一种降解亚硝酸盐的复合微生物菌剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种降解亚硝酸盐的复合微生物菌剂及其制备方法和应用，涉及微生物技术领域。本发明专利技术的复合微生物菌剂的制备方法包括如下步骤：将植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2

【技术实现步骤摘要】
一种降解亚硝酸盐的复合微生物菌剂及其制备方法和应用


[0001]本专利技术属于微生物
，具体为一种降解亚硝酸盐的复合微生物菌剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]泡菜是一种以各种蔬菜为主要原料的食品，其中维生素及钙、铁、磷等多种矿物质含量丰富，豆类中还含有丰富的全价蛋白质。在泡制过程中，蔬菜处于常温或低温状态，不会对其中的维生素C和B族维生素产生破坏。相比于其他烹饪方式，泡菜具有更高的营养价值。但是，在腌制泡菜的过程中蔬菜中含有大量的硝酸盐，在还原酶和一些杂菌的作用下会转变成亚硝酸盐，而亚硝酸盐含量超标会导致中毒，在体内转化为亚硝胺也会增加患癌的风险，对人体有害。目前，亚硝酸盐的分解方法包括物理法、化学法、酶解法和微生物处理法。物理法一般通过加热、低温或真空隔离等方式对蔬菜进行前处理，但处理条件不当会影响食品的口感；化学法是利用黄酮、多酚等物质降解亚硝酸盐，但用于食品时易产生安全性问题；酶解法主要集中于从不同菌种中提取亚硝酸盐还原酶(NiRs)用于降解亚硝酸盐，但用于食品加工，成本和技术要求高。
[0003]乳酸菌是一种具有悠久历史的益生菌，由于其减轻炎症、抑菌、增强机体免疫能力、降低高血压、维持肠道微生态平衡等生理作用，已广泛应用于食品和医药领域。研究发现，乳酸菌代谢产物，包括亚硝酸还原酶和乳酸，可抑制硝酸盐还原菌的生长。因此，研究并开发一种能安全高效降解亚硝酸盐的复合微生物菌剂不仅增进机体健康，也可以为保障食品安全提供依据。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种复合微生物菌剂的制备方法，本专利技术获得的复合微生物菌剂可降解泡菜中的亚硝酸盐，且泡菜色泽鲜亮，质地鲜嫩，有浓郁的泡菜风味，口味适宜。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一种复合微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：将植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33活化培养后进行传代，传代后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33离心、去上清，再与冻干保护剂混合制成菌悬液；将所述菌悬液冷冻、冻干获得冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33；将冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33混合即得复合微生物菌剂。
[0007]优选地，所述冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33按体积比1～2：1～2：1～2混合。
[0008]优选地，所述活化培养时的培养基为MRS液体培养基。
[0009]优选地，所述活化培养的条件为35～38℃培养10～18h。
[0010]优选地，所述冻干保护剂包括脱脂乳粉、谷氨酸钠和海藻糖中的一种或几种。
[0011]更优选地，所述冻干保护剂与植物乳杆菌的体积质量比为2～4：1。
[0012]优选地，所述冷冻的条件为
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60～
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100℃环境下冷冻4～8h。
[0013]本专利技术提供了一种上述制备方法获得的复合微生物菌剂。
[0014]本专利技术还提供了一种所述复合微生物菌在泡菜加工中的应用。
[0015]本专利技术还提供了一种所述复合微生物菌剂在制备降解亚硝酸盐产品中的应用。
[0016]相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0017]本专利技术的复合微生物菌剂绿色、无毒、无害、可降解泡菜中亚硝酸盐含量，将其用于泡菜发酵后，泡菜中亚硝酸盐峰值低于自然发酵组，发酵时间明显缩短，且泡菜色泽鲜亮，质地鲜嫩，有浓郁的泡菜风味，口味适宜。
附图说明
[0018]图1为亚硝酸盐标准曲线图；
[0019]图2为不同复合微生物菌剂发酵获得的泡菜中亚硝酸盐含量变化图；
[0020]图3为不同复合微生物菌剂发酵获得的泡菜感官评定统计结果图；
[0021]图4为不同复合微生物菌剂发酵获得的泡菜滋味测定结果图；
[0022]图5为本专利技术实施例1的复合微生物菌剂的贮藏性能统计结果图。
具体实施方式
[0023]本专利技术提供了一种复合微生物菌剂的制备方法，包括如下步骤：将植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33活化培养后进行传代，传代后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33离心、去上清，再与冻干保护剂混合制成菌悬液；将所述菌悬液冷冻、冻干获得冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33；将冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33混合即得复合微生物菌剂。在本专利技术中，所述植物乳杆菌36于2022年7月在《降解亚硝酸盐乳杆菌的筛选鉴定及其NiRs酶学性质》文章中公开；所述植物乳杆菌42于2018年6月在《广谱抗菌活性乳酸杆菌的生物学特性及其应用研究》文章中公开；植物乳杆菌2
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33于2021年在《潜在益生作用乳酸菌的筛选鉴定及其生物学特性》一文中公开。在本专利技术的具体实施例中，所述离心的条件优选为4000r/min的离心机中离心5～15min；更优选为4000r/min的离心机中离心10min。在本专利技术中，所述植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33可通过常规市售购买。在本专利技术中，所述冻干处理在冻干机中进行，所述冻干温度优选为
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60～
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100℃，真空度优选为0.3～0.6KPa，冻干时间优选为24～36h。
[0024]在本专利技术中，所述冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33优选地按体积比1～2：1～2：1～2混合；更优选地，按体积比2：1：2混合。
[0025]在本专利技术中，所述活化培养时的培养基优选为MRS液体培养基。在本专利技术中，所述MRS液体培养基可购自常规市售产品。在本专利技术的具体实施例中，所述MRS液体培养基组分为酵母粉5.00g、蛋白胨10.00g、牛肉浸膏10.00g、葡萄糖20.00g、无水乙酸钠5.00g、磷酸氢二钾2.0g、柠檬酸二铵2.00g、吐温
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80 1.00mL、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、蒸馏水1.00L，pH调至6.2
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6.4。灭菌121℃，15min；向灭菌后的培养基中加入1.5％琼脂即得。
[0026]在本专利技术中，所述活化培养的条件优选为35～38℃培养10～18h；更优选为37℃培
养12h。在本专利技术的具体实施例中，将植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33活化培养后进行传代，优选地将第3代培养至对数生长期后再进行离心、去上清，进行后续冻干处理。
[0027]在本专利技术中，所述冻干保护剂包括脱脂乳粉、谷氨酸钠和海藻糖中的一种或几种。在本专利技术的具体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33活化培养后进行传代，传代后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33离心、去上清，再与冻干保护剂混合制成菌悬液；将所述菌悬液冷冻、冻干获得冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33；将冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33混合即得复合微生物菌剂。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述冻干后的植物乳杆菌36、植物乳杆菌42和植物乳杆菌2
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33按体积比1～2：1～2：1～2混合。3.根据权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：乌云达来，白高娃，张恩馨，何宇星，
申请(专利权)人：内蒙古农业大学，
类型：发明
国别省市：