL麻醉大鼠后,用新洁尔灭酊消毒;正中切口入腹,提起盲肠,结扎回结肠血管后,扇形切开肠系膜,用动脉铗夹住拟切除处肠管远近端,楔形切除肠系膜前动脉的回结肠支及右结肠支第一、或第一和第二分支所分布的回结肠肠管,包括介于小肠与结肠之间的盲肠,用新洁尔灭酊消毒,行回肠结肠端端吻合,缝合切口;单笼饲养上述大鼠。按照本发明专利技术方法构建的动物模型与临床症状体征相同或相近、重复性好、稳定性好,并经得起以方(药)测证的检验。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于医疗评价、检测
,具体涉及一种用于筛选治疗脾气虚 证药物、评价治疗脾气虚证方法的动物模型的构建方法。
技术介绍
中医名词脾气虚最早出现于《内经》,见于《灵枢.天年篇》屮"七十岁, 脾气虚,皮肤枯。"又见《灵枢.本神篇》中"脾气虚则四肢不用,五脏不安"。 脾的主要生理功能是主运化,主升清,主统血,主四肢肌肉,为后天之本,气 血升化之源。脾的功能是一个以消化系统功能为主的多系统功能的综合(陈易 新,陈家旭,季绍良.脾气虚证基础研究的理论探讨.中国医药学报,2002, 17(7): 401)。脾气虚证的发生机制,首先是在脾主运化的物质能量转化利用这 个主要环节上(中国中医研究院基础理论研究所.脾气虚证发生机理的实验研究.中医杂志,1993, 34 (12): 744),即脾失运化是脾气虚发生吋最基本的内 涵(潘志恒,吴伟康.脾虚证研究中的若干问题探讨.南京中医药大学学报, 1997, 13 (5): 266),在《体仁汇编.脾藏要性》中讲到"是藏也,实则饮食 消,而肌肉滑泽,虚则身体瘦,而四肢不举"。《千金要方.相脾藏脉法》中提 到"脾虚腹肚胀鸣或泻痢,食多不化"(刘士敬,朱倩.脾气虚诊断的历史溯 源.中医药信息,1997, 4: 3-5)。都说明了 "运化水谷和运化水液"是脾生理 功能的基础,机体消化吸收食物和吸收输布水液作用的减退,构成了中医脾气 虚的基本特征。目前已报道的"脾虚证"(包括脾气虚、脾阴虚)模型有十余种(李得新.深 入研究脾气虚证的思路探讨.中国中医基础医学杂志,1999, 5 (3) :13-15), 绝大多数是用灌胃生大黄或其它药物的方法(陈小野.脾气虚证动物模型规范 化的初步研究.中国医药学报,2001,16 (4) :52-58),使动物出现腹泻、便 溏、食欲下降、活动减少、体重减轻等"脾虚"表现。其它如过度劳倦法、耗 气破气法、饮食失节法、利血平注射法等(郑小伟.论脾虚动物模型的造模要 求与思路.中国中医药信息杂志,1999, 12 (9): 3-4)以及综合上述两种到 三种方法的改进造模法(邹世结,周永生.脾气虚证动物模型规范化的初步 研究一宏观症状部分.中国中西医结合消化杂志,2001, 9 (5): 264-267), 也能建立"脾虚"模型。此类模型虽在一定范围内得到了一定程度的认可,并 被众多后来学者引用或运用,但有其明显的不足之处首先是与临床差距较大。例如灌胃大剂量生大黄以复制脾虚模型的方法, 是许多科研试验中广泛采用的也是较经典的造模方式之一,虽然可以在短期内 模拟出一些较典型的脾虚症状,但临床却鲜见"通下"太过致脾虚的报道,大 黄长期应用的副作用是便秘而非腹泻。其次是重复性差。科研中选用的许多造模方法,在造模类药物的选用标准、 剂量的大小、用药的频率周期都存在着不同程度的差异。而一些模拟中医传统 病因的造模方法如过度劳倦法、饥饱失节法等,在病因的具体模拟乃至造模的 规范上都缺乏统-的标准。因而在对这类模型的具体应用中不可控制因素太多, 客观性和标准性不强,故以此类模型为基础的不同报道之间缺乏可比性。再次是稳定性差。模型的自愈问题是在众多脾气虚证动物模型中普遍存在 的弊病。有学者统计过130个国内报导的脾虚模型中有明确自然恢复时间记录 的有17个(章洪流,王天芳.脾虚证的研究述评.江西中医药,2004, 35(7): 63)。在停药(或停止其他诱因刺激)后动物的"脾虚证"症状迅速改善,模型 的有效周期普遍不长,而相应的以方(药)测证也就缺乏必要的基础(宋玉浩.中 医脾气虚证的现代研究近况与思考.山东中医药大学学报,2001, 5(3): 238-240)。理想的证模型要求成因、表现、转归、疗效等方面符合中医理论,稳定性 好,且容易重复。由于对动物症状、体征采集等方面存在的复杂性和特殊性, 因此要求理想的脾气虚证模型,不仅症状体征相同或相近,更希望能用科学、 微观、量化的客观指标准确表达,并能经得起以方(药)测证的检验(王彩霞.论中医动物模型研究的思路.中国医药学报,1997, 12 (3): 45-47),这方面 的工作还未能引起足够重视。
