本发明专利技术提供了一种基于化痰生物效价测定的川贝母品质评价方法，它是将川贝母的原生药粉或水提取物施用于人工痰液中，通过测定人工痰液的初始粘度值和混合均匀后120min后的粘度值，根据粘度值变化情况，再以乙酰半胱氨酸的化痰效价作为参比效价，得到川贝母的化痰生物效价。本发明专利技术还提供了一种川贝母品质优劣的评价方法。本发明专利技术提供的一种简单实用的川贝母化痰生物效价测定方法，与现有的川贝母质量评价方法相比，本方法的检测指标关联临床功效，所测结果能够直观反映不同来源川贝母的化痰功效强弱，所测结果有益于指导临床合理用药，保障川贝母临床疗效稳定性和安全性。保障川贝母临床疗效稳定性和安全性。保障川贝母临床疗效稳定性和安全性。
【技术实现步骤摘要】
一种基于化痰生物效价测定的川贝母品质评价方法及应用
[0001]本专利技术涉及一种川贝母的化痰生物效价的测定方法，属于中药材质量评价与控制、质量标准领域。
技术介绍
[0002]川贝母为我国传统名贵中药材之一，是百合科植物川贝母Fritillaria cirrhosa D.Don、暗紫贝母F.unibracteata Hsiao et K.C.Hsia、甘肃贝母F.przewalskii Maxim.、梭砂贝母F.delavayi Franch.、太白贝母F.taipaiensis P.Y.Li或瓦布贝母F.unibracteata Hsiao et K.C.Hsia var.wabuensis(S.Y.Tang et S.C.Yue)Z.D.Liu,S.Wang et S.C.Chen的干燥鳞茎，具有很高的药用价值和大健康产品开发潜力。其味苦、甘，性微寒，归肺、心经，具有清热润肺、化痰止咳、散结消痈的功效，主要用于治疗肺热燥咳、干咳少痰、阴虚劳嗽、痰中带血、瘰疬、乳痈、肺痈等。近年来，随着对川贝母研究的逐渐深入，其化学成分和药理作用取得了一定进展，研究人员已从川贝母中分离出生物碱、有机酸及其酯、核苷、甾醇及其苷、多糖、挥发油、微量元素等化学成分。药理作用主要集中在镇咳、平喘、抗炎抗菌、抗氧化等方面。然而，当前川贝母在质量评价与控制研究方面非常薄弱，《中国药典》2020年版规定川贝母干燥品中总生物碱以西贝母碱计不得少于0.050％，现行质量标准以化学评价为主，评价指标较单一且不能直观反映川贝母化痰功效的强弱，无法满足当前中药质量控制及评价要求。目前，
‑
有文献报道通过寻找发挥药理活性的质量标志物来评价药材的质量，如崔治家等，川贝母化学成分和药理作用研究进展及质量标志物的预测分析，中草药2021年5月第52卷第9期，由于涉及川贝母多种功效(镇咳、祛痰、平喘、镇静镇痛、抗炎抗菌、抗氧化、抗肿瘤)，加之川贝母中化学成份复杂，难以通过化学评价模式来直接表征不同来源川贝母的药效差异。迫切需要一种简便、有效的生物评价模式(生物效价测定方法)，能够准确区分、评价不同来源川贝母的质量差异(化痰药效差异)。
技术实现思路
[0003]本专利技术的技术方案是提供了一种基于化痰生物效价测定的川贝母品质评价方法，本专利技术还提供了基于该评价方法下的不同基原川贝母的优质性评价方法。
[0004]本专利技术提供了一种川贝母的化痰生物效价的测定方法，它是将川贝母的原生药粉或水提取物施用于人工痰液中，通过测定人工痰液的初始粘度值和混合均匀后120min后的粘度变化值，再以乙酰半胱氨酸的化痰效价作为参比效价，得到川贝母的化痰生物效价。
[0005]包括如下步骤：
[0006]a、制备人工痰液；
[0007]b、测定乙酰半胱氨酸的化痰效价作为参比效价：取10ml含药量为0.06g
·
ml
‑1乙酰半胱氨酸水溶液，与人工痰液反应120min后，粘度下降0.1mPa
·
s表示该测试样品的化痰生物效价为100U
·
g
‑1；
[0008]c、测定川贝母的化痰生物效价：取川贝母的原生药粉或水提取物施用于人工痰液
中，测定粘度初始值N
H
，放置120min后，测定粘度值N
t
，川贝母的化痰功能生物效价U为：U＝(N
H
‑
N
t
)
×
100U
·
g
‑1。
[0009]其中，所述的人工痰液的制备方法为：
[0010]a、配制人工痰液培养基：以鱼精DNA、猪胃II型黏蛋白、氨基酸、氢氧化钾、二乙三胺五乙酸、氯化钠、氯化钾、鸡蛋黄为原料制备而成；
[0011]b、选择细菌病原体，进行菌株活化、培养；
[0012]c、将a步骤制备的人工痰液培养基和培养好的细菌密度为1
×
108CFU
·
mL
‑1的菌悬液按照100：1.5
‑
2的体积比混合，在恒温震荡培养箱中以37℃、180r
·
min
‑1培养12小时，即得人工痰液。
[0013]其中，b步骤所述的细菌病原体是铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌。
[0014]其中，所述的细菌病原体的添加用分别为：每100ml人工痰液培养基中添加铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的量为1.5、2、2ml。
