一种青春双歧杆菌菌株及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种青春双歧杆菌及其应用，属于益生菌技术领域。所述青春双歧杆菌的保藏编号为CGMCC No.25046，能够耐受人体的胃肠液环境，具有较好的黏附能力和抗氧化能力；能够利用多种低聚糖，能够定殖在肠道长效的发挥作用。该菌株对多种抗生素敏感，具有生物安全性，对大肠杆菌O157：H7具有显著的抑菌能力，能够改善小鼠细菌性结肠炎患病期间的体重减轻情况，改善小鼠的进食量，对结肠上皮组织有修复作用，增加了小鼠结肠杯状细胞，降低了炎症浸润，改善了隐窝深度，下调了细菌性结肠炎小鼠促炎因子TNF

【技术实现步骤摘要】
一种青春双歧杆菌菌株及其应用


[0001]本专利技术属于益生菌筛选与应用
，具体涉及一种青春双歧杆菌菌株及其应用。

技术介绍

[0002]肠道是人体中最大的免疫器官并具有最大的微生态体系，肠道菌群由100多万亿个细菌组成，其中包括100多个种类、多种酶，菌群通过不同过程的新陈代谢共同维持肠道微生态平衡，调控肠道内功能。成人的肠道中的总细菌重为1～1.5公斤，10倍于人类的细胞。一般情况下，肠道有益菌群主要包括双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、乳酸菌等，它们通常能够促进肠道蠕动，预防肠道感染、提高人体免疫力。条件致病菌群有肠球菌、大肠杆菌、变形杆菌等，在肠道的有益菌群较多的情况下，条件致病菌群通常能够稳定地与有益菌群共存，如果饮食不当、抵抗力下降，造成肠道有益菌群被破坏，条件致病菌群可能会导致肠道疾病，如肠炎，腹泻、腹痛等。致病菌群包括沙门氏菌、葡萄球菌、绿脓杆菌等，通常饮食不当、长期使用抗生素类药物等原因可能会导致致病菌群进入肠道，破坏肠道屏障并引起肠道疾病。近年来，肠道菌群和益生菌的研究发展迅速，人们越来越关注益生菌在预防、缓解甚至治疗特定疾病的作用。
[0003]如今，益生菌被发现能显著抑制致病菌，与病原体竞争定植位点，并且有免疫调节、抗肿瘤和治疗胃肠道疾病等作用。双歧杆菌是一种常见的生理菌类，是一种与人类的身体息息相关的益生菌。双歧益生菌一般在肠道表面固定，可以分解生成短链脂肪酸和其它具有抗菌作用的有机物，从而有效地阻止病菌的繁殖；通过调节人体内的生物化学性质，修复肠道屏障并且能够维持黏膜屏障完整性，甚至对于抑制人体癌变的发生、降低胆固醇水平有一定疗效。利用双歧杆菌抑制常见致病菌或许能够成为改善细菌性肠炎的有效方法。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种青春双歧杆菌菌株。所述菌株分离自健康婴儿的粪便中，具有较强的胃肠液耐受性、黏附能力和抑菌能力，能有效缓解细菌性肠炎的症状，有助于肠道健康的恢复。
[0005]本专利技术提供了一种青春双歧杆菌，命名为青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)FS2
‑
3，且已于2022年06月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.25046。
[0006]本专利技术一方面提供了所述青春双歧杆菌的培养方法，包括以下步骤：将低温保存的青春双歧杆菌接种于双歧杆菌液体培养基中进行活化，于37℃、5％CO2、5％H2和90％N2的厌氧培养箱中培养，每代厌氧培养24h。
[0007]所述双歧杆菌液体培养基中各组分及其含量分别为：胰蛋白胨10g/L，无水乙酸钠3g/L，磷酸氢二钾2g/L，七水合硫酸镁0.575g/L，一水合硫酸锰0.25g/L，葡萄糖20g/L，柠檬酸三钠2.42g/L，酵母浸粉4g/L，牛肉浸膏8g/L，吐温1ml/L，L
‑
半胱氨酸盐酸盐0.5g/L。
[0008]本专利技术还提供了所述青春双歧杆菌在制备抑菌剂中的应用。
[0009]本专利技术还提供了所述青春双歧杆菌在食品或保健品中的应用。
[0010]本专利技术还提供了所述青春双歧杆菌在制备具有抗氧化功能的药品中的应用。