技术实现思路
针对现有技术的上述不足,本专利技术所要解决的技术问题是提出一种与临床 症状体征相同或相近、重复性好、稳定性好,并经得起以方(药)测证的检验 的。现代生命科学,尤其是动物及人体生理研究表明,在机体对饮食物(包括 水分)的消化吸收过程中,小肠、盲肠、回盲瓣、大肠起重要作用,尤其是回 盲瓣,对控制肠道内水分及其它成分的吸收起重要的调控作用。部分小肠和(或) 回盲瓣切除的病人往往在很长一段时期内表现为大便稀溏、食欲减退、面色萎 黄、消瘦乏力等症状,属中医脾气虚范畴,用健脾益气法治疗能收到较好的疗 效。啮齿类动物具有发达的盲肠,其主要功能是促进纤维素的消化、水分的吸 收,控制肠内容物在体内存留的吋间,对维持机体正常消化吸收功能有重要意义。因此,专利技术人认为切除大鼠部分回盲肠(包括部分小肠、大肠、盲肠及回盲瓣),能建立较为理想的脾气虚证模型。本专利技术提出的,包括如下步骤选取适当的大鼠,称取大鼠体重,每100g体重腹腔注射1. 5mL 3%戊巴比妥钠溶液1. 5mL 麻醉大鼠后,用新洁尔灭酊消毒;正中切口入腹,提起盲肠,结扎回结肠血管 后,扇形切开肠系膜,用动脉铗夹住拟切除处肠管远近端,楔形切除肠系膜前 动脉的回结肠支及右结肠支第一、或第一和第二分支所分布的回结肠肠管,包 括介于小肠与结肠之间的盲肠,用新洁尔灭酊消毒,行回肠结肠端端吻合,缝 合切口;单笼饲养上述大鼠。试验研究表明本专利技术的模型动物饮食、消化、吸收功能减退,正常生长、 发育、代谢、营养等均受影响。通过观察模型动物饮食吸收功能、营养状态和 免疫功能等相关要素,可获取该模型的主要技术参数,对该模型用科学、微观、 量化的客观指标准确表达。动物饮食吸收功能的改变,主要表现在食物中的营 养成分不能充分吸收利用,从大便中排出而丢失,因此,测定大便中水、粗蛋 白、粗脂肪等的含量,可了解动物饮食吸收功能。消化吸收不良,运化失司, 而致四肢肌肉失养。营养不良是脾气虚的基本病理生理改变,通过测定体重变 化、血红蛋白、红细胞等指标,可对营养状态作出客观评估(娄成名.实验动 物学质量管理标准与检验检测技术使用手册.贵州贵州科技出版社,2003:407-412)。研究表明"脾气虚"的另一病理生理改变是机体免疫功能下降(曲长江,刘劲.不同造模方法脾虚小鼠免疫学改变的比较研究.中国中医基础医学杂志,1999, 5 (4): 46-49),尤其是病情严重者,因此,通过检测IgG、 IgM 等免疫学的代表性指标,可对机体的免疫功能作-初步评估,为深入研究打下 基础。动物模型建立后,用治疗脾气虚证的基本方药进行千预,如果能显著改善 模型的脾气虚症状和某些检测指标,则佐证了该模型成立(郑小伟.论中医动 物模型的造型依据与研制方法.浙江中医学院学报,2004, 28 (6): 1-2)。四 君子汤具有益气健脾之功,是临床治疗脾气虚证的经典方,治疗脾气虚证疗效 确切。通过应用经典益气健脾方(四君子汤)进行治疗,脾气虚模型动物的症 状及有关技术参数可获一定程度的改善,该模型的科学性将获进本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种脾气虚证大鼠动物模型的构建方法,其特征在于,包括如下步骤: 选取适当的大鼠,称取大鼠体重,每100g体重腹腔注射1.5mL 3%戊巴比妥钠溶液1.5mL麻醉大鼠后,用新洁尔灭酊消毒; 正中切口入腹,提起盲肠,结扎回结肠血管后,扇形切开肠系膜,用动脉铗夹住拟切除处肠管远近端,楔形切除肠系膜前动脉的回结肠支及右结肠支第一、或第一和第二分支所分布的回结肠肠管,包括介于小肠与结肠之间的盲肠,用新洁尔灭酊消毒,行回肠结肠端端吻合,缝合切口; 单笼饲养上述大鼠。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:章学林,张静喆,顾宏刚,沈平,
申请(专利权)人:上海中医药大学附属龙华医院,
类型:发明
国别省市:31[中国|上海]
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