针对痘病毒的信使核糖核酸疫苗制造技术

本发明专利技术提供抗痘病毒疫苗，其含下列抗原和/或融合抗原的mRNA：(a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或(b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L。本发明专利技术还提供抗痘病毒疫苗制备用试剂盒，其含：(i)DNA，其编码：(a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或(b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，及任选地(ii)用于将(i)的DNA转录成mRNA的试剂。本发明专利技术还提供制造上述疫苗和试剂盒的用途。用途。用途。

【技术实现步骤摘要】
针对痘病毒的信使核糖核酸疫苗


[0001]本专利技术涉及抗痘病毒疫苗和抗痘病毒疫苗制备用试剂盒。本专利技术还涉及制造上述疫苗和试剂盒的用途。

技术介绍

[0002]痘病毒(即痘病毒科(Poxviridae)病毒)是一类大型的致病性双链DNA病毒。
[0003]传染病疫苗是一种能够引起机体免疫应答，保护机体避免感染或者严重感染的物质，它可以是病原体本身，比如病毒，细菌，也可以是病原体的一部分，比如某个蛋白，也可以是编码病原体蛋白的遗传信息，比如其核糖核酸序列(RNA)或者脱氧核糖核酸序列(DNA)。
[0004]由于痘病毒科(Poxviridae)各病毒的基因及蛋白序列高度相似，因此用于一种痘病毒的疫苗也可以预防另一种痘病毒。目前市售的痘病毒疫苗有两种，均为全病毒疫苗。分别是ACAM2000和JYNNEOS。ACAM2000是一种可复制的牛痘病毒，接种后可能造成明显的副作用，比如全身性感染，湿疹，心肌炎甚至死亡。因此人们对该疫苗的安全性比较担心，接种该疫苗的意愿不高。JYNNEOS是一种复制缺陷型牛痘病毒，即不能在人体复制。但是由于其仍是全病毒，包含几百个蛋白，具体抗原信息不明确，而且有一些蛋白起到免疫调节功能，具体作用仍不清楚。因此，人们对该疫苗也有所担心。目前痘病毒的亚单位疫苗已有动物实验的相关报道，比如蛋白和DNA疫苗。蛋白通常需要借助体外细胞表达，纯化步骤比较复杂，而且由于是体外表达的产物，其三维结构有可能不同于病毒感染时的该蛋白结构，因而免疫原性的好坏存在不确定性。DNA疫苗制备相对简单，但是其递送需要借助基因枪，操作复杂，且有整合到人基因组的风险。因而也不是最佳疫苗选择。

