一种快速高效准确的橡胶树品种鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种快速高效准确的橡胶树品种鉴定方法，其是依据ＳＳＲ标记具有多态性高、重复性好等特性，在橡胶树品种ＤＮＡ水平上产生多态性的ＤＮＡ指纹图谱的特性，通过比较分析，从中筛选出各品种的特异性ＤＮＡ指纹图谱，建立各品种的特征指纹库，从而将各品种逐一区分开，其过程包括：１）品种标准指纹图谱库的建立；２）品种检测与鉴定。本发明专利技术工艺过程简单，通过绘制橡胶树品种的ＤＮＡ指纹图谱，建立了一种快速、简便、准确的基于ＤＮＡ水平的橡胶树品种鉴别方法，可用于进行橡胶树品种鉴别，解决生产中品种鉴定难的问题，并能对橡胶树品种进行知识产权保护提供依据。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速高效准确的橡胶树品种鉴定方法，其特征在于：其步骤如下：　１）、品种标准指纹图谱库的建立　①、分别用５对ＳＳＲ引物（ｒｂｍ２４、ｒｂｍ３６、ｒｂｍ５０、ｒｂｍ５５、ｒｂｍ７３）对全部１３５个橡胶树品种进行ＰＣＲ扩增，在ＡＢ Ｉ３７３０基因分析仪上对扩增产物进行检测，获得各品种对应于每个ＳＳＲ位点的各个等位位点的带型分布，并对每条带进行编号；　所述引物序列为：　ｒｂｍ２４Ｆ：ａｔｃｔｇｃａｔａａｔａｇｔｔｇｔａａｃｃａｃａ　ｒｂｍ２４Ｒ：ａｇｃ ｔｃｔｃａｔｃａｔａｇｔｇａａｇｔｔｃｔｇｇ　ｒｂｍ３６Ｆ：ｃａｔｃｔｃｃａｃｃ　ａｃｃｔａｃａ　ｒｂｍ３６Ｒ：ａｇｇａｇａｇｃａａ　ｔａａｃｃａａｃ　ｒｂｍ５０Ｆ：ａｔｃａａｇｃａａａ　ｇａａａｃｃｔｃ　ｒｂｍ５０ Ｒ：ｇｔａａｇｔｇｃｔｃ　ａａｃｃｔｃｔｇｔ　ｒｂｍ５５Ｆ：ｔａｔｇｇｃｔａｔｇｔｔｃｔｇｃｔａｔｇｃ　ｒｂｍ５５Ｒ：ｇｇａｃｔｃｔｔｇａ　ｔｇａｔｔｔｔｇｇｔｔ　ｒｂｍ７３Ｆ：ｔｃｇｇｔｔｇｇｔｔｔａｃｃａｔｇａｃａ　 　ｒｂｍ７３Ｒ：ａｃａｔｃａｃａｔｇａｇｔｇｔａｔｃｔｇａｔｃｔｃ　②、依据引物在所有品种中的多态性指数高低将５个引物进行排序，５对引物的排列顺序为：ｒｂｍ３６＞ｒｂｍ２４＞ｒｂｍ５５＞ｒｂｍ５０＞ｒｂｍ７３；　③、分别分析各 引物在所有品种中的扩增带型，建立４０个品种的特异指纹图谱，将这些品种与其它品种区分开；　④、选取多态性较强的引物ｒｂｍ３６和ｒｂｍ２４形成引物组合，分析这一引物组合在剩余的９５个品种中的带型，可建立５５个品种的特异指纹图谱，将这些品种 与其它品种区分开；　⑤、选取引物ｒｂｍ３６、ｒｂｍ２４和ｒｂｍ５５形成引物组合，分析这一引物组合在剩余的４０个品种中的带型，可建立３１个品种的特异指纹图谱，将这些品种与其它品种区分开；　⑥、选取引物ｒｂｍ３６、ｒｂｍ２４、ｒｂｍ ５５和ｒｂｍ５０形成引物组合，分析这一引物组合在剩余的９个品种中的带型，可建立６个品种的特异指纹图谱，将这些品种与其它品种区分开；　⑦、选取引物ｒｂｍ３６、ｒｂｍ２４、ｒｂｍ５５、ｒｂｍ５０和ｒｂｍ７３形成引物组合，分析这一引物组合在 剩余的３个品种中的带型，可建立这３个品种的特异指纹图谱，将这３个品种与其它品种区分开；　⑧、将用５个引物建立的１３５个品种的特...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：安泽伟，程汉，黄华孙，
申请(专利权)人：中国热带农业科学院橡胶研究所，
类型：发明
国别省市：66[中国|海南]