一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺制造技术

本发明专利技术提供了一种微流控试剂盘的微球冻干工艺，包括如下步骤：配制试剂混合液，并添加与所述试剂混合液体积比为1:1的甘露醇、异丙醇、乳糖、脯氨酸和赖氨酸的混合液，滴入液氮中形成微球，再进行冷冻干燥，得到冻干微球。本发明专利技术的微球冻干工艺通过对冻干工艺过程中涉及的试剂以及操作参数进行更为精确的控制，使得得到的冻干微球稳定性好，保存时间长，检测灵敏度、准确度高。准确度高。

【技术实现步骤摘要】
一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺


[0001]本专利技术涉及微流控试剂盘应用领域，具体而言，涉及一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺。

技术介绍

[0002]微流控试剂盘主要通过微流控的方式处理或操纵微小流体，能够实现全血分离，具有集成度高、检测速度快、检测精度高、检测成本低等特点。而且运用盘片设计，可以进行平行化操作，即可同时对多个检测单元实现微流体的控制和检测，容易实现自动化，适用于多指标或多样本检测，可用于中通量或高通量的样品测定。
[0003]试剂盘操作的过程中任何一个环节出问题都会影响到整个检测的准确性，尤其是试剂微球的稳定性不佳的情况下，直接影响到整个微流控试剂盘的检测效率，还会影响到最终样本检测的灵敏度、准确性。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺，通过对冻干工艺过程中涉及的试剂以及操作参数进行更为精确的控制，使得得到的冻干微球在后续使用过程中稳定性好，保存时间长，检测灵敏度、准确度高，复溶性极强，遇到样本液体很快就能溶解。
[0005]为了实现本专利技术的上述目的，特采用以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺，包括如下步骤：
[0007]配制试剂混合液，并添加与所述试剂混合液体积比为1:1的甘露醇、异丙醇、乳糖、脯氨酸和赖氨酸的混合液，滴入液氮中形成微球，再进行冷冻干燥，得到冻干微球。
[0008]优选地，作为进一步可实施的方案，以质量份数计，甘露醇7/>‑
10份、异丙醇4
‑
6份、乳糖3
‑
7份、脯氨酸2
‑
10份、赖氨酸2
‑
5份。
[0009]优选地，作为进一步可实施的方案，以质量份数计，甘露醇8
‑
9份、异丙醇4.5
‑
5.5份、乳糖4
‑
6份、脯氨酸4
‑
8份、赖氨酸3
‑
4份。
[0010]优选地，作为进一步可实施的方案，甘露醇8份、异丙醇5份、乳糖5份、脯氨酸6份、赖氨酸3份。
[0011]本专利技术的微球冻干工艺中，通过将甘露醇、异丙醇、乳糖、脯氨酸以及赖氨酸添加到实际混合液中，提高了活性成分本身的稳定性，尤其是脯氨酸以及赖氨酸的互配达到很好的抗冻效果，甘露醇与异丙醇的复配提高了活性成分的稳定性，对活性成分本身起到了很好的保护作用，且阻止了冷冻过程中pH的剧烈变化，乳糖的添加能够加强稳定效果，阻止活性成分在冷冻干燥过程中结的构改变，且上述成分的添加均不会影响到试剂本身检测作用的发挥。
[0012]当然，通过不断实践后，发现复配的特定成分以及每个成分控制的用量均是经过优化过的，尤其是甘露醇以及异丙醇的特定搭配，以及脯氨酸和赖氨酸的特定搭配，如果换
成其他组分发现并不能产生如此好的协同增效效果。加量方面也是根据其具体操作过程中微球的稳定性进行不断的摸索，相当于试剂混合液的加量来说，甘露醇以及异丙醇的组合中甘露醇可相对加量多一些，脯氨酸和赖氨酸的特定组合中脯氨酸的加量会多一些，按照这个趋势进行组合搭配，最终能够显著的提高冻干微球的稳定性、成型性以及后续检测使用的准确性。
[0013]优选地，作为进一步可实施的方案，冷冻干燥的程序分多阶段进行，其中第一冷冻干燥阶段的时间为3
‑
4h，温度为
‑
35～
‑
50℃。
[0014]优选地，作为进一步可实施的方案，冷冻干燥的程序分三阶段进行，第二冷冻干燥阶段的时间为7
‑
8h，温度为
‑
20～
‑
30℃，第三冷冻干燥阶段为干燥阶段，时间2
‑
3h，温度为10
‑
30℃。
[0015]优选地，作为进一步可实施的方案，冷冻干燥的程序在真空度为50
‑
150ubar的条件下进行。
