本发明专利技术属于动物疫苗技术领域，尤其涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ
【技术实现步骤摘要】
一种猪繁殖与呼吸综合征病毒及其应用
[0001]本专利技术属于动物疫苗
，尤其涉及一种猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ
‑
1106R株，还涉及其应用。
技术介绍
[0002]猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)，俗称“猪蓝耳病”，由猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)引起，病毒感染后可以导致母猪流产、返情、产死胎或弱仔、仔猪死亡及各种年龄的猪不同程度的呼吸道症状，并且能破坏猪的免疫系统，引起混合感染或继发感染。因此，研究针对PRRSV变异株的疫苗，势在必行。
[0003]由于PRRSV变异株的高致病性，现在的思路为将PRRSV变异株人工致弱，由人工致弱毒株来制备疫苗。由于人工致弱毒株与原毒株相比具有相似的免疫原性而致病力显著降低，因此，制备的疫苗免疫性能优异，最重要的是安全性高。此外，由于HP
‑
PRRSV和类NADC30毒株的出现，研发对这两类毒株均具有保护力的疫苗是研究的热点和难点。HP
‑
PRRSV与以往流行的PRRSV毒株有较大程度的变异，其中Nsp2基因缺失30个氨基酸(以VR
‑
2332毒株为基准，482位和538
–
566位)常被作为该类变异毒株的标志。类NADC 30毒株特征性的在Nsp2区域缺失了131个氨基酸，分别为323
–
433位置的111个氨基酸，482位置1个氨基酸和534
–
552位置的19个氨基酸，缺失模式为“111+1+19”。
技术实现思路
[0004]针对HP
‑
PRRSV和类NADC30毒株，本专利技术在分离鉴定得到一株中等毒力的PRRSV NJ
‑
1106株的基础上，经连续传代致弱，获得人工致弱毒株NJ
‑
1106R。
[0005]2011年，南京某规模化猪场仔猪表现出温和呼吸道问题，采集出现轻微高烧和咳嗽症状的仔猪的肺脏和淋巴结，分离到一株中等毒力的PRRSVNJ
‑
1106株，经反转录－聚合酶链式反应(RT
‑
PCR)、间接免疫荧光实验(IFA)、全基因测序分析等方法鉴定，证实分离株为PRRSV。经连续传代至150代，获得人工致弱毒株NJ
‑
1106R。
[0006]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒，猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ
‑
1106R株保藏号为：CGMCC No.12008。
[0007]一种猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于在下述氨基酸位点具有如下特点：氨基酸位点以VR
‑
2332毒株为基准，
[0008]①
ORF1a：122位氨基酸是His，151位氨基酸是Ser，780位氨基酸是Asn，799位氨基酸是Asn，1152位氨基酸是Pro，1664位氨基酸是Gly，2109位氨基酸是Phe；
[0009]②
ORF1b：656位氨基酸是Leu，991位氨基酸是Ala；
[0010]③
GP2：10位氨基酸是Phe，51位氨基酸是Val；
[0011]④
GP3：85位氨基酸是Thr；
[0012]⑤
GP4：160位氨基酸是Gly；
[0013]⑥
GP5：55位氨基酸是Phe，64位氨基酸是Ala；
[0014]⑦
N：48位氨基酸是Thr，118位氨基酸是Ile。
[0015]所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒在制备治疗或预防PRRSV感染的药物中的应用。
[0016]所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒在制备预防HP
‑
PRRSV毒株或类NADC30毒株感染的药物中的应用。
[0017]所述药物为疫苗。
[0018]所述药物中含有猪繁殖与呼吸综合征病毒活病毒。
[0019]所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒在制备治疗或预防PRRSV感染引起的体温升高、精神食欲下降、咳嗽、喘或野毒病毒血症药物中的应用。
[0020]所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒在制备预防PRRSV感染引起的肺脏肉变药物中的应用。
[0021]所述的猪繁殖与呼吸综合征病毒在制备产生PRRSV抗体药物中的应用。
[0022]有益效果：
[0023]1、PRRSV弱毒株NJ
‑
1106R经10次返强试验均未引起仔猪发病，说明该弱毒株接种试验动物后10代未发生毒力返强，可以用于疫苗研究；
[0024]2、PRRSV弱毒株NJ
‑
1106R单剂量、单剂量重复接种、10倍超剂量接种仔猪后，体温正常，无任何临床症状，剖检观察肺脏无肉变，证明PRRSV弱毒株NJ
‑
1106R对猪安全性良好；
[0025]3、PRRSV弱毒株NJ
‑
1106R免疫仔猪后体温保持正常，免疫后9天疫苗毒病毒血症消失，说明疫苗毒安全性高；免疫后14天有60％的猪ELISA抗体转阳，21天全部转阳，能够引起机体产生PRRS特异性抗体；
[0026]4、PRRSV弱毒株NJ
‑
1106R能够对HP
‑
PRRSV和类NADC30毒株攻毒提供很好的保护力，为进一步深入开展PRRSV的致病机理和疫苗应用研究提供了一定的物质材料与基础。
[0027]菌种保藏信息
[0028]保藏时间：2016年1月8日
[0029]保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心
[0030]保藏编号：CGMCC No.12008
[0031]保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，邮政编码：100101分类命名：猪繁殖与呼吸综合征病毒。
附图说明
[0032]图1为本专利技术PRRSV NJ
‑
1106N蛋白基因的RT
‑
PCR扩增产物，其中M为DL2,000DNA Marker，1为PRRSV NJ
‑
1106株MARC
‑
145细胞毒液的RT
‑
PCR扩增产物，2为正常MARC
‑
145细胞的RT
‑
PCR扩增产物，3为阴性对照，4为PRRSV阳性对照；
[0033]图2为本专利技术PRRSVNJ
‑
1106的IFA结果，其中A为正常的MARC
‑
145细胞的IFA结果，B为感染PRRSVNJ
‑
1106株的MARC
‑
145细胞的IFA结果；
[0034]图3为本专利技术PRRSV弱毒株NJ
‑<本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于猪繁殖与呼吸综合征病毒NJ
‑
1106R株保藏编号为：CGMCC No.12008。2.一种猪繁殖与呼吸综合征病毒，其特征在于在下述氨基酸位点具有如下特点：氨基酸位点以VR
‑
2332毒株为基准，
①
ORF1a：122位氨基酸是His，151位氨基酸是Ser，780位氨基酸是Asn，799位氨基酸是Asn，1152位氨基酸是Pro，1664位氨基酸是Gly，2109位氨基酸是Phe；
②
ORF1b：656位氨基酸是Leu，991位氨基酸是Ala；
③
GP2：10位氨基酸是Phe，51位氨基酸是Val；
④
GP3：85位氨基酸是Thr；
⑤
GP4：160位氨基酸是Gly；
⑥
GP5：55位氨基酸是Phe，64位氨基酸是Ala；
⑦
【专利技术属性】
技术研发人员：杜以军，吴香菊，齐静，姜丹丹，胡悦，
申请(专利权)人：山东省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。