[0011]本专利技术还提供了所述青春双歧杆菌在制备用于缓解或治疗由细菌引发的结肠炎的药品中的应用。
[0012]所述的细菌为大肠杆菌、沙门氏菌或金黄葡萄球菌。
[0013]与现有技术相比，本专利技术的有益效果：
[0014]青春双歧杆菌FS2
‑
3生物安全性良好，对氯霉素和头孢噻肟钠敏感，对阿莫西林和多粘菌素E硫酸盐中度敏感，且该菌株对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄葡萄球菌均有明显的抑制作用，其中对大肠杆菌的抑制能力最强，抑菌圈直径超过14mm。
[0015]青春双歧杆菌FS2
‑
3对人工胃肠液具有很强的耐受性；其中在人工胃液中处理2h后，FS2
‑
3菌株的存活率高达88.6％，在人工肠液环境中处理24h后，仍能保持22.5％的存活率，显著高于对照菌青春双歧杆菌CICC6070。
[0016]青春双歧杆菌FS2
‑
3具有强疏水性，其疏水性高达75％，显著高于对照菌株；其自凝集率随时间逐渐上升，且在6h后明显高于对照菌株；具备一定的的黏蛋白结合能力，能够有效的黏附肠粘膜，并在肠粘膜表面形成益生菌屏障，抑制有害菌的定植和入侵。
[0017]青春双歧杆菌FS2
‑
3具有较强的抗氧化性能，其完整细胞和无细胞提取物对DPPH的清除率均超过了65％，具有良好的还原力，还原力大小的范围为72.01
‑
57.50(μM)。
[0018]动物实验结果显示，青春双歧杆菌FS2
‑
3能有效缓解小鼠的细菌性结肠炎。通过灌胃青春双歧杆菌FS2
‑
3，能显著减轻细菌性结肠炎引发的进食量减少、体重下降的症状，下调血清中炎症因子TNF
‑
α、IL
‑
1β、IL
‑
6的表达，降低c反应蛋白CRP水平，提高细菌性结肠炎小鼠肠道内乙酸、丙酸和丁酸等短链脂肪酸的含量，减少炎症细胞浸润，对小鼠的结肠组织有很好的修复作用。
[0019]综上，本专利技术提供的青春双歧杆菌FS2
‑
3具有良好的生理特性，能够通过增强免疫反应和机械屏障缓解和修复细菌性结肠炎。该菌株可广泛应用于食品、保健品和药品生产领域，市场前景广阔。
附图说明
[0020]图1为青春双歧杆菌FS2
‑
3菌落形态图；
[0021]图2为青春双歧杆菌FS2
‑
3菌株形态图；
[0022]图3为16SrDNA序列系统发育树图；
[0023]图4为青春双歧杆菌FS2
‑
3的抑菌效果图；
[0024]图5为青春双歧杆菌FS2
‑
3对DPPH自由基的清除效果图；
[0025]图6为青春双歧杆菌FS2
‑
3还原力大小的柱状统计图；
[0026]图7为各组小鼠进食量和体重变化图；
[0027]图8为各组小鼠结肠组织切片HE染色图(放大倍数
×
40)；
[0028]图9为各组小鼠血清中炎症因子TNF
‑
α、IL
‑
1β、IL
‑
6和C反应蛋白CRP表达量对比图；
[0029]图10为各组小鼠盲肠内容物中乙酸、丙酸和丁酸的含量对比图。
具体实施方式
[0030]下而将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0031]本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种青春双歧杆菌，其特征在于，所述青春双歧杆菌的保藏编号为CGMCC No.25046。2.权利要求1所述的青春双歧杆菌的培养方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：将青春双歧杆菌接种于双歧杆菌液体培养基中进行活化，于37℃、5％CO2、5％H2和90％N2的厌氧培养箱中培养，每代厌氧培养24h。3.如权利要求2所述的培养方法，其特征在于，所述方法中双歧杆菌液体培养基中各组分及其含量分别为：胰蛋白胨10g/L，无水乙酸钠3g/L，磷酸氢二钾2g/L，七水合硫酸镁0.575g/L，一水合硫酸锰0.25g/L，葡...

【专利技术属性】
技术研发人员：乌日娜，武俊瑞，张鹤男，张兰威，史玉东，翟齐啸，李树森，史海粟，孙二娜，
申请(专利权)人：沈阳农业大学，
类型：发明
国别省市：