双特异性信号传导剂及其用途制造技术

本发明专利技术部分地涉及双特异性嵌合蛋白质，所述双特异性嵌合蛋白质基于各种性质，包括例如双重免疫细胞募集和免疫信号递送功能而得以用于多种免疫疗法。用于多种免疫疗法。用于多种免疫疗法。

【技术实现步骤摘要】
双特异性信号传导剂及其用途
[0001]本申请是申请日为2017年2月6日、申请号为201780021264.7、专利技术名称为“双特异性信号传导剂及其用途”的分案申请。
[0002]相关申请的交叉引用
[0003]本申请要求以下美国临时专利申请号的权益：2016年2月5日提交的62/291,769；2016年5月13日提交的62/335,880；2016年10月24日提交的62/411,805；2016年2月5日提交的62/291,772；2016年2月5日提交的62/291,774；2016年5月13日提交的62/335,965；2016年2月5日提交的62/291,776；2016年5月13日提交的62/335,968；2016年5月13日提交的62/335,979；2016年5月13日提交的62/336,030；2016年6月23日提交的62/353,607；和2016年2月5日提交的62/291,779，所述美国临时专利申请的完整内容全部以引用的方式并入本文中。


[0004]本专利技术部分地涉及可以征募效应细胞并且传递信号传导以提供有益作用的嵌合蛋白质。
[0005]对以电子方式提交的文本文件的描述
[0006]与本文一起以电子方式提交的文本文件的内容以引用的方式整体并入本文：序列表的计算机可读格式拷贝(文件名：ORN
‑
009PC_Sequence_listing，记录日期：2017年2月3日；文件大小：386KB)。

技术介绍

[0007]癌症是一个全球性的健康挑战，每年在全世界造成近700万例死亡，而且迄今为止，尽管在药物方面取得了巨大进展，但已证明它在很大程度上无法医治。令人沮丧的是，癌症似乎发展出了回避免疫检测和破坏的策略，从而避过身体对疾病的主要屏障。
[0008]最近已经开发了众多免疫疗法以使身体的免疫系统重新针对癌症。免疫疗法提供了其它治疗形态如化学疗法和放射所缺少的细胞特异性的优点。因而，用于增强基于免疫的疗法的功效的方法可能在临床上是有益的。举例来说，共刺激分子和共抑制分子在调控T细胞免疫应答方面起着重要作用。然而，尽管患者对靶向这些共刺激和共抑制分子的剂的应答令人印象深刻，包括例如引起YERVOY、KEYTRUDA和OPDIVO得到批准的临床试验，但检查点抑制疗法在绝大多数患者中仍然失败了。
[0009]另外，大部分癌症治疗，包括免疫疗法，需要各种剂的复杂方案，每一种剂典型地带来复杂模式的副作用，从而使患者在治疗时的治疗窗口变窄并且使患者更易患其它疾病。
[0010]因此，仍然需要改良的免疫治疗剂，包括能够以多功能方式有效地调节免疫系统的那些免疫治疗剂。

