二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗制造技术

本发明专利技术属于生物技术领域。首先提供了一种由非洲猪瘟病毒P34、P30、P54、A104R、E165R、C129R、P72、X、Y、P8、P15、K205R、K78R、MGF 110

【技术实现步骤摘要】
二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗。

技术介绍

[0002]非洲猪瘟(African swine fever，ASF)是危害世界养猪业的“头号杀手”，流行已逾百年。国内外科学研究表明，ASF灭活疫苗、亚单位疫苗和活载体疫苗仍然没有解决免疫效力问题，虽然基因缺失疫苗解决了免疫效力问题，但存在毒力残留和生物安全风险。非洲猪瘟病毒(African swine fever virus，ASFV)基因组庞大、编码超过150种病毒蛋白，多数功能不清，诱导和激发免疫系统的抗原知之甚少，成为创制免疫效力理想的非洲猪瘟亚单位疫苗的关键问题。
[0003]针对亚单位疫苗，中国专利CN115814071A公开了一种由非洲猪瘟病毒p34、p14、C129R、DP96R、A104R、p54、p17、p22、P72、p30蛋白组成的亚单位疫苗；中国专利CN115702928A公开了一种由非洲猪瘟病毒p34、p14、C129R、DP96R、A104R、p54、p22、P72、p30蛋白组成的亚单位疫苗；中国专利CN112472801A公开了一种非洲猪瘟p30、p54、p72和B602L的亚单位疫苗；中国专利CN111658768A公开了一种包括非洲猪瘟病毒表面囊膜蛋白CD2V和至少选自非洲猪瘟病毒P72蛋白、非洲猪瘟病毒P30蛋白、非洲猪瘟病毒P54膜结构蛋白中一种蛋白的亚单位疫苗。虽然上述研究已经公开了不同抗原组成的亚单位疫苗，但均未系统评价疫苗的免疫保护效力。申请人团队的进一步研究还发现，上述亚单位疫苗涉及的抗原组分，某些具有ADE效应，可能会严重影响亚单位疫苗对非洲猪瘟强毒株的保护效力，所述ADE效应是指病毒特异性抗体与病毒结合后，结合了病毒的抗体可通过Fc段与某些表面表达FcR的细胞结合从而导致病毒进入这些细胞，从而增强了病毒的感染性过程。
[0004]基于上述问题，申请人提供了一种二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗对非洲猪瘟亲本强毒株攻毒具有理想的保护效力。