[0016]为了提高微球的稳定性，本专利技术对于整个冷冻干燥过程进行了程序上的控制，分为多个阶段进行，每个阶段调整冷冻干燥的温度以及冷冻干燥的时间，这样通过精确的控制温度以及时间从而实现整个微球在冷冻干燥过程中活性成分不容易流失，不容易开裂，成型性好。
[0017]优选地，作为进一步可实施的方案，在试剂混合液中添加竹醋液以及柠檬酸。
[0018]优选地，作为进一步可实施的方案，所述竹醋液的添加量为0.1
‑
0.5质量份数。
[0019]优选地，作为进一步可实施的方案，所述柠檬酸的添加量为0.3
‑
0.7质量份数。
[0020]上述方案中，操作过程中冻干微球由于在真空下进行干燥，因此受氧气的影响很小，如果出箱放入空气，空气中的氧气会立即侵入干燥产品的间隙之中，一些活性基团会很快与氧结合，对产品产生不可逆转的影响；为了避免上述情况，现有技术中有些产品采用隋性气体，例如氮气密封，有些产品采用真空密封，但是这种方式并不长效，一旦暴露空气又会影响到微球本身试剂的品质，很容易使得试剂进行使用的时候由于某些活性成分受到氧的影响，影响准确率。本专利技术通过在冻干工艺的过程中添加竹醋液以及柠檬酸，通过两者协同作用加强了微球本身的稳定性，提高其抗氧性，发现即使将微球暴露于空气中也不会影响到微球本身的品质，保证整个检测过程准确无误的进行，当然竹醋液以及柠檬酸的加量通过摸索之后发现加量不需要太大，只需要少量的添加就能产生相应的效果，加量太大不仅会对微球本身的活性组分影响，而且也不利于后续冻干微球的保存，因此具体加量还是需要控制在适宜的范围内。
[0021]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0022](1)本专利技术的微球冻干工艺涉及的试剂以及操作参数进行更为精确的控制，使得得到的冻干微球在后续使用过程中稳定性好，保存时间长，检测灵敏度、准确度高。
[0023](2)通过采用本专利技术的微球冻干工艺制备得到的微球复溶性极强，遇到样本液体很快就能溶解。
[0024](3)本专利技术的微球冻干工艺制备得到的微球即使在空气气氛下放置保存，其也不容易受到氧气的影响从而影响到微球的品质，降低了储存的难度，提高了微球本身的稳定性。
具体实施方式
[0025]下面将结合实施例对本专利技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本专利技术，而不应视为限制本专利技术的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
[0026]实施例1
[0027]微流控试剂盘的微球冻干操作方法按照如下步骤进行：
[0028](1)将含有生物试剂的原料从冰柜中取出，放置在室温中缓慢融化，切勿采用加热融化的方式以防止生物原料破碎；
[0029](2)放入搅拌器中进行高速搅拌，于4℃、8000rpm的低温高速离本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于微流控试剂盘的微球冻干工艺，其特征在于，包括如下步骤：配制试剂混合液，并添加与所述试剂混合液体积比为1:1的甘露醇、异丙醇、乳糖、脯氨酸和赖氨酸的混合液，滴入液氮中形成微球，再进行冷冻干燥，得到冻干微球。2.根据权利要求1所述的微球冻干工艺，其特征在于，以质量份数计，甘露醇7
‑
10份、异丙醇4
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6份、乳糖3
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7份、脯氨酸2
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10份、赖氨酸2
‑
5份。3.根据权利要求1所述的微球冻干工艺，其特征在于，以质量份数计，甘露醇8
‑
9份、异丙醇4.5
‑
5.5份、乳糖4
‑
6份、脯氨酸4
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8份、赖氨酸3
‑
4份。4.根据权利要求1所述的微球冻干工艺，其特征在于，甘露醇8份、异丙醇5份、乳糖5份、脯氨酸6份、赖氨酸3份。5.根据权利要求1
‑
4任一项所述的微球冻干工艺，其特征在于，冷冻干燥的程序分多阶段进行，其中第一冷冻干燥阶段的时间为3<...

【专利技术属性】
技术研发人员：顾问，唐境，黄晨珠，韦晶晶，余程明，
申请(专利权)人：广州聚焦生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：