【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一种条斑紫菜微卫星标记的筛选方法，包括以下步骤： （１）提取条斑紫菜丝状体基因组ＤＮＡ，利用限制性内切酶Ｈａｅ Ⅲ和Ａｆａ Ⅰ对基因组ＤＮＡ进行酶切，电泳检测回收５００－１５００ｂｐ大小的片段；将所述的片段与５’端磷酸化的接头连接，以 上述连接产物为模板，以接头中的短链为引物，利用ＰＣＲ方法进行富集； 所述的接头序列第一链为５’ＴＡＧＴＣＣＧＡＡＴＴＣＡＡＧＣＡＡＧＡＧＣＡＣＡ３’，第二链为５’ＣＴＣＴＴＧＣＴＴＧＡＡＴＴＣＧＧＡＣＴＡ３’； 所述的短链序列为 ５’ＣＴＣＴＴＧＣＴＴＧＡＡＴＴＣＧＧＡＣＴＡ３’； （２）利用生物素标记的（ＧＡ）↓［１５］为探针与上述ＰＣＲ富集产物进行杂交，在离心管内用平衡过的Ｓｔｒｅｐｔａｖｉｄｉｎ Ｍａｇｎｅｓｐｈｅｒｅ磁珠对上述杂交混合物进行吸附，吸附后 将离心管置于磁力架上，去除杂交液，对磁珠进行洗涤，洗脱未结合到磁珠上的ＤＮＡ片段；将洗涤后的磁珠悬浮于ＴＥ溶液中，于９４－９６℃变性，使含有微卫星序列的ＤＮＡ片段脱离磁珠，迅速收集上清，离心得到含有微卫星序列的ＤＮＡ片段；以离心得到的ＤＮＡ片段为模板，以上...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：孔凡娜，茅云翔，杨惠，王莉，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：95[中国|青岛]
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