一种蜂源改造体抗菌肽AC-7及其制备和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种蜂源改造体抗菌肽AC

【技术实现步骤摘要】
一种蜂源改造体抗菌肽AC
‑
7及其制备和应用


[0001]本专利技术涉及一种蜂源改造体抗菌肽AC
‑
7及其制备和应用，属于生物医学


技术介绍

[0002]近年来，由于饲料抗生素在畜禽养殖业中的不合理、不规范使用引起了其在畜禽类产品的残留、环境污染、更为严重的是一些超级耐药细菌的产生。近年来耐药菌株的产生严重限制了畜牧业的可持续发展并对人类公共卫生安全造成了很大的困扰，因此寻求理想的抗生素替代品是十分迫切与必要的。
[0003]抗菌肽具有强大的生理功能，其不仅对细菌生长和繁殖具有抑制和杀灭功能，还能够抗真菌、杀死肿瘤细胞、抗病毒、杀灭寄生虫等作用。例如来源于人类唾液的组蛋白可以抗真菌、蛙源抗菌肽Abaecin对于水产养殖中常见的NNV、VHSV、IPNV、SVCV这几种病毒具有很好的抑制活性、Dermaseptin的一种衍生物对在红细胞内寄生的恶性疟原虫具有杀灭作用，另外在Dermaseptin家族中，DS
‑
01肽段可有效杀灭枯氏锥虫。
[0004]当然天然抗菌肽也存在一定的不足，那就是天然抗菌肽的抑菌活性不够强烈、不稳定、具有一定的毒性。在获得一定的理论基础后，人们开始对抗菌肽进行改造，以期提高其抑菌效果、增强稳定性、降低细胞毒性获得具有优良特性的抗菌肽。例如在早前就有研究将天蚕素、蜂毒素进行杂合，设计出的新杂合肽不仅仅提高了抗菌肽的抑菌活性，还具有杀灭寄生虫的能力。周长林教授等人通过对蛇肽Cathelicidin
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BF(BF
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30)进行改造获得的BF
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16对NDM
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1细菌(NDM
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1是一种主要存在于大肠杆菌和肺炎克雷伯菌的遗传物质，可以使细菌获得极强的抗药性。NDM
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1细菌对碳青霉烯抗生素也具有耐药性，而碳青霉烯类抗生素通常被认为是紧急治疗抗药性病症的最后方法)具有很好的抑菌效果，可作为解决超级耐药菌的候选药物。基于现有的理论知识，人们往往通过以下几种指标对抗菌肽进行改造：净电荷、疏水性、两亲性、螺旋性等。
[0005]抗菌肽的作用机理主要是以抗菌肽与细胞膜之间的相互作用为基础的，净电荷主要影响的是这两者之间的静电相互作用以及抗菌肽的选择性。我们知道细菌的细胞膜中的质膜层大多是磷脂酰甘油(PG)、心磷脂(CL)、磷脂酰丝氨酸(PS)等带负电的物质，革兰氏阳性菌的肽聚糖层还带有负电的脂多糖。这些带负电的物质就有利于能够维持抗菌肽与细菌细胞膜之间的静电相互作用。而哺乳动物细胞膜组成主要是电中性的磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、鞘磷脂(SM)。其膜表面上含有能够保持磷脂双分子层稳定的的胆固醇。这也是抗菌肽选择性的基础。但是并不是抗菌肽表面所带的正电荷越多，对细菌的抑制作用就越强。其存在一定的阈值，超过阈值时，抑菌活性将降低。有研究表明，对于含有10～20个氨基酸残基的短肽来说，阳离子＞+6时，抗菌活性就不随着阳离子的增加而增强。
[0006]疏水性对于细胞的选择性影响也比较大，在现在所认为的抗菌肽抑菌机理中，抗菌肽的疏水面与细胞膜磷脂双分子层疏水部分的疏水相互作用扮演着重要的角色。在一定的范围内疏水相互作用增加，其抗菌活性也会增加，但是两者之间并不是简单的线性关系。
若疏水性过大，抗菌肽自身发生聚集，以沉淀的形式析出，抗菌活性降低且溶血性增强。若疏水性降低，则抗菌肽的疏水面与细胞膜的疏水部分作用力降低，活性下降。
[0007]两亲性在抗菌肽与细胞膜的绑定过程中发挥着重要的作用，使细胞具有较好的选择性。对于抗菌肽活性而言，疏水区域与亲水区域的相对含量是疏水性、两亲性、螺旋性这三者中最为重要的。
[0008]抗菌肽的螺旋性虽然对抗菌活性影响较小，但其对抗菌肽毒性的影响较大。有研究表明，用D—型氨基酸替代L—型氨基酸对抗菌肽螺旋性进行改造，结果发现抗菌肽活性不变且溶血性下降，可认为这是一种有效降低抗菌肽毒性的方法。还有一个对于螺旋性影响较大的因素就是氨基酸的螺旋倾向性，通常认为脯氨酸、甘氨酸具有较低的螺旋倾向性，尤其是脯氨酸可毁坏α
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螺旋结构，有研究认为，随着肽链长度的增加，脯氨酸的含量增加，不利于α螺旋结构的产生。在设计螺旋型抗菌肽氨基酸序列时，通常不对两种氨基酸加以考虑。

技术实现思路

[0009]本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种蜂源改造体抗菌肽AC
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7及其制备和应用。
[0010]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种蜂源改造体抗菌肽AC
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7，其氨基酸序列为：Leu
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Leu
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Arg
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Arg
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Trp
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Lys
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Lys
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Leu
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Phe
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Lys
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Lys
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Ile
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Ile
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Arg
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Trp
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Pro
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Arg
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Pro
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Leu
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Pro
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Asn
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Pro
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Gly
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His
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NH2。
[0011]进一步的，上述蜂源改造体抗菌肽AC
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7是根据抗菌肽Abaecin的氨基酸序列经过改造获得的，抗菌肽Abaecin的氨基酸序列为：Phe
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Val
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Pro
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Tyr
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Asn
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Pro
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Pro
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Arg
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Pro
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Gln
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Gln
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Ser
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Lys
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Pro
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Phe
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Pro
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Ser
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Phe
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Pro
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Gly
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His
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Gln
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Pro
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Phe
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Asn
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Pro
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Lys
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Ile
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Gln
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Trp
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Pro
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Tyr
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Pro
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Leu
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Pro
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Asn
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Pro
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Gly
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His
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NH2。
[0012]进一步的，上述蜂本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种蜂源改造体抗菌肽AC
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7，其特征在于：其氨基酸序列为： Leu
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Leu
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Arg
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Arg
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Trp
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Lys
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Lys
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Leu
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Phe
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Lys
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Lys
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Ile
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Ile
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Arg
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Trp
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Pro
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Arg
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Pro
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Leu
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Pro
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Asn
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Pro
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Gly
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His
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NH2。2.根据权利要求1所述的一种蜂源改造体抗菌肽AC
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7，其特征在于：所述蜂源改造体抗菌肽AC
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7是根据抗菌肽Abaecin的氨基酸序列经过改造获得的，所述抗菌肽Abaecin的氨基酸序列为：Phe
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Val
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Pro
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Tyr
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Asn
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Pro
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Pro
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Arg
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Pro...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩金志，杨捷，倪莉，吕旭聪，武培汾，陈舜娴，林雅艺，翁燕琳，陈治颖，于丰凡，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：