技术实现思路

[0005]本专利技术涉及下列实施方式：
[0006]1.抗痘病毒疫苗，其含下列抗原和/或融合抗原的mRNA：
[0007](a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或
[0008](b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L。
[0009]2.根据实施方式1所述的疫苗，其中所述融合抗原是下列猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R和M1R。
[0010]3.根据实施方式1或2所述的疫苗，其中所述融合抗原的5'端附加有信号肽。
[0011]4.根据实施方式1所述的疫苗，其中所述猴痘病毒抗原和融合抗原的编码DNA选自：
[0012]SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、
[0013]SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、
[0014]SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0015]SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0016]SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和
[0017]SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA。
[0018]5.根据实施方式4所述的疫苗，其中所述mRNA从5'到3'依次包含：
[0019](1)5'帽，
[0020](2)5'UTR，
[0021](3)选自下列的编码DNA的对应RNA：
[0022]SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、
[0023]SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、
[0024]SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0025]SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0026]SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和
[0027]SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA，
[0028](4)3'UTR，和
[0029](5)多聚A尾。
[0030]6.根据实施方式5所述的疫苗，其中所述5'帽是m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG。
[0031]7.根据实施方式5所述的疫苗，其中
[0032]所述5'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：13所示，和/或
[0033]所述3'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：14所示。
[0034]8.根据实施方式5所述的疫苗，其中所述mRNA中的尿苷三磷酸是N1
‑
甲基假尿苷三磷酸。
[0035]9.根据实施方式1所述的疫苗，其中所述mRNA选自：
[0036]SEQ ID NO：2所示的A35R的mRNA、
[0037]SEQ ID NO：4所示的M1R的mRNA、
[0038]SEQ ID NO：6所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、
[0039]SEQ ID NO：8所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、
[0040]SEQ ID NO：10所示的B6R的mRNA、和
[0041]SEQ ID NO：12所示的A29L的mRNA。
[0042]10.根据实施方式1所述的疫苗，其中，当所述疫苗含两种以上的mRNA的混合物时，
[0043]先将所述两种以上的mRNA各自包封后再彼此混合，或
[0044]先将所述两种以上的mRNA彼此混合后再一体包封。
[0045]11.根据实施方式1所述的疫苗，其中所述mRNA用脂质纳米颗粒包封。
[0046]12.下列抗原和/或融合抗原的mRNA在制造抗痘病毒疫苗中的用途：
[0047](a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或
[0048](b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L。
[0049]13.根据实施方式12所述的用途，其中所述融合抗原是下列猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R和M1R。
[0050]14.根据实施方式12或13所述的用途，其中所述融合抗原的5'端附加有信号肽。
[0051]15.根据实施方式12所述的用途，其中所述猴痘病毒抗原和融合抗原的编码DNA选自：
[0052]SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、
[0053]SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、
[0054]SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0055]SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、
[0056]SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和
[0057]SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA。
[0058]16.根据实施方式15所述的用途，其中所述mRNA从5'到3'本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗痘病毒疫苗，其含下列抗原和/或融合抗原的mRNA：(a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或(b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L。2.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述融合抗原是下列猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R和M1R。3.根据权利要求1或2所述的疫苗，其中所述融合抗原的5'端附加有信号肽。4.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述猴痘病毒抗原和融合抗原的编码DNA选自：SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA。5.根据权利要求4所述的疫苗，其中所述mRNA从5'到3'依次包含：(1)5'帽，(2)5'UTR，(3)选自下列的编码DNA的对应RNA：SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA，(4)3'UTR，和(5)多聚A尾。6.根据权利要求5所述的疫苗，其中所述5'帽是m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG。7.根据权利要求5所述的疫苗，其中所述5'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：13所示，和/或所述3'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：14所示。8.根据权利要求5所述的疫苗，其中所述mRNA中的尿苷三磷酸是N1
‑
甲基假尿苷三磷酸。9.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述mRNA选自：SEQ ID NO：2所示的A35R的mRNA、SEQ ID NO：4所示的M1R的mRNA、SEQ ID NO：6所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、SEQ ID NO：8所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、SEQ ID NO：10所示的B6R的mRNA、和SEQ ID NO：12所示的A29L的mRNA。
10.根据权利要求1所述的疫苗，其中，当所述疫苗含两种以上的mRNA的混合物时，先将所述两种以上的mRNA各自包封后再彼此混合，或先将所述两种以上的mRNA彼此混合后再一体包封。11.根据权利要求1所述的疫苗，其中所述mRNA用脂质纳米颗粒包封。12.下列抗原和/或融合抗原的mRNA在制造抗痘病毒疫苗中的用途：(a)选自下列的一种以上的猴痘病毒抗原：A35R、M1R、B6R和A29L，和/或(b)选自下列的两种或多种猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R、M1R、B6R和A29L。13.根据权利要求12所述的用途，其中所述融合抗原是下列猴痘病毒抗原或抗原的一部分融合而成的融合抗原：A35R和M1R。14.根据权利要求12或13所述的用途，其中所述融合抗原的5'端附加有信号肽。15.根据权利要求12所述的用途，其中所述猴痘病毒抗原和融合抗原的编码DNA选自：SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA。16.根据权利要求15所述的用途，其中所述mRNA从5'到3'依次包含：(1)5'帽，(2)5'UTR，(3)选自下列的编码DNA的对应RNA：SEQ ID NO：1所示的A35R的编码DNA、SEQ ID NO：3所示的M1R的编码DNA、SEQ ID NO：5所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：7所示的A35R和M1R的融合抗原的编码DNA、SEQ ID NO：9所示的B6R的编码DNA、和SEQ ID NO：11所示的A29L的编码DNA，(4)3'UTR，和(5)多聚A尾。17.根据权利要求16所述的用途，其中所述5'帽是m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG。18.根据权利要求16所述的用途，其中所述5'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：13所示，和/或所述3'UTR的编码DNA的序列如SEQ ID NO：14所示。19.根据权利要求16所述的用途，其中所述mRNA中的尿苷三磷酸是N1
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甲基假尿苷三磷酸。20.根据权利要求12所述的用途，其中所述mRNA选自：SEQ ID NO：2所示的A35R的mRNA、
SEQ ID NO：4所示的M1R的mRNA、SEQ ID NO：6所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、SEQ ID NO：8所示的A35R和M1R的融合抗原的mRNA、SEQ ID NO：10所示的B6R的mRNA、和SEQ ID NO：12所示的A29L的mRNA。21.根据权利要求12所述的用途，其中，当由两种以上的mRNA的混合物制造疫苗时，先将所述两种以上的mRNA各自包封后再彼此混合，或先将所述两种以上的mRNA彼此混合后再一体包封。22.根据权利要求12所述的用途，其中所述mRNA用脂质纳米颗粒包封。23.根据权利要求12所述的用途，其中所述疫苗用于抗选自下列的一种以上的属的痘病毒：正痘病毒属(Orthopoxvirus)、羊痘病毒属(Capripoxvirus)、鹿痘病毒属(Cervidpoxvirus)、猪痘病毒属(Suipoxvirus)、兔痘病毒属(Leporipoxvirus)、软疣痘病毒属(Molluscipoxvirus)、亚塔痘病毒属(Yatapoxvirus)、禽痘病毒属(Avipoxvirus)、鳄鱼痘病毒属(Crocodylidpoxvirus)和副痘病毒属(Parapox...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘小虎，亚纳尔，
申请(专利权)人：上海复诺健生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：