技术实现思路

[0005]针对上述技术问题，本申请经过大量实验筛选及评价研究，意外的发现了一种二十三组分抗原非洲猪瘟亚单位疫苗，所述亚单位疫苗不仅能够诱导机体产生更好的免疫反应，无生物安全风险，而且在亲本非洲猪瘟强毒株攻毒时能够提供理想的保护效力，具体包括以下内容：
[0006]第一方面，本专利技术提供了一种非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、X蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、Y蛋白、P8蛋白、P15蛋白、K205R蛋白、K78R蛋白、MGF 110
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6L蛋白、L60L蛋白、MGF 110
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4L蛋白、MGF 110
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7L蛋白、I215L蛋白、P14蛋白、P35蛋白、E248R蛋白、A238L蛋白、EP153R蛋白组成；所述X蛋白为DP96R蛋白或DP96R蛋白与P12蛋白的融合蛋白；所述Y蛋白为P22蛋白，或P17蛋白，或P22蛋白与P17蛋白的组合，或P22蛋白与P17蛋白的融合蛋白，或P22蛋白片段与P17蛋白片段的融合蛋白。
[0007]优选地，所述非洲猪瘟病毒为II型非洲猪瘟病毒。
[0008]优选地，所述II型非洲猪瘟病毒为ASFV CN/GS 2018。
[0009]优选地，所述非洲猪瘟病毒P34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述非洲猪瘟病毒P30蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述非洲猪瘟病毒P54蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示；所述非洲猪瘟病毒A104R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；所述非洲猪瘟病毒E165R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示；所述非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述DP96R蛋白与P12蛋白的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示；所述非洲猪瘟病毒C129R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示；所述非洲猪瘟病毒P72蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示；所述非洲猪瘟病毒P17蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；所述非洲猪瘟病毒P22蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示；非洲猪瘟病毒P17蛋白片段与P22蛋白片段的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示；所述非洲猪瘟病毒P17蛋白与P22蛋白的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示；所述非洲猪瘟病毒P8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示；所述非洲猪瘟病毒P15蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示；所述非洲猪瘟病毒K205R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示；所述非洲猪瘟病毒K78R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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5L
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6L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示；所述非洲猪瘟病毒L60L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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4L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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7L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.43所示；所述非洲猪瘟病毒I215L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示；所述非洲猪瘟病毒P14蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示；所述非洲猪瘟病毒P35蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示；所述非洲猪瘟病毒E248R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示；所述非洲猪瘟病毒A238L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示；所述非洲猪瘟病毒EP153R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示。
[0010]优选地，所述非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、X蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、Y蛋白、P8蛋白、P15蛋白、K205R蛋白、K78R蛋白、MGF 110
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6L蛋白、L60L蛋白、MGF 110
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4L蛋白、MGF 110
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7L蛋白、I215L蛋白、P14蛋白、P35蛋白、E248R蛋白、A238L蛋白、EP153R蛋白的组成比例为1
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合由非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、X蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、Y蛋白、P8蛋白、P15蛋白、K205R蛋白、K78R蛋白、MGF 110
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6L蛋白、L60L蛋白、MGF 110
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4L蛋白、MGF 110
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7L蛋白、I215L蛋白、P14蛋白、P35蛋白、E248R蛋白、A238L蛋白、EP153R蛋白组成；所述X蛋白为DP96R蛋白或DP96R蛋白与P12蛋白的融合蛋白；所述Y蛋白为P22蛋白，或P17蛋白，或P22蛋白与P17蛋白的组合，或P22蛋白与P17蛋白的融合蛋白，或P22蛋白片段与P17蛋白片段的融合蛋白。2.如权利要求1所述的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒为II型非洲猪瘟病毒。3.如权利要求2所述的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，其特征在于，所述II型非洲猪瘟病毒为ASFV CN/GS 2018。4.如权利要求3所述的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒P34蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述非洲猪瘟病毒P30蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示；所述非洲猪瘟病毒P54蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.5或SEQ ID NO.7所示；所述非洲猪瘟病毒A104R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示；所述非洲猪瘟病毒E165R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.11所示；所述非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示，所述DP96R蛋白与P12蛋白的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示；所述非洲猪瘟病毒C129R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.17所示；所述非洲猪瘟病毒P72蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.19所示；所述非洲猪瘟病毒P17蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.21所示；所述非洲猪瘟病毒P22蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.23所示；非洲猪瘟病毒P17蛋白片段与P22蛋白片段的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.25所示；所述非洲猪瘟病毒P17蛋白与P22蛋白的融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.27所示；所述非洲猪瘟病毒P8蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.29所示；所述非洲猪瘟病毒P15蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.31所示；所述非洲猪瘟病毒K205R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.33所示；所述非洲猪瘟病毒K78R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.35所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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6L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.37所示；所述非洲猪瘟病毒L60L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.39所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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4L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.41所示；所述非洲猪瘟病毒MGF 110
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7L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.43所示；所述非洲猪瘟病毒I215L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.45所示；所述非洲猪瘟病毒P14蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.47所示；所述非洲猪瘟病毒P35蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.49所示；所述非洲猪瘟病毒E248R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.51所示；所述非洲猪瘟病毒A238L蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.53所示；所述非洲猪瘟病毒EP153R蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.55所示。5.如权利要求1所述的非洲猪瘟病毒抗原蛋白组合，其特征在于，所述非洲猪瘟病毒P34蛋白、P30蛋白、P54蛋白、A104R蛋白、E165R蛋白、X蛋白、C129R蛋白、P72蛋白、Y蛋白、P8蛋白、P15蛋白、K205R蛋白、K78R蛋白、MGF 110
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【专利技术属性】
技术研发人员：郑海学，茹毅，刘华南，郭建宏，田宏，曹伟军，卢炳州，杨帆，申超超，张伟，李亚军，杨洋，石正旺，张克山，何继军，靳野，李丹，朱紫祥，毛箬青，郝荣增，张贵财，党文，马旭升，秦晓东，刘湘涛，
申请(专利权)人：中国农业科学院兰州兽医研究所，
类型：发明
国别省市：