乳制品中甲氧酪胺的检测方法技术

本发明专利技术提供一种用于乳制品中甲氧酪胺的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(a)将所述乳制品与高氯酸溶液混合，以获得第一溶液；(b)将所述第一溶液离心、提取上清液并定容，以获得第二溶液；(c)将所述第二溶液净化、收集洗脱液并且用惰性气体吹至干，以获得残渣；(d)将所述残渣再溶解、进行膜过滤，然后通过液相色谱串联质谱仪进行测定。本发明专利技术的用于乳制品中甲氧酪胺的检测方法不要求苛刻的实验条件，具有更广的适用范围，并且操作简单、检测成本低，具有较强的应用价值。具有较强的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
乳制品中甲氧酪胺的检测方法


[0001]本专利技术涉及食品检测
，具体涉及一种乳制品中甲氧酪胺的检测方法。

技术介绍

[0002]3‑
甲氧基酪胺(3
‑
Methoxytyramine，3MT)是多巴胺的代谢物，属于β
‑
激动剂。它能促进肌肉、骨骼蛋白的合成。但长期服用会产生头痛、胸闷、心悸、肌肉疼痛等中毒症状，甚至导致染色体畸变，诱发恶性肿瘤。用其喂养畜禽时，可使营养成分从脂肪组织向肌肉组织转移，使瘦肉率增加。许多国家禁止使用兴奋剂喂养动物，然而巨大的经济效益，驱使一些不法生产者使用违禁药品，其代谢物会随着食物链的不断传递而逐渐累积到食品中，而人处于食物链的最高端，身体所承受的来自食品的危害也逐渐凸显，所以人们也越来越重视食品的质量安全问题，尤其是兽药残留。农业部出台235号公告《动物性乳制品中兽药最高残留限量》对动物源乳制品中的甲氧酪胺做了不得检出的相应规定。
[0003]然而，目前甲氧酪胺的检测方法适用的分析样本主要是猪肉、猪肝、鸡蛋、虾、血液等。由于乳制品基质复杂等因素，未见到关于乳制品中甲氧酪胺的检测的报道。
[0004]目前，食品中甲氧酪胺的检测方法主要为酶联免疫法、气相色谱
‑
质谱联用法和液相色谱
‑
质谱联用法等。
[0005]酶联免疫法具有检测效率高、选择特异性突出等优点，但相关产品缺乏统一标准，检测结果不稳定，可能存在假阳性问题，不利于推广应用。
[0006]气相色谱
‑r/>质谱联用法检出限相对较高，难以满足实际样品中甲氧酪胺含量低的检测要求，也不利于推广应用。
[0007]液相色谱
‑
质谱联用法由于高灵敏度、低检出限、强专一性等优点成为复杂样品基质中低浓度目标化合物高灵敏分析手段之一。然而，已有报道的关于液相色谱
‑
质谱联用法检测甲氧酪胺的方法主要存在适用范围有限、前处理过程复杂、耗时较长、实验误差较大等问题。
[0008]也有一些报道采用外标法进行定量，但是检测结果难免受到基质效应的影响，且准确性缺乏有效的验证手段。
[0009]因此，迫切需要开发一种前处理简单、快速、方法灵敏度高、准确性高、对操作人员危害较小且适用于乳制品中甲氧酪胺的检测方法。