技术实现思路

[0011]在一些方面，本专利技术涉及得以用于多种靶向性细胞方法中的嵌合蛋白质。在一些方面，本专利技术涉及具有两个或更多个靶向部分的嵌合蛋白质，所述靶向部分具有特异性地结合至目标靶标(例如抗原、受体)的识别结构域(例如抗原识别结构域，包括但不限于各种抗体形式，包括单结构域抗体)。所述嵌合蛋白质还包含修饰的(例如突变)信号传导剂(例如，免疫调节剂)，所述修饰的(例如突变)信号传导剂具有一个或多个修饰(例如突变)，所述修饰提供与未修饰的(例如野生型)信号传导剂相比有所改善的安全性。所述靶向部分和所述修饰(例如突变)的信号传导剂任选地通过一个或多个接头连接。
[0012]在各个实施方案中，所述靶向部分具有特异性地结合至目标靶标(例如抗原、受体)，包括在一个或多个免疫细胞上发现的那些靶标的识别结构域，所述免疫细胞可以包括但不限于T细胞、细胞毒性T淋巴细胞、T辅助细胞、天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T(NKT)细胞、抗肿瘤巨噬细胞(例如M1巨噬细胞)、嗜中性粒细胞、B细胞和树突状细胞。在一些实施方案中，所述识别结构域特异性地结合至目标靶标(例如抗原、受体)并且有效地征募一种或多种免疫细胞。在一些实施方案中，所述目标靶标(例如抗原、受体)可见于一种或多种肿瘤细胞上。在这些实施方案中，本专利技术的嵌合蛋白质可以将免疫细胞，例如可以杀死和/或抑制肿瘤细胞的免疫细胞征募至作用位点(作为非限制性实例，如肿瘤微环境)。
[0013]另外，本专利技术的嵌合蛋白质不仅可以直接或间接地征募能增加有益作用，例如抗肿瘤作用的可能性的细胞，而且本专利技术的嵌合蛋白质还可以经由信号传导剂(例如经由干扰素、白介素、TNF、EPO等中的一种或多种)向所述细胞递送重要信号传导。另外，可以使此类信号传导剂突变以便控制信号传导并且提供改善的安全性(例如不以全身毒性为代价)。另外，在各个实施方案中，本专利技术提供了信号传导剂的各种突变，所述突变可以例如调节治疗作用位点处(例如治疗受体处)的活性以及减少或消除非治疗受体处的脱靶结合。即，在一些实施方案中，所述信号传导剂具有减少的受体混杂和受控制的中靶作用。
[0014]在各个实施方案中，所述信号传导剂可以调节被所述靶向部分靶向的一种或多种细胞(例如征募细胞，如疾病细胞和/或效应细胞)。举例来说，所述信号传导剂可以调节所述靶细胞之一或二者(并且所述靶细胞可以是效应细胞和/或疾病细胞)，这取决于所述靶细胞是否表达所述信号传导剂的受体。
[0015]在各个实施方案中，本专利技术的嵌合蛋白质得以用于治疗多种疾病或病症，如癌症、感染、免疫病症、贫血、自体免疫疾病、心血管疾病、创伤愈合、局部缺血相关性疾病、神经退化性疾病、代谢疾病以及许多其它疾病和病症，并且本专利技术涵盖各种治疗方法。
附图说明
[0016]图1在分图A中示出了给C57BL/6小鼠经皮下接种(50μl)6
×
105个B16mCD20cl1黑素瘤肿瘤细胞。当肿瘤达到
±
10mm2的大小(如通过卡尺所测量)时开始用120μg抗PD
‑
L1VHH(120μl)或抗PD
‑
L1VHH与人IFNαQ124R突变体的融合物进行病变周围处理。曲线的顺序与标识处理类型的图例相同(从上到下)(例如PBS是上面的曲线，抗PD
‑
L1是中间的曲线，并且下面的曲线是抗PD
‑
L1VHH与人IFNαQ124R突变体的融合物)。在分图B中：给C57BL/6同窝小鼠经皮下接种(50μl)6
×
105个B16mCD20cl1黑素瘤肿瘤细胞。当肿瘤达到
±
10mm2的大小(如通过卡尺所测量)时开始用30μg所指示的构建体(100μl)进行病变周围处理。黑色箭头指出处
理时间表。曲线的顺序与标识处理类型的图例相同(从上到下)(例如上面的曲线是PBS，中间的曲线是抗CD20VHH与人IFNαQ124R突变体的融合物，并且下面的曲线是双特异性构建体：抗CD20VHH
‑
人IFNαQ124R突变体
‑
抗PD
‑
L1VHH)。
[0017]图2示出了给C57BL/6小鼠经皮下接种(50μl)6
×
105个B1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种嵌合蛋白质，所述嵌合蛋白质包含：(a)两个或更多个靶向部分，所述靶向部分包含特异性地结合至目标抗原或受体的识别结构域；和(b)修饰的信号传导剂，所述修饰的信号传导剂与野生型信号传导剂相比具有赋予提高的安全性的一个或多个突变，其中所述靶向部分和所述修饰的信号传导剂任选地用一个或多个接头连接。2.如权利要求1所述的嵌合蛋白质，其中所述靶向部分中的一个或多个针对肿瘤细胞。3.如权利要求1所述的嵌合蛋白质，其中所述靶向部分中的一个或多个针对免疫细胞。4.如权利要求3所述的嵌合蛋白质，其中所述免疫细胞是选自T细胞、B细胞、树突状细胞、巨噬细胞、嗜中性粒细胞和NK细胞。5.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中(i)所述靶向部分中的一个或多个针对选自T细胞、B细胞、树突状细胞、嗜中性粒细胞、巨噬细胞和NK细胞的免疫细胞；并且(ii)所述靶向部分中的一个或多个针对肿瘤细胞。6.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述识别结构域是全长抗体、单结构域抗体、只有重链的重组抗体(VHH)、单链抗体(scFv)、只有重链的鲨鱼抗体(VNAR)、微蛋白(例如，半胱氨酸结蛋白、打结素)、锚蛋白重复蛋白、安替卡林、阿德奈汀、适配体、Fv、Fab、Fab'、F(ab')2、肽模拟分子、受体的天然配体或合成分子。7.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述识别结构域是单结构域抗体(VHH)或scFv。8.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述识别结构域是V
HH
、人源化V
HH
或骆驼化V
HH
。9.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述识别结构域在功能上调节所述目标抗原或受体。10.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述识别结构域结合但不在功能上调节所述目标抗原或受体。11.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述目标抗原是选自CD8、CD3、CD33、SLAMF7(CS1)、Sirp1α、DNAM和CLEC9A中的一个或多个。12.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述目标抗原是任选地选自PD
‑
1、PD
‑
L1和PD
‑
L2的免疫检查点。13.如权利要求1所述的嵌合蛋白质，其中所述修饰的信号传导剂相对于野生型信号传导剂包含赋予降低的受体亲和力或活性的一个或多个突变。14.如权利要求1所述的嵌合蛋白质，其中所述修饰的信号传导剂相对于野生型信号传导剂包含赋予基本上降低或消除的受体亲和力或活性的一个或多个突变。15.如权利要求1所述的嵌合蛋白质，其中所述修饰的信号传导剂包含(a)相对于野生型信号传导剂赋予基本上降低或消除的受体亲和力的一个或多个突变与(b)相对于野生型信号传导剂赋予降低的受体亲和力或活性的一个或多个突变；并且其中所述受体是不同的。16.如权利要求13所述的嵌合蛋白质，其中所述一个或多个突变允许减弱活性。17.如权利要求16所述的嵌合蛋白质，其中激动活性或拮抗活性有所减弱。
18.如权利要求16或17所述的嵌合蛋白质，其中所述信号传导剂包含将其活性从激动性转化成拮抗性的一个或多个突变。19.如权利要求13所述的嵌合蛋白质，其中所述突变赋予降低的亲和力或活性，所述降低的亲和力或活性能通过连接至一个或多个靶向部分而得以恢复。20.如权利要求14所述的嵌合蛋白质，其中所述突变赋予基本上降低或消除的亲和力或活性，所述基本上降低或消除的亲和力或活性基本上不能通过连接至一个或多个靶向部分而得以恢复。21.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述嵌合蛋白质具有约50KDa或更高的分子质量。22.如上述权利要求中任一项所述的嵌合蛋白质，其中所述嵌合蛋白质基...

【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：弗拉芒区生物技术研究所根特大学，
类型：发明
国别省市：