[0015]其中，c步骤所述的川贝母的原生药粉或水提取物的体积与痰液的体积比为：5
‑
15︰15
‑
25。
[0016]其中，c步骤所述的待测药物的体积与c步骤所述的痰液的体积比为：10︰20。
[0017]本专利技术还提供了一种川贝母品质优劣的评价方法，它是采用上述川贝母的化痰功能生物效价的评价方法进行评价，其中：
[0018]太白贝母的化痰效价高于800U
·
g
‑1时为一等品，低于800U
·
g
‑1时为二等品；
[0019]暗紫贝母的化痰效价高于700U
·
g
‑1时为一等品，低于700U
·
g
‑1时为二等品；
[0020]瓦布贝母的化痰效价高于900U
·
g
‑1时为一等品，低于900U
·
g
‑1时为二等品；
[0021]梭砂贝母的化痰效价高于500U
·
g
‑1时为一等品，低于500U
·
g
‑1时为二等品；
[0022]甘肃贝母的化痰效价高于800U
·
g
‑1时为一等品，低于800U
·
g
‑1时为二等品；
[0023]卷叶贝母的化痰效价高于600U
·
g
‑1时为一等品，低于600U
·
g
‑1时为二等品。
[0024]通过检测同一基原的川贝母的化痰效价，可以实现快速分级。
[0025]本专利技术提供了一种简单实用的川贝母化痰生物效价测定方法，与现有的川贝母质量评价方法相比，本方法的检测指标关联临床功效，所测结果能够直观反映不同来源川贝母的化痰功效强弱，所测结果有益于指导临床合理用药，保障川贝母临床疗效稳定性和安全性。
附图说明
[0026]图1灭菌后的人工痰液培养基
[0027]图2人工痰液培养基(A)、人工痰液(B)
[0028]图3 4种药物的化痰效果随时间变化曲线
[0029]图4太白贝母1
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6年生样品的化痰效价
[0030]图5暗紫贝母1
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6年生样品的化痰效价
[0031]图6瓦布贝母1
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6年生样本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种基于化痰生物效价测定的川贝母品质评价方法，其特征在：它是将川贝母的原生药粉或水提取物施用于人工痰液中，通过测定人工痰液的初始粘度值和混合均匀后120min后的粘度值，根据粘度值变化情况，再以乙酰半胱氨酸的化痰效价作为参比效价，得到川贝母的化痰生物效价。2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于：包括如下步骤：a、制备人工痰液；b、测定乙酰半胱氨酸的化痰效价作为参比效价：取10ml含药量为0.06g
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ml
‑1乙酰半胱氨酸水溶液，与人工痰液反应120min后，粘度下降0.1mPa
·
s表示该测试样品的化痰生物效价为100U
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g
‑1；c、测定川贝母的化痰生物效价：取川贝母的原生药粉或水提取物施用于人工痰液中，测定粘度初始值N
H
，放置120min后，测定粘度值N
t
，川贝母的化痰功能生物效价U为：U＝(N
H
‑
N
t
)
×
100U
·
g
‑1。3.根据权利要求1或2所述的评价方法，其特征在于：所述的人工痰液的制备方法为：a、配制人工痰液培养基：以鱼精DNA、猪胃II型黏蛋白、氨基酸、氢氧化钾、二乙三胺五乙酸、氯化钠、氯化钾、鸡蛋黄为原料制备而成；b、选择细菌病原体，进行菌株活化、培养；c、将a步骤制备的人工痰液培养基和培养好的细菌密度为1
×
108CFU
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mL
‑1的菌悬液按照100：1.5
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2的体积比混合，在恒温震荡培养箱中以37℃、180r
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‑1培养12小时，即得人工痰液。4.根据权利要求3所述的评价方法，其特征在于：b步骤所...
【专利技术属性】
技术研发人员：谭鹏，谢俊杰，
申请(专利权)人：四川省中医药科学院，
类型：发明
国别省市：
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