技术实现思路

[0010]要解决的技术问题
[0011]本专利技术所需解决的问题是填补乳制品中甲氧酪胺检测技术空白，建立一种前处理简单、准确、灵敏度高的乳制品中甲氧酪胺的检测方法。
[0012]解决问题的技术方案
[0013]为解决上述技术问题，本专利技术对乳制品中甲氧酪胺的检测方法进行了研究。
[0014]具体而言，根据本专利技术的一个方面，提供了一种用于乳制品中甲氧酪胺的检测方
法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
[0015](a)将所述乳制品与高氯酸溶液混合，以获得第一溶液；
[0016](b)将所述第一溶液离心、提取上清液并定容，以获得第二溶液；
[0017](c)将所述第二溶液净化、收集洗脱液并且用惰性气体吹至干，以获得残渣；
[0018](d)将所述残渣再溶解、进行膜过滤，然后通过液相色谱串联质谱仪进行测定。
[0019]可选地，步骤(c)中的惰性气体包括氮气、氦气和氩气，优选为氮气。
[0020]可选地，所述高氯酸溶液的pH值为2～4，优选为2.3～3.7，更优选为2.6～3.4，最优选为2.9～3.1。
[0021]可选地，步骤(b)包括将所述第二溶液通过固相萃取柱进行净化，其中，所述固相萃取柱包括强阳离子交换(SCX)固相萃取柱和弱阳离子交换(WCX)固相萃取柱，优选为弱阳离子交换固相萃取柱。
[0022]可选地，所述检测方法使用内标法。
[0023]可选地，所述检测方法使用所述乳制品的基质来配制标准溶液。
[0024]可选地，所述乳制品包括牛奶、发酵乳、冷冻饮品和奶粉。
[0025]可选地，所述乳制品为奶粉，并且步骤(a)包括将所述乳制品、高氯酸溶液和冰乙酸混合，以获得第一溶液。
[0026]可选地，步骤(b)包括将所述第一溶液在0～4℃下离心。
[0027]可选地，步骤(b)包括使用乙酸铵溶液进行定容。
[0028]可选地，步骤(d)包括使用甲酸水溶液将所述残渣再溶解。
[0029]有益效果
[0030]本专利技术的用于乳制品中甲氧酪胺的检测方法不要求苛刻的实验条件，具有更广的适用范围，并且操作简单、检测成本低，具有较强的应用价值。
附图说明
[0031]本专利技术的上述和/或附加的方面和优点通过结合下面附图对具体实施方式的描述而将变得明显和容易理解。
[0032]图1表示根据本专利技术的实施方式的检测方法在牛奶中甲氧酪胺含量为0.5μg/kg的质谱多反应监测(MRM)图。
[0033]图2表示根据本专利技术的实施方式的检测方法在奶粉中甲氧酪胺含量为0.5μg/kg的MRM图。
具体实施方式
[0034]为了进一步对本专利技术中技术特征、目的及有益效果进行更详细的阐述，下面对本专利技术的具体实施方式进行说明，但本专利技术的范围不局限于此。
[0035]本专利技术中所用原料、设备，若无特别说明，均为本领域的常用原料、设备，本专利技术中所用方法，若无特别说明，均为本领域的常规方法。
[0036]本专利技术中，没有特别说明的情况下，％是指重量％。
[0037]示例性地，根据本专利技术的具体实施方式，检测方法可以包括以下具体步骤。
[0038]1.称取试样(牛奶、发酵乳、冷冻饮品)5g(精确到0.0001g)于50mL具塞离心管中，
加入100μL内标工作液(浓度为100ng/mL)，加入20mL高氯酸溶液(pH＝2～4)，经涡旋提取5min。
[0039]注：若试样为奶粉，则称取奶粉2.5g，在加入高氯酸溶液后，需加入40μL冰乙酸混匀后静置20min，后续操作与上述保持一致。
[0040]2.将步骤1所得的混合物以10000～15000r/min的转速在0～4℃下离心10min，取上清液经100mmol/L乙酸铵溶液定容至50mL，待净化。
[0041]3.将步骤2中所得的溶液上样至预先用甲醇、水活化的固相萃取柱，先后采用5mL 40mmol/L乙酸铵溶液、5mL甲醇进行淋洗，并用5mL酸化的乙腈水溶液进行洗脱，收集全部流出液，在40℃下氮吹至近干。
[0042]注：若试样为奶粉，则取步骤(3)中全部溶液进行净化；若试样为其他基质，则取25mL溶液进行净化。
[0043]4.使用1.0mL的0.1％甲酸水溶液将步骤3中所得的残渣再溶解，过0.22μm微孔滤膜，供液相色谱串联质谱仪(或超高效液相色谱
‑
串联质谱仪)测定。
[0044]示例性地，供液相色谱串联质谱仪测定时质谱参数条件如表1所示。...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于乳制品中甲氧酪胺的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：(a)将所述乳制品与高氯酸溶液混合，以获得第一溶液；(b)将所述第一溶液离心、提取上清液并定容，以获得第二溶液；(c)将所述第二溶液净化、收集洗脱液并且用惰性气体吹至干，以获得残渣；(d)将所述残渣再溶解、进行膜过滤，然后通过液相色谱串联质谱仪进行测定。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高氯酸溶液的pH值为2～4。3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，步骤(b)包括将所述第二溶液通过固相萃取柱进行净化，其中，所述固相萃取柱包括强阳离子交换固相萃取柱和弱阳离子交换固相萃取柱，优选为弱阳离子交换固相萃取柱。4.根据权利要求1所述的检测方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：白艳梅，文静，张立佳，谢瑞龙，刘丽君，李翠枝，
申请(专利权)人：内蒙古伊利实业集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：